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血細(xì)胞分析精選(九篇)

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血細(xì)胞分析

第1篇:血細(xì)胞分析范文

關(guān)鍵詞:血細(xì)胞分析儀 檢定 問題

血細(xì)胞分析儀是廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域的血液檢測儀器,能檢測出血液參數(shù)中紅白細(xì)胞總數(shù)、血小板和血紅蛋白等多種血液項目,所檢驗出來的參數(shù)能為醫(yī)生診斷和治療患者提供有效依據(jù)。目前來看,紅細(xì)胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限于人和動物的血液檢驗,已應(yīng)用于腹腔腦脊髓細(xì)胞計算和分類中。雖然隨著科學(xué)技術(shù)不斷的發(fā)展,血細(xì)胞分析儀功能逐漸增多、應(yīng)用范圍拓展,但是在其實際應(yīng)用中常會出現(xiàn)一些問題,為了保證血細(xì)胞分析儀質(zhì)量,相應(yīng)計量檢定部門需要對血細(xì)胞分析儀進(jìn)行定期計量檢定,以便及時發(fā)現(xiàn)問題予以解決。下文對血細(xì)胞分析儀檢定相關(guān)問題進(jìn)行分析。

一、檢定規(guī)程不完善

科學(xué)技術(shù)不斷的發(fā)展,使血細(xì)胞分析儀的種類和功能逐漸增多,分析儀分析的參數(shù)也隨之增多,醫(yī)生對血細(xì)胞分析儀的依賴性也越來越大。而血細(xì)胞分析儀分析的參數(shù)必須準(zhǔn)確,才能為醫(yī)生提供有效參考依據(jù)。這就需要適時地對血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢定,檢定過程中一般會依據(jù)分析儀計量檢定規(guī)程,現(xiàn)有的規(guī)程中對分析儀檢定參數(shù)的規(guī)定只有幾項,然而目前很多醫(yī)院臨床中采用的多是兩分類、三分類和五分類的血細(xì)胞分析儀,其中五分類的血細(xì)胞分析儀檢驗參數(shù)已多達(dá)數(shù)十種,這就使得檢定人員因無血細(xì)胞分析儀檢定依據(jù),不能更好的對白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血紅蛋白以外的參數(shù)進(jìn)行計量檢定。

此外,血細(xì)胞分析儀計量檢定規(guī)定中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)也不能更好滿足分析儀校準(zhǔn)需求。相關(guān)人士在用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對兩分類和三分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢定時,發(fā)現(xiàn)被檢定的血細(xì)胞分析儀無法識別計量檢定規(guī)定中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),使用過程中標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是無效的。后來經(jīng)過經(jīng)驗豐富的檢定專家和檢定人員反復(fù)測試后,得出不同血細(xì)胞分析儀只有選擇適應(yīng)性好的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行計量檢定,才能更好的發(fā)揮作用。因此,血細(xì)胞分析儀檢定規(guī)程必須完善,為分析儀檢定工作提供有效依據(jù),保證分析儀參數(shù)準(zhǔn)確性。

二、分析儀檢測技術(shù)問題

血細(xì)胞分析儀主要是由機(jī)械系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng)、細(xì)胞檢測系統(tǒng)和計算機(jī)控制系統(tǒng)構(gòu)成的,其中細(xì)胞檢測系統(tǒng)對技術(shù)結(jié)果影響最大,現(xiàn)在國內(nèi)采用的技術(shù)以電阻抗檢測技術(shù)和光散檢測技術(shù)為主。電阻抗檢測技術(shù)就是在稀釋液中設(shè)置一個微孔,在微孔兩端各加適量的電極,再將稀釋后的負(fù)壓加向微孔小管中,這樣就可以通過電極電阻變化產(chǎn)生的電脈沖信號,進(jìn)行顆粒計數(shù),再經(jīng)過甄別、選擇和計數(shù)得到相應(yīng)檢測數(shù)據(jù)。但是這種檢測技術(shù)因無法辨別白細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),不能準(zhǔn)確的進(jìn)行計數(shù)或得出準(zhǔn)確參數(shù)數(shù)據(jù);光散射技術(shù)是血液稀釋后變成極細(xì)液流穿過激光束,使細(xì)胞被激光照射從而形成散射被光電倍增接收,這時利用細(xì)胞散射脈沖信號識別、甄選細(xì)胞,再經(jīng)過計算機(jī)得出細(xì)胞數(shù)量參數(shù)。這種技術(shù)雖然能彌補(bǔ)電阻抗檢測技術(shù)的劣勢,但是因價格高而未被廣泛使用。

三、血細(xì)胞溫度問題

血細(xì)胞分析儀作為溫度適應(yīng)性較為敏感的儀器,受溫度環(huán)境影響明顯,即便在參數(shù)一定情況下,溫度變化也會影響血細(xì)胞檢測數(shù)據(jù)值。尤其是冬季和夏季對一些條件相對較差醫(yī)院的血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢定時,因溫度與血細(xì)胞儀適應(yīng)的溫度不相符,使得常用的全血質(zhì)控物無法更好的對分析儀進(jìn)行校準(zhǔn),從而影響血細(xì)胞分析儀參數(shù)的準(zhǔn)確性?;诖藢ρ?xì)胞分析儀進(jìn)行定期檢定十分重要,雖然一些條件相對較好的醫(yī)院用全血質(zhì)控物對分析儀進(jìn)行定期檢定和校準(zhǔn),但是畢竟少數(shù),還有一部分醫(yī)院沒有條件或沒有用全血質(zhì)控物對分析儀進(jìn)行檢定,這一定程度上會使分析儀檢驗參數(shù)不準(zhǔn)確,無法為醫(yī)生診斷和治療提供有效數(shù)據(jù)。

四、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)問題

血細(xì)胞檢測儀檢定前需要選擇紅細(xì)胞和包細(xì)胞微粒作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),對紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行檢定。因兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢定是以電阻法為依據(jù)進(jìn)行的,其檢驗結(jié)果計數(shù)為零,不能確保紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測數(shù)據(jù)質(zhì)量。全血標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為特殊的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),具備紅細(xì)胞和白細(xì)胞通用性質(zhì),而這種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在出倉、運(yùn)輸、保存過程中容易出現(xiàn)不按計量規(guī)定執(zhí)行問題,使標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)受到損傷,從而使檢定結(jié)果無法達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。具體來說,運(yùn)輸中車輛會產(chǎn)生震動,使紅細(xì)胞受到擠壓、變形或破裂使出血紅蛋白被釋放。再加上運(yùn)輸過程中對保存條件有嚴(yán)格要求,溫度在2~8℃之間且存放于血箱之中,使用冰袋兩天之內(nèi)必須保證溫度在10℃以下,一旦溫度過高,就會使紅細(xì)胞出現(xiàn)溶血現(xiàn)象;采購出來的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使需要放入冷藏箱儲存的,如果儲存過程中出現(xiàn)停電事故或頻繁的開啟冰箱,會破壞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)環(huán)境使紅細(xì)胞中的血紅蛋被釋放。保準(zhǔn)物質(zhì)保存時間也不應(yīng)該過長,過長容易出現(xiàn)自溶、體積變小或使血小板發(fā)生變化,影響計數(shù)結(jié)果;血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用前也有嚴(yán)格規(guī)定,必須在標(biāo)準(zhǔn)溫度下?lián)u勻,以便得到好的重復(fù)性。如果不在標(biāo)準(zhǔn)溫度下來搖勻標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),會影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

五、操作問題

血細(xì)胞分析儀檢定過程中有全血模式和預(yù)稀釋模式兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選擇,從前人的實踐結(jié)果可知全血模式的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)較稀釋模式重復(fù)性低,其與測定時稀釋液和樣品量準(zhǔn)確性有直接關(guān)系,這兩種模式之間除對白細(xì)胞進(jìn)行檢驗外,其他結(jié)果幾乎無共性。在對血細(xì)胞進(jìn)行檢測前,必須保證血細(xì)胞分析儀細(xì)胞計數(shù)和規(guī)程一致,如果血細(xì)胞分析儀之前進(jìn)行過臨床檢驗,清洗幾次就能達(dá)到要求。如果使用時血小板計數(shù)超過150×109/L時,需要對儀器接頭、地線進(jìn)行檢查,看其是否出現(xiàn)問題,以免因上述問題使血小板受到干擾。為了確保分析儀質(zhì)量,除了清洗儀器和安裝地線外,還應(yīng)該保證血小板基數(shù)不大于2,以保證血細(xì)胞分析儀繼續(xù)工作。血細(xì)胞分析儀周圍環(huán)境對血細(xì)胞分析測量也有直接影響,其中灰塵對血小板的影響最大,若檢測中把灰塵當(dāng)作血小板會使檢測計數(shù)偏高,從而影響血細(xì)胞分析儀檢測數(shù)據(jù)真實性。此外,血細(xì)胞分析儀周圍的電壓、噪音、高強(qiáng)度磁場等會成為分析儀干擾源,使血細(xì)胞分析儀不能順利進(jìn)行檢測工作。

結(jié)束語:

血細(xì)胞分析檢定工作中一般會因檢定規(guī)程不完善問題、技術(shù)問題、溫度問題、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)問題和操作問題的影響,而使血細(xì)胞分析儀檢定工作無法順利開展,分析儀數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性無法得到保證?;诖?,國家行政部門應(yīng)該從實際出發(fā)對血細(xì)胞分析儀計量檢定規(guī)程進(jìn)行完善,檢定專業(yè)人員應(yīng)不斷的研究分析儀檢定新技術(shù)、注意血細(xì)胞分析儀操作流程和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的管理工作,以確保血細(xì)胞分析檢定工作有序進(jìn)行。同時醫(yī)院也應(yīng)該合理的制定血細(xì)胞分析儀檢定計量標(biāo)準(zhǔn),適時地對分析儀進(jìn)行周期性檢定,以減少血細(xì)胞分析儀參數(shù)不穩(wěn)定性,保證人們生命健康。

參考文獻(xiàn):

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[2]蔣雪萍,馮俊.血細(xì)胞分析儀檢測技術(shù)的研究與探討[J].計量與測試技術(shù). 2011(10).

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第2篇:血細(xì)胞分析范文

【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀;比對試驗;檢測系統(tǒng)

【中圖分類號】R446.77 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1008-6455(2010)08-0218-01

血細(xì)胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標(biāo),其結(jié)果的準(zhǔn)確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細(xì)胞分析儀由于計數(shù)準(zhǔn)確,精密度高,操作簡便、快速,因而發(fā)展迅速,已逐漸取代傳統(tǒng)手工方法,成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產(chǎn)血細(xì)胞分析儀的廠家多,各自使用的測定原理和方法不盡相同,導(dǎo)致其測定結(jié)果及參考范圍有所差異。各醫(yī)院使用不同廠家和型號的血細(xì)胞分析儀已成為普遍現(xiàn)象,致使分析結(jié)果呈現(xiàn)不同程度的差異,給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難[1]。

根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法》的規(guī)定,掌握本室內(nèi)機(jī)臺血細(xì)胞分析儀結(jié)果的可比性和可靠性,保證本室內(nèi)檢測結(jié)果的一致性。本文對本室內(nèi)的兩臺(貝克曼庫爾特 HL-750和SysmexXH-2100)不同廠家.不同型號的血細(xì)胞分析儀的結(jié)果進(jìn)行了比對,兩臺血細(xì)胞分析儀性能穩(wěn)定,使用配套的校準(zhǔn)品.質(zhì)控品和試。每日有室內(nèi)質(zhì)控血球檢測,對兩臺血細(xì)胞分析儀測定的WBC.RBC.Hb.HCT.PLT結(jié)果進(jìn)行比對試驗,結(jié)果報道如下:

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器:血細(xì)胞分析儀兩臺,分別是貝克曼庫爾特公司的HL-750血細(xì)胞分析儀和Sysmex公司的XH-2100血細(xì)胞分析儀。

1.1.2 主要試劑:HL-750血細(xì)胞分析儀試劑.校準(zhǔn)品.質(zhì)控品由美國貝克曼庫爾特公司提供;XH-2100血細(xì)胞分析儀試劑.校準(zhǔn)品.質(zhì)控品由希思美康公司提供的Sysmex產(chǎn)品。

1.1.3 標(biāo)本:臨床患者新鮮靜脈抗凝血??鼓齽镋DTA-k2,采血管為奧地利格雷娜公司的真空采血管。

1.2 方法

1.2.1 室內(nèi)質(zhì)控:各臺血細(xì)胞分析儀每天用全血質(zhì)控物測定,其中包括WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV結(jié)果為室內(nèi)質(zhì)控項目,結(jié)果在控制允許范圍內(nèi)。

1.2.2 比對實驗:采取患者新鮮靜脈血標(biāo)本,每日選取10例,其中包括高.中.低值血細(xì)胞標(biāo)本,分別進(jìn)行WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV檢測,重復(fù)測定2次,取平均值,供測定5天,實驗在2小時內(nèi)完成。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理:各種數(shù)據(jù)使用MicrosoftExcel 工具中函數(shù)計算;方法:在Excel 方格中分別輸入兩臺血細(xì)胞分析儀的WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV 數(shù)據(jù),計算兩組數(shù)據(jù)的CV值,相關(guān)系數(shù).回歸方程。

2 結(jié)果

2.1 2臺血細(xì)胞分析儀每日室內(nèi)質(zhì)控,共計測定30天,CV值見表1。

3 討論

血細(xì)胞分析儀因為計數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確、精度高,操作簡便、快速,因而發(fā)展迅速,成為臨床實驗室地主要檢測手段。在國內(nèi)大中型醫(yī)院,同一實驗室使用不同廠家和型號的血細(xì)胞計數(shù)儀已成為較普遍現(xiàn)象,即使各儀器配套質(zhì)控物都在允許范圍內(nèi),也會出現(xiàn)同一標(biāo)本用不同地儀器分析,出現(xiàn)測定值的差異,給評估和解釋結(jié)果帶來一定困難,并不時地給疾病地診斷、治療及預(yù)后帶來誤解和不良地影響,又增加了經(jīng)濟(jì)成本[2]。

通過新鮮全血對2臺儀器測定結(jié)果比對表明:2臺儀器地相關(guān)性較好,尤其WBC、RBC、HGB、3個項目結(jié)果相關(guān)密切(r均>0.975),結(jié)果間沒有明顯差異,PLT結(jié)果相關(guān)性也很好,NCCLS推薦地多臺血細(xì)胞分析儀計數(shù)PLT地CV值可為25%。其中C-5d,C-2d和CD-1700,3臺儀器相關(guān)性好,BC-3000略差一些。結(jié)果間地比對是了解儀器之間測定結(jié)果地可比性和可靠性,保證實驗室內(nèi)結(jié)果地一致性。以上結(jié)果表明:4臺血細(xì)胞分析儀具有很好地可比性,可用新鮮全血替代配套質(zhì)控物每天對4臺血細(xì)胞分析儀進(jìn)行質(zhì)控。

各臺血液分析儀各項檢測指標(biāo)的結(jié)果穩(wěn)定、精密度好,CV值均

參考文獻(xiàn)

[1] 彭明婷,谷小林,等.不同方法校準(zhǔn)血液分析儀結(jié)果比較.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2000,23(1):35-37

[2] 李軍. 血細(xì)胞分析儀的質(zhì)控與結(jié)果比對[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(12):715-717

第3篇:血細(xì)胞分析范文

1材料與方法

1.1方法

1.1.1儀器精密度測定取正常EDTA-K2抗凝新鮮全血一份,分別在每一臺儀器上連續(xù)重復(fù)測定20次,計算RBC、WBC、HGB、HCT、PLT的均值、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)。

1.1.2比對試驗以CD-3700血細(xì)胞分析儀為參考比對儀器(X)。每日檢測8份血清標(biāo)本,將新鮮抗凝全血標(biāo)本按18,81的順序分別在三臺血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行連續(xù)測定,2h內(nèi)完成。連續(xù)測定5d,記錄檢測結(jié)果。

1.2統(tǒng)計學(xué)處理采用MicrosoftExcel2003和SPSS16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和相關(guān)性統(tǒng)計分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義,并給出線性回歸方程Y=bX+a。精密度評價根據(jù)美國臨床實驗室改進(jìn)方案(CLIA'88)允許誤差的1/4作為允許誤差,各比對項目的CV值必須滿足:RBC≤1.5%、WBC≤3.5%、HGB≤1.75%、HCT≤1.5%、PLT≤6.25%。以美國臨床實驗室改進(jìn)方案(CLIA''''88)能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2作為各項目檢測結(jié)果的允許誤差:RBC≤3.0%、WBC≤7.0%、HGB≤3.5%、HCT≤3.0%、PLT≤12.5%[3]。

2結(jié)果

2.1精密度評價RBC、WBC、HGB、HCT、PLT五個檢測項目在三臺血細(xì)胞分析儀上精密度均符合要求。見表1。

2.2相關(guān)性和回歸分析試驗儀器(Y)與比對儀器(X)測定結(jié)果相關(guān)性見表2。

2.3偏倚評估將各檢測項目的靶值代入相應(yīng)的回歸方程,計算比較方法與試驗方法測定結(jié)果的預(yù)期偏倚和相對偏倚,以CLIA''''88能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2為臨床可接受性能的判斷標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果見表3。

3討論

隨著檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展,越來越多的臨床實驗室引進(jìn)不同檢測儀器,構(gòu)建多種檢測系統(tǒng),以提高患者標(biāo)本的檢測速度。臨床實驗室內(nèi)同時擁有2種或2種以上相同或不同的檢測系統(tǒng)已經(jīng)十分普遍。為確保不同儀器檢測同一檢測項目的結(jié)果具有一致性,CAP認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)中要求,試驗室每年需要進(jìn)行至少2次儀器比對[4]。另外,考慮到實驗成本的因素,每個實驗室每年參加室間質(zhì)量評價的儀器往往選擇其中一臺常用儀器,其他儀器做好室內(nèi)質(zhì)量控制,通過與參加室間質(zhì)評的儀器做比對,以保證同一標(biāo)本在不同系統(tǒng)檢測時得到具有可比性的結(jié)果。

本次試驗顯示,三臺血細(xì)胞分析儀的精密度均較高,CV值均在允許范圍內(nèi)。CD-3700血細(xì)胞分析儀參加每年的室間質(zhì)評活動,并且質(zhì)評成績優(yōu)秀,因此確定CD-3700血細(xì)胞分析儀為參考比對儀器。新購買的XS-800i全血細(xì)胞分析儀和XE-5000血液分析系統(tǒng)作為試驗儀器進(jìn)行比對。相關(guān)與回歸分析結(jié)果顯示,兩臺試驗儀器與比對儀器的相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.975,說明X分布范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠,可以用回歸統(tǒng)計的方法評估試驗儀器與比對儀器之間的系統(tǒng)誤差。以CLIA''''88能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2作為臨床可接受性能的判斷標(biāo)準(zhǔn),兩臺試驗儀器的相對偏倚均在允許范圍內(nèi),檢測結(jié)果可接受。

第4篇:血細(xì)胞分析范文

五分類血細(xì)胞分析儀的廣泛應(yīng)用,大大提高了臨床血液學(xué)檢驗的質(zhì)量和速度。然而,它們只能作為血液常規(guī)分析過程中的過篩手段,遇到一些異常的結(jié)果時還必須用顯微鏡復(fù)查血片,方能發(fā)出報告。作者采用五分類血細(xì)胞分析儀篩查,顯微鏡形態(tài)學(xué)復(fù)查,查出血液系統(tǒng)疾病136 例,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2006—2007年用五分類血細(xì)胞分析儀對門診、病房約6萬例進(jìn)行查血液常規(guī)檢查,發(fā)現(xiàn)有異常的做顯微鏡復(fù)查,發(fā)現(xiàn)血液系統(tǒng)疾病136 例。其中急性非淋巴細(xì)胞白血病23 例,急性淋巴細(xì)胞白血病8 例,慢性粒細(xì)胞白血病4 例,多發(fā)性骨髓瘤4 例,巨幼細(xì)胞性貧血35 例,缺鐵型貧血32 例,骨髓增殖性疾病25 例,再生障礙性貧血5 例,他們均為初診患者,并經(jīng)骨髓形態(tài)學(xué)或經(jīng)上級醫(yī)院檢查證實。其中男63 例,女73 例,年齡15~81歲。

1.2 檢驗方法

1.2.1 儀器 COULTER——HmX血細(xì)胞分析儀及配套試劑,全血質(zhì)控液COULTER公司提供。

1.2.2 方法 常規(guī)消毒法采集靜脈血2 mL(嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進(jìn)行,每天隨機(jī)質(zhì)控)。對白細(xì)胞數(shù)量及直方圖異常者涂片做瑞-吉染色,計數(shù)分類200個白細(xì)胞,并作形態(tài)觀察。

2 結(jié)

結(jié)果見表1。表1 136例血液病的種類和構(gòu)成比血液病名稱ANLLALLCMLMMMgAIDAMDSAA病例數(shù)

3 討

五分類自動血液分析儀具有方便、高精度。它是在一個流式通道內(nèi),對單個白細(xì)胞進(jìn)行直接、同時、三重測量,然后再進(jìn)行三維分析。顯微鏡下觀察的細(xì)胞形態(tài)是細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),包括細(xì)胞質(zhì)的顏色、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無顆粒及顆粒的性質(zhì)、核的形狀、有無核仁等。異常白細(xì)胞直方圖粗略地顯示各類白細(xì)胞細(xì)胞比例或有無明顯異常細(xì)胞出現(xiàn),手工顯微鏡復(fù)查時注意這些變化的真正病理意義,而不能僅從白細(xì)胞直方圖的變化來進(jìn)行臨床診斷。堅決反對單位使用血細(xì)胞分析儀后,就一律不再作鏡下復(fù)查和分類的錯誤傾向[1]。血液分析儀只對典型的血液病作出提示診斷,以便作進(jìn)一步的檢查。如果對儀器的計數(shù)原理,異常報警掌握不夠,特別是用不配套的稀釋液、溶血素,造成直方圖不典型,往往忽視血涂片檢查,造成誤診和漏診,而血細(xì)胞的質(zhì)和量異常恰恰是血液病的重要表現(xiàn)。所以,對一些直方圖有異常的患者,一定要鏡檢。本文報道的136 例血液系統(tǒng)疾病,是從約6 萬例標(biāo)本中篩查出來的,并結(jié)合手工復(fù)檢,經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)證實。其中血液惡性疾病占陽性比例28.5%,各種類型的貧血占49.3%。骨髓增殖性疾病占18.4%,再障占3.8%,各種貧血接近占一半,可能與人們的飲食習(xí)慣、疾病的本身有關(guān)。惡性白血病的比例也很大,可能與飲食、居住環(huán)境、工作環(huán)境、自身免疫有很大關(guān)系。但如若大意,定會漏診和誤診。血液病特別是白血病的診斷主要依靠MICM(形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué))[2]。但在基層工作中,血細(xì)胞分析儀加上形態(tài)學(xué)復(fù)檢和重要的臨床癥狀(出血發(fā)熱、貧血),可以為血液系統(tǒng)疾病患者做出初步的診斷,使患者得到及時的治療。

參考文獻(xiàn)

第5篇:血細(xì)胞分析范文

各級醫(yī)院臨床檢驗應(yīng)用中非常廣泛的儀器之一就是血細(xì)胞分析儀,隨著計算機(jī)技術(shù)的快速發(fā)展和數(shù)據(jù)處理技術(shù)的日新月異,血細(xì)胞分析儀的自動化水平和可檢測維度也越來越高,給臨床檢驗帶來了極大的方便性和準(zhǔn)確性。筆者在基層醫(yī)院的臨床應(yīng)用中,積累了許多檢測數(shù)據(jù)和病例,并進(jìn)行了對比分析,結(jié)合實際進(jìn)一步探究了影響血細(xì)胞分析儀測定結(jié)果的實踐因素。

1 環(huán)境溫度的干擾

實驗室環(huán)境溫度決定了儀器、試劑以及標(biāo)本的溫度,計數(shù)時稀釋液的溫度應(yīng)為( 22±4) ℃ 。當(dāng)稀釋液的溫度低時,紅細(xì)胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當(dāng)試劑溫度低于18 ℃時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現(xiàn)結(jié)晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細(xì)小的結(jié)晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細(xì)胞計數(shù)必然增高。我們基層醫(yī)院地處北方,這種情況在實際操作中時有發(fā)生,尤其是在冬季。血細(xì)胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產(chǎn)生的聚合結(jié)晶,常使分析結(jié)果出現(xiàn)異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進(jìn)行加熱,以升高溫度, 消除結(jié)晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結(jié)晶的發(fā)生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計數(shù)假性降低。

2 抗凝劑的影響

ABX60血液細(xì)胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結(jié)果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時,不影響分析結(jié)果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時抗凝效果欠佳, 出現(xiàn)肉眼不易發(fā)現(xiàn)的凝集,可表現(xiàn)為血小板降低。在采血時,一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內(nèi)的話比較適宜。血量過多或過少都會對結(jié)果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現(xiàn)凝塊;血量過少, 會導(dǎo)致抗凝劑過濃。筆者分析認(rèn)為,由于血細(xì)胞遇抗凝劑先有一個短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因為鉀離子進(jìn)入血漿以后,改變了滲透壓,導(dǎo)致水從細(xì)胞內(nèi)流出所致。隨后細(xì)胞將鉀離子泵進(jìn)膜內(nèi),細(xì)胞又恢復(fù)原態(tài)。絕大部分患者的標(biāo)本這一時間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min??鼓齽┻^濃會延長這個平衡時間。

3 標(biāo)本放置時間的影響

筆者通過觀察總結(jié),發(fā)現(xiàn)標(biāo)本存放3~ 6 h對多數(shù)血液分析參數(shù)均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結(jié)果。但有部分標(biāo)本在放置的8h內(nèi)大部分參數(shù)沒有顯著改變, 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內(nèi)卻有明顯增高。筆者認(rèn)為,標(biāo)本放置時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞分層, 分層的細(xì)胞會產(chǎn)生不同的代謝物,形成微環(huán)境,此時, 細(xì)胞的體積與其周圍的微環(huán)境相適應(yīng), 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達(dá)到平衡約需30min。這一現(xiàn)象對血脂較高的標(biāo)本影響更為顯著。

測定時間對血小板的影響更為顯著,在一定的時間段內(nèi), 隨著時間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數(shù)值逐步升高。實際操作中, 由于急需報告結(jié)果(尤其是急診標(biāo)本) 而使待測時間縮短, 往往導(dǎo)致血小板計數(shù)結(jié)果偏低。

4 生理和病理因素的干擾

在臨床實踐中,筆者有時會發(fā)現(xiàn)應(yīng)用血細(xì)胞儀對新生兒血液進(jìn)行分析時,使用正常量溶血劑計數(shù)白細(xì)胞, 各項結(jié)果與實際有差異。筆者認(rèn)為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態(tài),其紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規(guī)溶血劑用量不能將紅細(xì)胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細(xì)胞正確分類, 計數(shù)準(zhǔn)確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結(jié)果的關(guān)鍵。

病理因素也可影響血液分析的結(jié)果, 在某些疾病的影響下,當(dāng)平均紅細(xì)胞體積小于70fL時,血小板計數(shù)假性升高, 這時需用顯微鏡人工計數(shù)才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

5 采血因素的影響

第6篇:血細(xì)胞分析范文

【關(guān)鍵詞】 白細(xì)胞;細(xì)胞儀分類;手工分類

Reliability analysis of the credibility of WBC by BC-5500 hematology analyzer

XU Jin-hua,HUANG Yu-hui,HUANG Ri-jiao,et al.

Department of Clinical Laboratory,The Fifth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,ZhuhaiGuangdong519000,China

【Abstract】 Objective To analyse the BC-5500 hematology analyzer of the white blood cells to the credibility of the five categories. Methods The classification of the equipment within and between-batch precision measurement,Physical examination were normal people,normal patients and patients with blood diseases diagnosed specimens instruments classified at the same time with the manual classification,and statistical analysis.Results BC-5500 hematology analyzer of the classification of white blood cells good reproducibility and high precision. Conclusion BC-5500 hematology analyzer of the white blood cell classification technology has reached a higher level.

【Key words】 White blood cell; Cytometry classification; Manual classification

作者單位:519000中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院檢驗科

本科于2008年引進(jìn)了兩臺深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的BC-5500血液細(xì)胞分析儀,在使用了一年的時間里,筆者對該儀器的分類計數(shù)與手工分類進(jìn)行了對照,以了解該儀器的白細(xì)胞分類情況。

1 對象和方法

1.1 儀器 中國深圳邁瑞公司的BC-5500; OLYMPUS 3100 顯微鏡;改良Neubauer 計數(shù)盤。

1.2 試劑 BC-5500 配套試劑;瑞氏染色液:按《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版) 》的方法配置[1]。

1.3 標(biāo)本 本院體檢中心體檢者50例,確診的血液病患者50例,其他患者50例。標(biāo)本均為新鮮EDTA -K2抗凝全血。

1.4 方法 采集受檢者空腹靜脈血2 m l,注入由廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司提供的含EDTA -K2 的真空管內(nèi)立即輕輕顛倒混勻(8~10 次),3 h內(nèi)檢測完畢。BC-5500 型分析儀按要求進(jìn)行日常保養(yǎng), 確定儀器處于良好的工作狀態(tài), 每天做室內(nèi)質(zhì)控。

1.4.1 準(zhǔn)確度測定 分別采集體檢中心體檢者50例,住院部確診的血液病患者50例,其他住院患者50例,先用BC-5500計數(shù)三次白細(xì)胞的分類百分比,再由2名檢驗技師嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版)》用顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行分類計數(shù),每人每份標(biāo)本分別計數(shù)三次,并對兩種方法的百分比結(jié)果進(jìn)行分析。

1.4.2 精密度測定

1.4.2.1 批內(nèi)精密度 取高、中、低三種標(biāo)本分別連續(xù)測定 11 次,2~11 次求出白細(xì)胞分類各項 CV(%)。

1.4.2.2 批間精密度 用深圳邁瑞公司提供的質(zhì)控物連續(xù)測定 20 d,求出白細(xì)胞分類各項 CV(%)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 11. 0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,比較采用t檢驗,P

2 結(jié)果

2.1 精密度

2.1.1 批內(nèi)精密度,結(jié)果見表1。

表1

高、中、低 3 種標(biāo)本檢測結(jié)果的 CV(%)

項目 高值中值低值

中性粒細(xì)胞4.355.105.67

淋巴細(xì)胞 5.015.986.23

嗜酸性粒細(xì)胞 4.865.235.87

嗜堿性粒細(xì)胞3.564.034.99

單核細(xì)胞 5.235.516.01

2.1.2 批間精密度 中性粒細(xì)胞:4.42,淋巴細(xì)胞:4.05,嗜酸性粒細(xì)胞:5.20,嗜堿性粒細(xì)胞:5.23,單核細(xì)胞:5.71;均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi)。

2.2 準(zhǔn)確度 BC5500 型分析儀分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較,結(jié)果見表2。

表2

BC5500 型分析儀對白細(xì)胞的分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較

組別細(xì)胞分類 例數(shù)儀器分類(%)手工分類(%)

體檢中心體檢者中性粒細(xì)胞50 55.9±9.00* 54.3±8.60

淋巴細(xì)胞34.7±9.75* 32.6±9.21

嗜酸性粒細(xì)胞 3.20±2.10* 2.96±2.96

嗜堿性粒細(xì)胞0.40±0.40# 0.21±0.20

單核細(xì)胞5.85±1.75# 3.55±2.20

確診的血液病患者1中性粒細(xì)胞46 49.1±36.5* 50.1±34.6

淋巴細(xì)胞47.5±37.7* 42.1±39.5

嗜酸性粒細(xì)胞 5.80±5.10* 5.30±4.98

嗜堿性粒細(xì)胞 0.25±0.25# 0.12±0.10

單核細(xì)胞17.1±16.4# 13.6±13.2

確診的血液病患者2中性粒細(xì)胞4 51.6±33.5

淋巴細(xì)胞43.2±36.1

嗜酸性粒細(xì)胞2.01±2.68

嗜堿性粒細(xì)胞0.41±0.16

幼稚細(xì)胞23.1±10.7

單核細(xì)胞3.61±2.08

其他患者中性粒細(xì)胞5049.5±33.7*47.9±34.8

淋巴細(xì)胞41.6±33.0*39.7±35.1

嗜酸性粒細(xì)胞8.00±7.90*7.56±8.20

嗜堿性粒細(xì)胞0.40±0.30#0.11±0.15

單核細(xì)胞 9.95±5.15#6.53±5.30

注:兩種方法比較,* P>0.05,#P

3 討論

邁瑞公司生產(chǎn)的BC 5500 型分析儀運(yùn)用激光, 流式細(xì)胞術(shù), 細(xì)胞化學(xué)染色等多項技術(shù), 利用細(xì)胞內(nèi)顆粒的密度,核分葉對激光的折射等先進(jìn)手段, 通過1°~ 5°的低角度和8°~20°高角度激光散射對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和分類。因此BC 5500型分析儀用于非血液患者的細(xì)胞計數(shù)是可行的。通過批內(nèi)和批間精密度結(jié)果分析,BC-5500血細(xì)胞分析儀分類計數(shù)的CV值均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi),精密度較高,重復(fù)性好。對非特殊性的標(biāo)本,該儀器能夠準(zhǔn)確的作出分類。

由表2 可知:無論普通體檢組還是患者組, 中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞, 儀器分析與手工鏡檢結(jié)果比較差異無顯著性 (P>0.05)且相關(guān)性非常顯著(r= 0.916)。患者組儀器法伴有不同提示的, 鏡檢分類均有不同程度的變化。體檢組和普通患者組單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞, 儀器分類與鏡檢結(jié)果差異有顯著性(P

綜上所述,BC-5500血細(xì)胞分析儀對白細(xì)胞的分類情況已經(jīng)達(dá)到了較高的水平,足以滿足臨床的基本需要。當(dāng)然,作為一種全血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類方法只能作為一種過篩手段進(jìn)行初檢[3], 對于血液中各種細(xì)胞的多形態(tài), 多變化的特點, 儀器的識別能力不如人工顯微鏡檢查準(zhǔn)確。在使用全自動分析儀時一定要注意, 先進(jìn)的儀器不能完全替代顯微鏡分類, 當(dāng)血細(xì)胞數(shù)量、比例、分布圖、散點圖有異常時[4], 應(yīng)該做血涂片人工鏡檢, 以免漏診異常形態(tài)細(xì)胞和血液系統(tǒng)疾病。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:136.

[2] 唐滬強(qiáng), 許凱聲, 揚(yáng)律.STKS 血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類結(jié)果評價.上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 1999, 14(2):82.

第7篇:血細(xì)胞分析范文

【關(guān)鍵詞】 血細(xì)胞計數(shù);自動分析;偏差;對比研究

本所檢驗科于2007年1月購入1臺XS21000i血細(xì)胞分析儀,與原有的邁瑞B(yǎng)C3000和貝克曼COULT同時使用,為了保證3種儀器測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性,本文參照斯德哥爾摩協(xié)議的EP29A文件]要求,以參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評成績合格的貝克曼COULT血細(xì)胞分析儀為實現(xiàn)準(zhǔn)確度溯源和可比性的目標(biāo),即參比儀器,以BC23000和XS21000i為比較檢測儀器,即測定儀器,在3種儀器上同時檢測患者新鮮標(biāo)本。通過F檢驗和線性回歸分析,計算參比儀器和測定儀器之間的偏差來判斷結(jié)果是否準(zhǔn)確,報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 取健康檢查者乙二胺四乙酸二鉀抗凝全血,白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)4個項目分別為高、中、低值標(biāo)本40份,每天選取8份。

1.2 儀器與試劑 貝克曼COULT血細(xì)胞分析儀、希森美康XS21000i血細(xì)胞分析儀、邁瑞B(yǎng)C3000血細(xì)胞分析儀,3種儀器所用試劑均為各公司原裝配套試劑。

1.3 實驗條件 各儀器均按使用說明定期維護(hù)、保養(yǎng),每天開機(jī)后進(jìn)行空白允許值及各自質(zhì)控檢測,保證3種儀器均在控。

1.4 實驗方法 由技術(shù)熟練者分5 d,每天8份標(biāo)本,每份標(biāo)本在每臺儀器上檢測2次,取值為測定結(jié)果。2種儀器的檢測模式均為全血模式。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用F檢驗,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,直線回歸分析,統(tǒng)計軟件用SPSS13.0和Excel。

2 結(jié)果

3種儀器4項血細(xì)胞檢測結(jié)果及不同儀器間檢測結(jié)果的相關(guān)分析及偏差評估如下。

2.1 4 個項目3 種儀器測定結(jié)果比較

2.2 COUL T 和BC3000 的相關(guān)關(guān)系(r 表示相關(guān)系數(shù))

3 討論

醫(yī)院檢驗科一般都同時使用多臺不同型號的血細(xì)胞分析儀進(jìn)行標(biāo)本檢測分析,各儀器都有各自獨立的試劑系統(tǒng)和質(zhì)控系統(tǒng),以質(zhì)控物對血細(xì)胞分析儀進(jìn)行測定只是了解單臺儀器,測定結(jié)果,而各自專用的全血定值質(zhì)控物不能相互使用,無法反映各儀器檢測結(jié)果的一致性。本文參照NCCLS2EP9A方案,以參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評成績合格的COULT為參比儀器,以BC23000和XS21000i為測定儀器進(jìn)行比對測試。

根據(jù)測試結(jié)果,以COULT的結(jié)果為自變量X,分別以BC23000和XS21000i的結(jié)果為因變量Y,計算每臺儀器4個項目的相關(guān)系數(shù)(r)和回歸方程,以r2>0.95為相關(guān)性良好。本實驗數(shù)據(jù)的可接受性判斷可通過r或r2作粗略估計,如r和r2均>0.95,說明實驗數(shù)據(jù)分布范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠,實驗方法精密度較好。本實驗3種儀器

作者單位:721000西安鐵路疾病預(yù)防控制所寶雞分所

檢測的40份標(biāo)本W(wǎng)BC、RBC、Hb3個項目結(jié)果相關(guān)性密切(r>0.976),PLT欠佳,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,可同時或交替使用,與文獻(xiàn)報道相符[1,2]。根據(jù)回歸方程計算各參數(shù)在給定醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的預(yù)期偏差和相對偏差,以不同Xc允許誤差的限值與預(yù)期偏差值判斷各項目的偏差是否可以接受。參照衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦采用的參考方法的允許偏差范圍,WBC、RBC、Hb、PLT分別為靶值±15%、±6%、±7%、±25%[1],表明BC23000和XS21000i4個項目檢測結(jié)果的偏差均在允許范圍,檢測結(jié)果是一致的,具有可比性,完全符合臨床需要。

根據(jù)國際血液標(biāo)準(zhǔn)化委員會文件要求,血細(xì)胞分析儀的檢測結(jié)果必須直接或間接溯源至參考方法[2]才能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和不同實驗室檢測結(jié)果的可比性。本研究用作比對的參比儀器是參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評合格的COULT,由于衛(wèi)生部臨床檢驗中心為國家實驗室認(rèn)可委員會認(rèn)可的校準(zhǔn)實驗室,因此,本文的檢測結(jié)果間接地溯源至參考方法。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 彭黎明,鄧瑞雪.血細(xì)胞自動分析比對的溯源.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(5):475-477.

第8篇:血細(xì)胞分析范文

有了全自動血細(xì)胞分析儀后,不少操作人員認(rèn)為所有質(zhì)量問題均是儀器造成的,與操作人員沒有關(guān)系,但事實上在上級檢驗師審簽報告時發(fā)現(xiàn)許多問題都是由于操作人員的臨床基礎(chǔ)知識薄弱、業(yè)務(wù)素質(zhì)差、缺乏敬業(yè)精神,對出現(xiàn)的人為差錯缺乏洞察力,導(dǎo)致錯誤報告在上級檢驗師審簽報告時才被發(fā)現(xiàn)。

自從我院2004年使用第一臺血細(xì)胞分析儀開始,6年來,在對3萬多張血細(xì)胞分析報告審核簽字過程中發(fā)現(xiàn)大量質(zhì)量問題并不僅僅在于鏡檢,而更多的問題還在于實驗室人員的理論水平、業(yè)務(wù)素質(zhì)和敬業(yè)精神。在血細(xì)胞分析儀普及的今天,儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)已由專人負(fù)責(zé),儀器的校準(zhǔn)、室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評都非常滿足的前提下,經(jīng)過長達(dá)6年來對審簽血細(xì)胞分析報告中發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行歸納總結(jié)后得知,真正影響我院血細(xì)胞分析檢驗質(zhì)量的因素全在于人,現(xiàn)以日本西森美康的KX-21N三分群血細(xì)胞分析儀為例,將一些在審簽報告中發(fā)現(xiàn)的引起質(zhì)量問題的因素逐一分析如下:

KX-21N檢測紅細(xì)胞是利用庫爾特原理,根據(jù)血細(xì)胞是不良導(dǎo)體的特性,在電解質(zhì)溶液中懸浮細(xì)胞顆粒在通過計數(shù)小孔時引起電阻變化來進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù),同時根據(jù)脈沖高低測定每個細(xì)胞體積[1]。血紅蛋白是利用光電比色原理來測定的,HCT、MCH、MCHC、RDWSD、RDWCV是用RBC、Hb、MCV計算出來的。

1RBC、Hb、HCT、WBC、PLT全部增高

因WBC和PLT個體差異太大,往往不易發(fā)現(xiàn)有人為差錯,對單個RBC升高的報告也不易發(fā)現(xiàn)人為差錯,但在審簽連續(xù)3張以上RBC升高的報告時,我們應(yīng)仔細(xì)檢查一下,凡是科內(nèi)有技術(shù)不熟練的進(jìn)修生和實習(xí)生參與操作時更應(yīng)高度重視。我院血細(xì)胞分析常采用預(yù)稀釋模式,當(dāng)上臨床病房采集多個標(biāo)本后回到檢驗科檢測時,由于細(xì)胞沉降至離心管管底,假如檢測前未充分混勻,測定結(jié)果將導(dǎo)致RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標(biāo)顯著升高。假如在臨床提供的靜脈血中取樣進(jìn)行預(yù)稀釋模式檢測或直接行全血模式檢測,取樣前混勻不徹底也常引起RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標(biāo)顯著升高。怎樣才能徹底混勻,檢驗科部分工作人員各行其事,全憑自己想象,根本不去實踐或不接受曾經(jīng)通過實踐得出的經(jīng)驗指導(dǎo),實踐證實將采血管中的標(biāo)本顛倒混勻5次以上才能達(dá)到徹底混勻。預(yù)稀釋模式檢測時,稀釋液加量不足導(dǎo)致RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標(biāo)顯著升高也曾多次發(fā)生。一是用移液器代替刻度吸管,因移液器活塞漏氣,使所加稀釋液的量偏少;另有人將500μ加成400μl,經(jīng)驗豐富者發(fā)現(xiàn)這些差錯并不難,一是上述檢測項目全部升高,二是檢測一次后剩余量較少或一份標(biāo)本不夠2次檢測。

第9篇:血細(xì)胞分析范文

關(guān)鍵詞:網(wǎng)織紅細(xì)胞;全自動血細(xì)胞分析儀;瘧原蟲

Evaluation of performance of ADVIA2120blood-counter system for detection of reticulocytes.

Abstract:Objective To evaluate the performance of ADVIA2120for the test of reticulocytes. Methods ADVIA2120was used for detection of high/normal/low reticulocyte samples and the reproducibility,the rate of carrying contamination and stability were observed.The results were compared with manual method. Results Reproducibility:except that the CV of high nucleic acid was13.82%~17.4%,the CV of the other indexes was less than8.19%;linearty:r=0.9979;stability:percentage CV of Ret at4℃in24hwas3.8%;the rate of carrying contamination was0.22%;compared with the manual methods:r=0.9962,P>0.05. Conclusion The srate of carrying contamination by using ADVIA2120blood-counter system in test of reticulocytes is low,stable and showing a nice linear correlation suitable for clinical use.

Key words:Reticulocytes;Automatic blood-counter system;Plasmodium

網(wǎng)織紅細(xì)胞(Reticulocytes,Ret)傳統(tǒng)的人工測定煩瑣而費(fèi)時,準(zhǔn)確性受操作人員的經(jīng)驗、水平、細(xì)胞計數(shù)量、染色效果及涂片質(zhì)量等因素影響大,重復(fù)性也差。全自動血細(xì)胞分析儀測定網(wǎng)織紅細(xì)胞應(yīng)用逐漸增多,因臨床應(yīng)用時間不長,其性能尚有待觀察。ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀是拜耳公司新推出的五分類機(jī)型,配備全自動網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能,可提供14項相關(guān)參數(shù),因部份指標(biāo)臨床意義尚無確論,故本文僅選擇6項與細(xì)胞數(shù)量相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行評價。現(xiàn)進(jìn)行重復(fù)性、線性、攜帶污染率、穩(wěn)定性測試,并與手工百分率分類結(jié)果進(jìn)行比較,報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 標(biāo)本來源 住院患者,網(wǎng)織紅細(xì)胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類。

1.1.2 設(shè)備 美國ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀、日本OLYMPUSBX-60多功能光學(xué)顯微鏡、上海醫(yī)療設(shè)備廠HH-W21-600電熱恒溫水育箱、姜堰康健醫(yī)療器具有限公司KJRM-1搖勻器。

1.1.3 ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀原裝配套試劑及全血質(zhì)控品(批號0605204);珠海貝索公司網(wǎng)織紅細(xì)胞染液和瑞氏染液,按試劑使用說明操作。廣州陽普公司EDTA-K2血常規(guī)抗凝管(批號0602012)。

1.2 方法 按相關(guān)評價原則,ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀重復(fù)測定樣本,評價儀器日內(nèi)精密度、日間精密度、線性、攜帶污染率和穩(wěn)定性,測定前搖勻器正、反向搖動3min。

1.2.1 日內(nèi)精密度 按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NC-CLS)制定的方案 [1] ,選擇本院住院患者血樣,網(wǎng)織紅細(xì)胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類,各1份,每份重復(fù)測定10次,并計算平均值(x)和變異系數(shù)(CV)。

1.2.2 日間精密度 因臨床血標(biāo)本穩(wěn)定性差,故以原廠全血質(zhì)控品每日9:00、12:00、16:30測定三次,取均值,連續(xù)測定10d,并計算平均值(x)和變異系數(shù)(CV)。

1.2.3 線性評價 按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)制定的線性驗證方案EP6-A [2] ,選擇一份網(wǎng)織紅細(xì)胞細(xì)胞高值樣本,在技術(shù)指標(biāo)范圍內(nèi)做比例稀釋,儀器測定各濃度2次,取均值,所得數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析。

1.2.4 攜帶污染率 按國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會制定的程序 [3] ,將高值樣本連續(xù)測定3次(H 1 、H 2 、H 3 ),緊接著連續(xù)測定低值樣本3次(L 1 、L 2 、L 3 ),攜帶污染率結(jié)果為[(L 1 ~L 3 )/(H 3 -L 1 )]×100%。

1.2.5 穩(wěn)定性試驗 因血樣皆為低溫保存,考慮溫度為主要影響因素。取一份血樣分為3管,放置于4℃冰箱。分別于0min、15min、30min、45min、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、24h、48h、72h每個時間點測定3次,取均值。

1.2.6 相關(guān)性評價 按NCCLS H20-A1 [4] 文件,將30份標(biāo)本制作3張血片,2名有經(jīng)驗的主管技師隨機(jī)各選一張,雙盲法計數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率 [5] ,取均值后與儀器測定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比較。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行配對t檢驗和回歸分析。

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2 結(jié)果

2.1 日內(nèi)精密度測試 高值項目日內(nèi)精密度較好,低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(%)日內(nèi)精密度偏大。見表1。

表1 ADVIA2120網(wǎng)織紅細(xì)胞測定日內(nèi)精密度(略)

2.2 日間精密度測試 高值項目日間精密度較好,低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(%)日精密度偏大。見表2。

表2 ADVIA2120網(wǎng)織紅細(xì)胞測定日間精密度(略)

2.3 線性評價 初始計數(shù)為0.38×10 12 /L的樣本按比例稀釋后理論結(jié)果為(0.304、0.228、0.152、0.076、0.038)×10 12 /L,實際測定結(jié)果為(0.298、0.231、0.148、0.063、0.033)×10 12 /L,得回歸曲線y=1.0225x-0.0086,相關(guān)系數(shù)r為0.9989,P>0.05。(見圖1)

2.4 攜帶污染率 高值樣本3次測定結(jié)果分別為H 1 =0.64×10 12 /L、H 2 =0.67×10 12 /L、H 3 =0.65×10 12 /L,低值樣本3次測定結(jié)果分別為L 1 =0.03×10 12 /L、L 2 =0.03×10 12 /L、L 3 =0.02×10 12 /L,攜帶污染率0.22%。穩(wěn)定性試驗:4℃冷藏后測定,百分率結(jié)果均值分別為6.42%(0min)、6.18%(15min)、6.27%(30min)、6.19%(45min)、6.33%(1h)、6.22%(2h)、6.34%(3h)、6.28%(4h)、6.21%(5h)、6.35%(6h)、6.37%(7h)、6.25%(24h)、5.68%(48h)、5.21%(72h),結(jié)果顯示24h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),48h后網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率降 低,變化有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。

圖1 ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞線性評估(略)

圖2 網(wǎng)織紅細(xì)胞ADVIA2120測定與手工法測定相關(guān)性(略)

3 討論

網(wǎng)織紅細(xì)胞測定在各種貧血的鑒別診斷、療效觀察、腫瘤患者放、化療后骨髓造血功能評估等有著重要的臨床意義,及時、準(zhǔn)確的網(wǎng)織紅細(xì)胞測定有利于動態(tài)了解骨髓紅系增生情況。ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定原理是先用戊二醛和十二烷基硫酸鈉將紅細(xì)胞球形化并固定,氧氮雜芑750使RNA染藍(lán)色,著色程度與RNA含量成正比,細(xì)胞通過FLOWCELL在激光照射下產(chǎn)生散射,應(yīng)用MIE原理,得到網(wǎng)織紅細(xì)胞的14項測量參數(shù)和計算參數(shù),因?qū)W(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度分布寬度、血紅蛋白含量分布寬度等指標(biāo)臨床意義尚無確論,故僅選擇6項與細(xì)胞數(shù)量相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行評價。

從結(jié)果看,ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定具有良好的精密度,除高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率因計數(shù)值較低,故cv值在日內(nèi)和日間偏大外(13.82%~17.4%),其它項目cv值在1.18%~8.19%之間,處于理想范圍之內(nèi)。穩(wěn)定性測試表明4℃24h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率結(jié)果穩(wěn)定,結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05,CV3.8%),48h后網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率降低。低溫雖能減緩紅細(xì)胞新陳代謝,但網(wǎng)織紅細(xì)胞向成熟紅細(xì)胞的轉(zhuǎn)化未完全停止,時間過長導(dǎo)致RNA降低的比率增高并出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05,圖1),攜帶污染率低(0.22%),達(dá)到臨床應(yīng)用要求。與手工法的百分率結(jié)果比較相關(guān)性佳(r=0.9962,P>0.05,圖2),考慮到儀器法檢測細(xì)胞數(shù)量大,可有效避免細(xì)胞在血片分布上的統(tǒng)計學(xué)誤差,特別是低值測量結(jié)果,因此儀器法應(yīng)更為理想。臨床應(yīng)用中遇1例瘧疾患者樣本,入院儀器查血色素68g/L,RBC2.23×10 12 /L,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)0.32×10 12 /L,網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率14.35%,經(jīng)外周血片瑞氏染色,感染蟲體之RBC為10.3%(計數(shù)1000個RBC),抗瘧治療3周后查血色素85g/L,RBC3.03×10 12 /L,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)0.08×10 12 /L,網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率2.64%,外周血片瑞氏染色未查見蟲體和受染RBC。文獻(xiàn)報道受瘧原蟲感染的RBC中RNA含量是增加的 [6] ,那受染RBC在RNA增高時是否歸為網(wǎng)織紅及RNA不高時如何區(qū)分則缺乏妥善的處理辦法。在手工煌焦油藍(lán)活體染色、ADVIA2120的氧氮雜芑750染色及sysmex2100的熒光染色不能分辨的情況下,對瘧疾血樣做外周血片瑞氏染色,計數(shù)受染細(xì)胞比例,可大致判定干擾程度。

總體而言,ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定避免了傳統(tǒng)手工法的諸多缺點,如肉眼判讀的主觀性、細(xì)胞的分布誤差、檢測的低效率等問題,在全血分析時可根據(jù)情況隨時選擇加做網(wǎng)織紅分析,無需再取血樣,其便利性和高效性是手工法無可比擬的,加之重復(fù)性、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性及攜帶污染率各指標(biāo)均符合臨床應(yīng)用要求,在有條件的醫(yī)院全自動儀器法測定網(wǎng)織紅細(xì)胞是很好的選擇。

參考文獻(xiàn)

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