談醫(yī)學期刊病理圖片編輯加工方法

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摘要：醫(yī)學論文中病理圖片的諸要素，包括標注放大倍數(shù)或添加標尺，以反映標本的放大倍數(shù)，幫助讀者了解標本的實際大小。筆者就病理圖片是否需要標注放大倍數(shù)，如何正確標注放大倍數(shù)及添加標尺，進行具體講解，旨在幫助作者和期刊編輯了解病理圖片放大倍數(shù)的計算方法，并且應(yīng)最終轉(zhuǎn)換成標尺為宜。

關(guān)鍵詞：病理圖片；顯微照片圖；醫(yī)學期刊；放大倍數(shù)；標尺

一、引言

病理圖片是醫(yī)學論文的重要組成部分之一，具有直觀性、增強表達力的特點，使文章內(nèi)容便于閱讀及理解。病理圖片的形式主要包括大體標本病理圖片、光鏡下組織病理圖片及電鏡下超微病理圖片[1]。內(nèi)容正確、質(zhì)量高，并且符合規(guī)范、涵蓋圖片各要素的病理圖片，可以提升論文的質(zhì)量和說服力。病理圖片各要素除了最重要的圖片內(nèi)容外，還包括圖片清晰度、圖序、圖題、圖注、圖例、放大倍數(shù)、染色方法，以及格式、排版等。部分期刊編輯部對病理圖片的編輯，雖然一直兼顧前述各要素的加工、處理，但對于圖片放大倍數(shù)的標注，則未進行強制性要求；而對于病理圖片添加標尺（scale-bar），則未予關(guān)注。近年來，中華醫(yī)學會系列雜志的審讀及編輯業(yè)務(wù)培訓內(nèi)容，反復強調(diào)病理圖片需要標注放大倍數(shù)或添加標尺?，F(xiàn)就病理圖片標注放大倍數(shù)存在的爭議，以及如何正確標注放大倍數(shù)及添加標尺等，進行全面、細致闡述。

二、病理圖片標注放大倍數(shù)的爭議

按照科技期刊編排相關(guān)國家標準，照片圖上應(yīng)該標明表示目的物的標尺或放大倍數(shù)[2]。林清華等[3]認為，標尺作為照片圖的細節(jié)部分，應(yīng)被重視。姚雪等[4]認為，明確顯微照片圖的放大倍數(shù)很重要，若無放大倍數(shù)的說明，讀者很難將圖片與實際物體的大小相聯(lián)系。王小仲與張乃光[5]認為，科研論文中的顯微照片一般應(yīng)標明放大倍數(shù)。宋來鳳[6]認為，全面認識一病理形態(tài)事件，除了知道它的幾何形狀，尤其對肉眼看不到的實物，在看到它的影像照片時，還要知道它的實際大小，這需要通過其放大倍數(shù)來進行推斷。但是，2002年，吳波與周曉軍[7]對國外23種病理學及醫(yī)學雜志，以及數(shù)十種具有權(quán)威性的病理學參考書，同時還包括一些國內(nèi)雜志的調(diào)查結(jié)果顯示，1994年前絕大多數(shù)雜志的顯微鏡及電鏡照片標注了放大倍數(shù)；而1994年以后，大部分雜志開始減少，甚至取消照片放大倍數(shù)的標注。該文作者認為，對顯微照片放大倍數(shù)標注的實際意義不大，其原因為觀察顯微鏡組織病理照片時，重點在于觀察組織結(jié)構(gòu)、細胞形態(tài)、組織化學或免疫組織化學染色是否陽性；或者這類照片存在自身參照物，如紅細胞、淋巴細胞、正常的組織結(jié)構(gòu)等。人民衛(wèi)生出版社出版的《病理學》（9版）中的顯微鏡病理圖片部分未標注放大倍數(shù)，或無標尺；部分大體標本無隨照片同時拍攝的刻度尺[8]。由此可見，對于病理圖片是否標注放大倍數(shù)，尚存在爭議。

三、正確標注病理圖片的放大倍數(shù)

（一）光鏡下組織病理圖片放大倍數(shù)標注作者投稿時最常采用的方式，亦是編輯既往認可的方式，即采用顯微鏡的目鏡和物鏡放大倍數(shù)的乘積，表示光鏡下病理圖片放大倍數(shù)，若采用目鏡10×和物鏡40×觀察標本，則作者及期刊編輯標注該圖片的放大倍數(shù)為400×（或400倍）。需注意的是，“×400”不是400倍的正確表達方式，此時的“×”代表乘積；顯微鏡目鏡或物鏡的外殼處，均以10×、40×表示其放大10倍、40倍。目前，非常明確的是，既往以目鏡和物鏡放大倍數(shù)的乘積表示光鏡下病理圖片放大倍數(shù)的標注方式是錯誤的，應(yīng)該摒棄。其原因在于，這種標注方式采用的目鏡，是觀察標本時的觀察目鏡，得到的放大倍數(shù)，是肉眼觀察到的、大腦視覺成像的放大倍數(shù)，是標本的觀察放大倍數(shù)，并不是顯微鏡拍攝的底片上圖像的放大倍數(shù)。醫(yī)學期刊論文中光鏡下組織病理圖片的總放大倍數(shù)，與顯微鏡底片上的圖像放大倍數(shù)、放大（或擴?。┱掌姆糯蟊稊?shù)、期刊縮放制版的放大倍數(shù)有關(guān)[9]。首先，顯微鏡底片上的圖像放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×攝影目鏡放大倍數(shù)×攝影裝置放大系數(shù)[9]。其中，攝影目鏡區(qū)別于觀察目鏡，是裝于照相機下面的光柱內(nèi)，在外面觀察不到，在使用攝影設(shè)備時，需確定設(shè)備內(nèi)攝影目鏡的倍數(shù)，以便后期計算放大倍數(shù)[10]；攝影裝置放大系數(shù)，根據(jù)不同型號攝影裝置及不同類型攝影目鏡而不同，可以查詢攝影裝置的說明書得到該系數(shù)，例如，使用日本產(chǎn)OlympusPM-10AD型攝影裝置及NFK型攝影目鏡的放大系數(shù)為1，若物鏡為10×，攝影目鏡為3.3×，則底片上圖像放大倍數(shù)為10×3.3×1=33倍。其次，若用顯微攝影拍攝的底片，放大（或擴?。┏烧掌M行制版，則放大（或擴?。┱掌姆糯蟊稊?shù)=放大后照片的長邊（mm）/底片長邊（mm）[9]。其中，若放大成5寸照片，其長邊約為127mm，顯微攝影通常采用135底片，其大小為36mm×24mm，因此135底片長邊為36mm，故將135底片上圖像擴印成5寸照片，其放大倍數(shù)為127mm/36mm≈3.53倍。此處需要注意的是，雖然135底片長邊是36mm，擴印時底片四周被底片框壓邊，投射到照片上的圖像實際長邊＜34mm[10]。對此，可在放大（或擴印）后的照片上，選擇任一邊界清晰的結(jié)構(gòu)，測量2點間直線距離，再于底片上測量相應(yīng)2點間直線距離，這2個直線距離的比值（前者與后者的比值），即為放大（或擴?。┱掌姆糯蟊稊?shù)[6]。最后，采用原始底片，或者放大（或擴?。┱掌M行制版時，根據(jù)版面美觀、版面大小以及期刊體例一致等要求，會對底片或者放大（或擴?。┱掌M行縮放，病理圖片的放大倍數(shù)隨之改變，編輯應(yīng)根據(jù)縮放比例進行校正，計算出正確的總放大倍數(shù)予以最終標注。同時，在縮放圖片時，應(yīng)注意按照原圖片的長寬比進行等比例縮放，才能不改變圖片形狀，獲得正確的放大倍數(shù)。期刊縮放制版的放大倍數(shù)=制版后照片的長邊（mm）/用于制版的照片（或底片）長邊（mm）。綜上所述，光鏡下組織病理圖片的總放大倍數(shù)=顯微鏡底片上的圖像放大倍數(shù)×放大（或擴?。┱掌姆糯蟊稊?shù)×期刊縮放制版的放大倍數(shù)[9]。筆者對此進行簡化，即明確顯微鏡底片上的圖像放大倍數(shù)、采用的底片（如135底片）、用于制版的圖片后，則制版后圖片最終放大倍數(shù)=顯微鏡底片上的圖像放大倍數(shù)×（用于制版的照片長邊/底片長邊）。

（二）大體標本病理圖片及電鏡下超微病理圖片放大倍數(shù)標注對于大體標本的放大倍數(shù)標注，最佳方法是在大體標本下方或重要結(jié)構(gòu)旁邊放置標尺（米尺或?qū)Ｓ每潭瘸撸瑢⒋篌w標本連同標尺一起拍攝；目前的電鏡，一般都可在拍攝時自動添加標尺[7]。這2種情況，由于標尺已整合在圖片中，可隨圖片的縮放等比例縮放，故一般不采用放大倍數(shù)進行標注。

四、病理圖片添加標尺的方法

對于病理圖片添加標尺，目前期刊界已達成共識。由于標尺可以隨圖片等比例縮放；而且，與標注放大倍數(shù)相比，為圖片添加標尺省去復雜的計算，還能得到真實的放大倍數(shù)[4]。因此，原始數(shù)碼照片圖中本身帶有標尺，或者后期為照片圖制作標尺，是反映標本大小的最精確方法。原始數(shù)碼照片圖中本身帶有標尺，可見于如下情況：和標尺一起拍攝的大體標本照片；拍攝時自動添加標尺的電鏡照片；目前一些較高檔顯微鏡，其照相設(shè)備上已設(shè)置可添加標尺的功能，使用者可以選擇在拍攝時添加標尺。但是，目前仍有很多顯微鏡設(shè)備無添加標尺的功能，或者添加標尺的選項并不符合使用者的要求。王羿婷等［11］拍攝完一張病理圖片后，不調(diào)整顯微鏡各項參數(shù)，立即采用帶有微距刻度尺的載玻片再拍攝一張照片，照片內(nèi)容僅為該微距刻度尺。這兩張照片拍攝條件基本一致，因此照片內(nèi)的微距刻度尺可作為該病理圖片的基礎(chǔ)刻度尺；然后，作者采用Photoshop軟件，添加所需長度的標尺，其標尺具體制作步驟見參考文獻[11]。筆者認為，該方法的原理正確，簡單、可行，非常值得其他作者借鑒。另外，期刊編輯為病理圖片制作標尺的前提是，需要作者提供顯微鏡底片上圖像的正確放大倍數(shù)。若作者提供的圖片放大倍數(shù)是100×、200×、400×，很大可能不正確，因為攝影目鏡通常為2.5×、3.3×、5.0×、6.7×，故不易得出上述放大倍數(shù)[9]。確定用于制版的圖片大小不再改動后，采用前述方法，編輯可計算出制版后病理圖片的最終放大倍數(shù)。根據(jù)此放大倍數(shù)（若設(shè)為A，通常修約成整數(shù)），若要制作1個B長度的標尺，則用于制版的病理圖片中標尺長度（mm）=A×B(μm)/1000。例如，制版圖片中，標本的最終放大倍數(shù)為100×，若需制作1個底片中代表50μm的標尺，在制版圖片中的標尺長度（mm）=100×50μm/1000=5mm，即編輯使用Photoshop等軟件，制作1條5mm長度的標尺，并對其標注為50μm，置于用于制版的病理圖片右下角（也可為其他合適位置）即可。

五、醫(yī)學期刊編輯對光鏡下病理圖片放大倍數(shù)或標尺的編輯加工

本刊作者投稿的光鏡下病理圖片，部分未標注放大倍數(shù)，較多作者標注為100×、400×，幾乎無作者提供添加標尺的病理圖片。因此，根據(jù)上述標注放大倍數(shù)和添加標尺的方法,醫(yī)學期刊編輯在編輯加工病理圖片時，可以采取如下措施：首先，判斷“100×、400×”極可能是作者對標本的觀察放大倍數(shù)，而不是顯微攝影底片上圖像的放大倍數(shù)，故不應(yīng)采納。其次，可與作者溝通，詢問作者拍攝病理圖片時的攝影裝置型號、攝影目鏡型號及倍數(shù)，閱讀該裝置的說明書，查詢放大系數(shù)，采用的底片是否為135底片或測量所采用底片的長邊，這樣編輯可以幫助作者計算出底片上圖像的放大倍數(shù)；也可在投稿的圖片上找到清晰的2點，請作者在底片上測量相應(yīng)2點間直線長度，編輯即可計算出作者投稿圖片的放大倍數(shù)，并在后期制作時盡量采取對病理圖片添加標尺的方法。最后，若作者不能提供前述顯微鏡攝影信息，則標注低倍、中倍、高倍放大，分別相當于作者觀察放大倍數(shù)的40×、100×或200×、400×[12]。

六、規(guī)范化標注病理圖片放大倍數(shù)及添加標尺

吳波和周曉軍[7]分析了不用標注放大倍數(shù)的原因，建議針對描述形態(tài)學變化的顯微照片,尤其是免疫組織化學染色、組織細胞化學染色等特殊染色的照片，取消其放大倍數(shù)的標注。一些醫(yī)學期刊及《病理學》教材對光鏡下病理圖片采用標注低倍、中倍、高倍放大的方式[12-13]。筆者認為，在作者不能提供圖片的正確放大倍數(shù)及隨圖添加標尺的情況下，這些方法可能為一種權(quán)宜之策。由于病理圖片添加標尺可以準確反映標本的放大倍數(shù)，并且國外期刊對顯微照片圖添加標尺亦有相關(guān)要求，甚至包括標尺線的寬度[4,14]。因此，在掌握前述方法后，期刊編輯應(yīng)盡量將病理圖片的放大倍數(shù)，轉(zhuǎn)換成標尺，置于圖片中，以達到病理圖片統(tǒng)一化、規(guī)范化、國際化的目的。導致作者不能提供病理圖片的正確放大倍數(shù)或隨圖添加標尺的原因，一是作者不知道標注放大倍數(shù)或添加標尺，是病理圖片應(yīng)該具備的要素；二是錯誤地將標本的觀察放大倍數(shù)當成底片上圖像的放大倍數(shù)；三是不知如何正確標注放大倍數(shù)或添加標尺。由于一些《病理學》教材對其中病理圖片的放大倍數(shù)標注多不完整，很少或不添加標尺，醫(yī)學生不能從最初的學習中，認識到病理圖片應(yīng)該標注放大倍數(shù)或者添加標尺，并且形成習慣，但他們卻能自然想到一些血清指標檢測結(jié)果，必須有單位。因此，老師對醫(yī)學生授課時，臨床科研工作者探討論文寫作時，期刊編輯與作者溝通時，均應(yīng)強調(diào)病理圖片需要標注放大倍數(shù)或添加標尺，而且以添加標尺為宜。臨床科研工作者在拍攝病理圖片之初，就應(yīng)當采取措施添加標尺，或者記錄顯微攝影裝置的相關(guān)參數(shù)以備后期計算放大倍數(shù)，否則拍攝完成后很難彌補。

七、結(jié)語

臨床科研工作者、論文作者及醫(yī)學期刊編輯均可參考前述方法，掌握正確標注病理圖片放大倍數(shù)及添加標尺的方法。只有作者投稿時提供的圖片放大倍數(shù)是正確的，編輯才能最終規(guī)范化制作成標尺。而且，期刊編輯學習和熟練掌握這些方法，才能幫助作者糾正錯誤表示方法，并且通過詢問作者的添加步驟，辨別作者補充的放大倍數(shù)或標尺是否正確。如果作者提供的信息不完善、不正確，則應(yīng)實事求是放棄標注，不應(yīng)為了病理圖片要素的完整性而標注錯誤信息。

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作者：程開健 江雨蓮 徐偉娟 單位：四川大學華西第二醫(yī)院