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【關(guān)鍵詞】 砷中毒
地方性砷中毒是嚴(yán)重危害人類身體健康的一種疾病。貴州省是我國地方性砷中毒重病區(qū)之一,目前仍然存在眾多的砷中毒病區(qū)和砷中毒病患者。迄今為止,砷毒性作用的機(jī)制尚未完全闡明。在有關(guān)砷中毒的酶學(xué)研究中發(fā)現(xiàn),砷中毒時并不是體內(nèi)所有酶的活性都受到抑制,有些酶的活性反而升高,相關(guān)酶活性變化的研究結(jié)果也并不一致〔1-4〕。砷進(jìn)入機(jī)體后,主要經(jīng)血液進(jìn)入肝臟,并主要分布于肝臟線粒體〔2〕。因此,研究砷中毒時與肝細(xì)胞及肝細(xì)胞線粒體受損相關(guān)的酶顯得甚為重要。此外,在慢性砷中毒時,血液中多種生物學(xué)指標(biāo)的改變可能早于臨床表現(xiàn),因此,探討血液生化指標(biāo),對于臨床慢性砷中毒的早期診斷也具有積極的意義。本文以大鼠為研究對象,探討慢性砷中毒時大鼠肝臟線粒體相關(guān)酶及肝臟損傷相關(guān)血清酶活性的改變,以便為進(jìn)一步揭示砷對機(jī)體的毒性作用機(jī)制并為選擇有意義的慢性砷中毒早期診斷酶學(xué)指標(biāo)提供有價值的資料。
1 材料與方法
11 試劑及物品 脲酶(英國默克公司);瓜氨酸,氨基甲酰二鋰磷酸鹽(美國Fluka公司);其余均為國產(chǎn)分析純試劑。
12 實(shí)驗(yàn)動物分組及處理 1~2月齡Wistar大鼠48只,雌雄各半。隨機(jī)分為2組:實(shí)驗(yàn)組28只,飲用含75mg/L三氧化二砷(As2O3)的蒸餾水,常規(guī)大鼠飼料喂養(yǎng)。對照組20只,飲用蒸餾水,以同樣的飼料喂養(yǎng)。2組均于染毒前、染毒3個月及6個月時測定大鼠毛砷含量。染毒3個月時,隨機(jī)抽取實(shí)驗(yàn)組及對照組大鼠各10只,股動脈放血處死;6個月時,處死全部動物,取肝臟及血液進(jìn)行檢查。
13 毛砷含量測定 采用二乙氨基二硫代甲酸銀法〔5〕。
14 大鼠線粒體制備 取大鼠肝2g。采用差速離心法制備〔6〕。按考馬斯亮藍(lán)法〔7〕,以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn),定量線粒體蛋白。
15 線粒體酶活性測定 細(xì)胞色素C氧化酶(COX)活性測定及線粒體ATP酶活性測定參照文獻(xiàn)〔8〕進(jìn)行,COX比活力=K×min/mg線粒體蛋白。ATP酶活性單位以μmol/(mg pro·min)表示。
16 大鼠血清酶活性測定 鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)測定,血清谷氨酸脫氫酶(GDH)活性測定及血清精氨酸酶(Arginase)活性測定參照文獻(xiàn)〔9〕進(jìn)行。OCT活力國際單位為:每升血清每分鐘在37℃時,由OCT的作用產(chǎn)生1μmol瓜氨酸定為一個國際單位。谷氨酸脫氫酶活性(毫國際單位GDH=吸光度×2×05×1000。精氨酸酶單位=鳥氨酸的微克數(shù)×0505。血清腺苷脫氨酸(ADA)活力測定參照文獻(xiàn)〔10〕進(jìn)行,其活力單位指1ml血清使腺苷產(chǎn)生1μg氨氮為一個活力單位。血清谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)酶(GST)活力測定參照文獻(xiàn)〔11〕進(jìn)行,一個GST酶單位活性,相當(dāng)于在37℃條件下1min催化1μmol CDNB與GSH結(jié)合的能力。
17 統(tǒng)計分析 應(yīng)用SPSS 110軟件進(jìn)行分析。毛砷含量呈偏態(tài)分布,結(jié)果以G±SG表示。結(jié)果均采用t檢驗(yàn)進(jìn)行差異的統(tǒng)計學(xué)檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
21 大鼠毛砷含量測定(表1) 在飼養(yǎng)過程中,由于大鼠死亡,在染毒6個月時,大鼠數(shù)量為16只。砷染毒3個月后大鼠毛砷含量即顯著升高,與實(shí)驗(yàn)前及正常對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
表1 各組大鼠毛砷含量測定結(jié)果比較(略)
22 大鼠肝臟線粒體酶活性變化(表2) 與正常對照組比較,大鼠染毒3個月后其肝臟線粒體COX活力顯著降低(P005)。表明砷中毒時,大鼠肝臟線粒體細(xì)胞色素C氧化酶活性已較早并持續(xù)地受到抑制。同時染毒3個月及6個月組大鼠肝臟線粒體ATP酶活力均顯著降低(P
轉(zhuǎn)貼于
表2 各組大鼠肝臟線粒體酶活性變化(略)
23 大鼠血清酶活性變化(表3) 砷中毒3個月及6個月大鼠血清谷氨酸脫氫酶及鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶活力均有顯著升高(P01),染毒6個月時才出現(xiàn)該酶活力的顯著升高(P
表3 各組大鼠血清酶活性變化(略)
3 討論
本研究采用飲水加三氧化二砷復(fù)制慢性砷中毒大鼠模型,輔以毛砷含量檢測觀察大鼠的砷中毒狀況。鐘復(fù)光等〔5〕對燃煤型砷中毒病區(qū)砷毒接觸者發(fā)砷含量的研究結(jié)果表明,發(fā)砷含量對慢性砷中毒診斷有重要意義。本文測定結(jié)果表明,染毒組大鼠毛砷含量與對照組及染毒前大鼠比較明顯升高,說明實(shí)驗(yàn)動物已經(jīng)處于嚴(yán)重的砷中毒狀態(tài)。本文研究結(jié)果表明,砷可顯著抑制肝臟線粒體細(xì)胞色素C氧化酶及ATP酶的活性。這2種酶的活性受到抑制,必然引起氧化磷酸化過程受阻,能量產(chǎn)生障礙,導(dǎo)致線粒體功能的損害,嚴(yán)重影響機(jī)體細(xì)胞功能〔12〕。這可能是慢性砷中毒時,砷毒性作用的重要機(jī)制之一。本實(shí)驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn),砷中毒大鼠血清GDH及OCT活性均顯著升高。由于這2種酶均定位于肝臟線粒體基質(zhì),是肝臟線粒體的特異性酶類。其血清酶活性增高,反映了砷中毒不僅可使肝細(xì)胞,而且可使其線粒體受到嚴(yán)重?fù)p傷,以至酶自線粒體和細(xì)胞內(nèi)滲出到血液中增加其活性。精氨酸酶、ADA及GST都是存在于肝細(xì)胞的特異酶類。血清精氨酸酶及GST活性升高,可能是肝細(xì)胞受損后肝細(xì)胞內(nèi)酶釋出到血清中引起。ADA屬于一種巰基酶,每個分子至少含2個活性巰基〔13〕。大鼠染毒3個月時血清ADA活性升高,其原因可能是因?yàn)楦渭?xì)胞膜受到砷中毒的影響而通透性增高,使ADA泄漏到血液中所致。而隨著砷中毒時間的延長,體內(nèi)積蓄的砷可能與肝細(xì)胞內(nèi)和血液中的部分ADA的活性巰基結(jié)合,而抑制其活性,這可能是其血清中酶活性回降的原因之一。本實(shí)驗(yàn)共檢測了5個血清酶在大鼠持續(xù)砷中毒時的酶活性變化,從尋找慢性砷中毒早期診斷酶學(xué)指標(biāo)的角度看,血清谷氨酸脫氫酶、精氨酸酶在大鼠砷中毒期間一直升高,其活性變化持續(xù)的時間較久,可能更適宜作為一種臨床診斷的參考指標(biāo)。
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學(xué)校實(shí)習(xí)邀請函
同學(xué)們:
為規(guī)范我院08級學(xué)生第二學(xué)期的實(shí)習(xí)申請及審批手續(xù),學(xué)院特擬定了標(biāo)準(zhǔn)格式的實(shí)習(xí)申請及安全保證書,請需要的學(xué)生自行下載、打印之后按要求填寫。在接到企業(yè)的實(shí)習(xí)邀請函之后,外出實(shí)習(xí)的申請流程為(按次序依次辦理):
1、申請人將實(shí)習(xí)申請書(1份)、安全保證書(2份)填寫完整,由本人及監(jiān)護(hù)人簽字確認(rèn)。
2、在實(shí)習(xí)申請書上 請 本人畢業(yè)設(shè)計指導(dǎo)老師 簽字同意。
3、在實(shí)習(xí)申請書上 請 系主任老師 簽字同意。
4、將 企業(yè)實(shí)習(xí)邀請函、簽字后的實(shí)習(xí)申請書(1份)、安全保證書(2份)在12月29日前以班為單位統(tǒng)一交至輔導(dǎo)員處,由輔導(dǎo)員請教學(xué)副院長、學(xué)院副書記/院長助理簽字同意后,整個審批流程完畢,方可離校實(shí)習(xí)。
20xx年x月x日
學(xué)校實(shí)習(xí)邀請函范文
學(xué)院領(lǐng)導(dǎo):
我單位已審核通過 同學(xué)關(guān)于來我單位實(shí)習(xí)的申請,因此邀請藥學(xué)院 專業(yè) 同學(xué)(學(xué)號:)來我單位實(shí)習(xí)。
實(shí)習(xí)期: 年 月 日 至 年 月 日
實(shí)習(xí)期間我單位承擔(dān)代管責(zé)任,同時會指導(dǎo)該同學(xué)完成合格論文,隨時接受貴校對校外實(shí)習(xí)同學(xué)現(xiàn)場進(jìn)行中期檢查,并保證該同學(xué)能在20xx年5月15日前按時回校完成有關(guān)的畢業(yè)論文和畢業(yè)答辯,請院領(lǐng)導(dǎo)予以方便。
實(shí)習(xí)指導(dǎo)教師(經(jīng)理、組長):
畢業(yè)論文題目:
單位地址:
單位聯(lián)系人:
單位聯(lián)系電話:
單位(簽章):
20xx年x月x日
學(xué)校實(shí)習(xí)邀請函范例
____________學(xué)院:
我公司為使高校范文大全盡快了解和熟悉公司及工作情況,使畢業(yè)生更快適應(yīng)工作崗位的要求,誠摯邀請 專業(yè) 20xx級 學(xué)生
1. 實(shí)習(xí)時間:20xx年 3 月 1 日 至20xx 年 4 月 30 日。
2. 實(shí)習(xí)內(nèi)容:
熟悉工作環(huán)境,學(xué)習(xí) 的有關(guān)知識,記錄常遇到的情況以及應(yīng)對措施,積累經(jīng)驗(yàn),建立良好的人脈關(guān)系;初步利用大學(xué)中所學(xué)到的知識解決一些實(shí)際問題,在實(shí)踐過程中摸索并不斷總結(jié)不足。
3. 在實(shí)習(xí)期間,我公司將負(fù)責(zé)學(xué)生的日常管理,同時保障學(xué)生在我公司實(shí)習(xí)期間的人身安全,按照《勞動法》和相關(guān)法規(guī)保證參加實(shí)習(xí)學(xué)生的合法權(quán)益,具體措施由學(xué)生本人和公司商定。
4. 學(xué)生因參加實(shí)習(xí)所產(chǎn)生的一切費(fèi)用與學(xué)校無關(guān),由學(xué)生和公司約定解決。
5. 參加實(shí)習(xí)的學(xué)生如與公司產(chǎn)生糾紛,應(yīng)通過雙方友好協(xié)商或者法律途徑解決。
6. 實(shí)習(xí)期滿,公司應(yīng)要求實(shí)習(xí)學(xué)生盡快返回學(xué)校參加畢業(yè)答辯。
公司電話:
在這個高速發(fā)展的時代,我們會經(jīng)常使用申請書,利用申請書我們可以表達(dá)自己的愿望和訴求。但是你知道怎樣才能寫的好嗎?為了讓您在寫的過程中更加簡單方便,一起來參考是怎么寫的吧!下面給大家分享關(guān)于學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書,歡迎閱讀!
學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書1本人已自行聯(lián)系對口實(shí)習(xí)單位,且實(shí)習(xí)單位也提供了接收實(shí)習(xí)的相關(guān)證明,故申請在年月日至月日,到單位進(jìn)行實(shí)習(xí)。(單位地址:__,單位聯(lián)系人:__,單位電話:__,本人聯(lián)系電話:__,家長聯(lián)系電話:__)。請予批準(zhǔn)。
本人將嚴(yán)格按照以下要求進(jìn)行實(shí)習(xí):
1、嚴(yán)格按照學(xué)校規(guī)定的實(shí)習(xí)要求完成實(shí)習(xí)任務(wù)。
2、實(shí)習(xí)期間,必須通過職教新干線與輔導(dǎo)員聯(lián)系,每月上交實(shí)習(xí)報告到輔導(dǎo)員的空間。
若實(shí)習(xí)單位變動,在變動次日報告輔導(dǎo)員。
3、實(shí)習(xí)期間,自覺遵守實(shí)習(xí)單位的有關(guān)規(guī)章制度,并自覺遵守學(xué)校制定的教學(xué)管理?xiàng)l例,注意實(shí)習(xí)安全和人身安全,并對自己在實(shí)習(xí)期間的行為和安全負(fù)責(zé)。
如違反有關(guān)規(guī)定,一切后果責(zé)任自負(fù)。
家長簽字:
學(xué)生簽字:
輔導(dǎo)員意見:
系(部)意見(蓋章):
20__年__月__日
學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書2尊敬的__:
您好!我是__級水電系的學(xué)生,經(jīng)過三年學(xué)校對我的培養(yǎng),我已經(jīng)完成了在校的學(xué)習(xí),初步掌握了所學(xué)專業(yè)的理論和基本的實(shí)踐能力,由于求知的欲望和自己將來走向社會能夠更廣泛的掌握工作技能,現(xiàn)申請到院就業(yè)處實(shí)習(xí)。為以后的就業(yè)打好堅實(shí)的基礎(chǔ)。
大學(xué)畢業(yè)生是學(xué)校按照黨的教育方針精心培養(yǎng)的、適應(yīng)國家建設(shè)需要的優(yōu)秀人才資源,是高層次人才隊伍的后備力量。為做好黃岡職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)生就業(yè)工作,提高畢業(yè)生的就業(yè)率和就業(yè)質(zhì)量,維護(hù)畢業(yè)生、用人單位和學(xué)校的合法權(quán)益,更好地為經(jīng)濟(jì)建設(shè)和社會發(fā)展服務(wù),院領(lǐng)導(dǎo)和就業(yè)工作處的老師不辭辛苦,日夜操勞。
我希望院領(lǐng)導(dǎo)能夠接受我的自主申請,也希望我在實(shí)習(xí)時的'工作能夠?yàn)檎驹谝痪€的老師分憂,做一些力所能及的事情,雖然,在一些工作技能和經(jīng)驗(yàn)上我有些欠缺,但我相信自己會努力做好一切,做好畢業(yè)生的服務(wù)工作。
在實(shí)習(xí)中我保證做到一下幾點(diǎn):
1、嚴(yán)格遵守學(xué)校實(shí)習(xí)要求和學(xué)校規(guī)章制度。
2、努力學(xué)習(xí),虛心向就業(yè)處老師請教有關(guān)專業(yè)技能知識,服從就業(yè)處老師安排,遵守紀(jì)律。
3、積極做好簡章,通知等資料的張貼工作。
4、在老師忙的時候,做好前來咨詢同學(xué)的登記以及一些蓋章工作。
5、及時向老師反饋實(shí)習(xí)工作進(jìn)展情況及所遇到的問題。
想到就能作到,努力就會有回報,相信所學(xué)能使用于社會需要,并為社會作出貢獻(xiàn),為校爭光。望院領(lǐng)導(dǎo)能夠接受我的申請。
此致
敬禮!
申請人:___
20__年__月__日
學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書3尊敬的__:
我是___院___專業(yè)___班級的學(xué)生,我自主聯(lián)系好實(shí)習(xí)單位,實(shí)習(xí)期間我將到___單位實(shí)習(xí)實(shí)習(xí),在自主實(shí)習(xí)期間,我會遵守以下幾點(diǎn):
1、不再需要學(xué)校推薦就業(yè)單位;
2、嚴(yán)格按照學(xué)校制定的實(shí)習(xí)管理?xiàng)l例完成實(shí)習(xí)任務(wù);
3、與輔導(dǎo)員保持聯(lián)系,匯報實(shí)習(xí)情況,若實(shí)習(xí)單位變動,在變動次日報告輔導(dǎo)員,如需我返校參加活動,保證按時返校;
4、按時到實(shí)習(xí)單位報到,實(shí)習(xí)結(jié)束按時歸校,逾期將自覺接受學(xué)院有關(guān)規(guī)定處理;
5、實(shí)習(xí)期間,自覺遵守實(shí)習(xí)單位的有關(guān)規(guī)章制度,注意實(shí)習(xí)安全和人身安全,并對自己在實(shí)習(xí)期間的行為和安全負(fù)責(zé)。
如違反有關(guān)規(guī)定,一切后果責(zé)任自負(fù)。
此致
敬禮!
申請人:___
20__年__月__日
學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書4尊敬的系領(lǐng)導(dǎo):
本人是機(jī)電學(xué)院__專業(yè)__班學(xué)生,現(xiàn)申請自主實(shí)習(xí),并已與家長商量,取得家長同意?,F(xiàn)特向?qū)W院申請自主實(shí)習(xí)。在實(shí)習(xí)期間,本人保證做到以下幾點(diǎn):
1、實(shí)習(xí)期間遵守單位的規(guī)章制度,信守合同,力爭得到用人單位良好評價;
2、實(shí)習(xí)期間遵紀(jì)守法,維護(hù)學(xué)院的形象,決不做違紀(jì)違法的事情,并注意個人安全;
3、實(shí)習(xí)期間按要求完成系里布置的教學(xué)內(nèi)容,定期與畢業(yè)設(shè)計指導(dǎo)教師溝通,按進(jìn)度完成畢業(yè)設(shè)計各項(xiàng)內(nèi)容,上交畢業(yè)設(shè)計作業(yè);
4、嚴(yán)格按照我系安排的時間回校參加考試及其他有關(guān)的工作,在離校期間保證與輔導(dǎo)員保持通訊暢通,更換聯(lián)系電話時能及時
告知,并做到及時向輔導(dǎo)員匯報有關(guān)學(xué)習(xí)、生活及實(shí)習(xí)情況。
特此申請,懇請學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)。
此致
敬禮!
申請人簽名:___
聯(lián)系電話:____
20__年__ 月 __日
學(xué)生自主實(shí)習(xí)申請書5我叫__,是_____系____專業(yè)__班學(xué)生,我應(yīng)聘于____公司實(shí)習(xí)。
實(shí)習(xí)期從__年__月__日到____年___月__日,經(jīng)家長同意,特向?qū)W院申請從____年___月__日離校前往該公司實(shí)習(xí),并保證做到以下幾點(diǎn):
1、保證實(shí)習(xí)期間遵守單位規(guī)章制度,信守合同;
2、保證實(shí)習(xí)期間遵紀(jì)守法,維護(hù)學(xué)院形象;
3、保證實(shí)習(xí)期間注意人身安全,如出現(xiàn)安全事故,后果自負(fù);
4、畢業(yè)設(shè)計及答辯前及時返校,完成學(xué)業(yè)。
5、實(shí)習(xí)期間,如學(xué)校因教學(xué)工作需要返校,本人保證及時返校。
請審核批準(zhǔn)為盼。
申請人簽名:___
勞動仲裁延期開庭申請書1
申請人:賈___,男,______歲,漢族,______省______市人,私營企業(yè)業(yè)主,現(xiàn)住______市______區(qū)______路______號。
請求事項(xiàng):
對于申請人與______對外經(jīng)濟(jì)貿(mào)易公司鮮蘑公司購銷合同糾紛已向你會提起仲裁申請,并已被受理?,F(xiàn)因申請人無法按期出庭,請求你會延期審理。
事實(shí)和理由:
申請人與___對外經(jīng)濟(jì)貿(mào)易公司間鮮蘑購銷合糾紛,你會定于______年______月______日上午開庭審理。申請人于______年______月______日至______月______日在___省___市考察,原定于______月______日返回。
因______省______市至______省______市的部分鐵路塌陷,火車無法正常運(yùn)行,使申請人無法按時返回______市參加開庭,為保障申請人出庭參加仲裁活動,行使權(quán)利,特向你會申請推遲本案開庭審理時間。
此致
______市仲裁委員會
申請人:賈________
____年____月____日
勞動仲裁延期開庭申請書2
申請人:______,女,______歲,______族,______省______市人,______民營企業(yè)經(jīng)理,現(xiàn)住______市______區(qū)______路______號。
xx
請求事項(xiàng):對于申請人與______經(jīng)貿(mào)公司貨物購銷合同糾紛已向你會提起仲裁申請,并已被受理?,F(xiàn)因申請人無法按期出庭,請求你會延期審理。
事實(shí)和理由:
(應(yīng)祥述事實(shí)與理由,此略。)為保障申請人出庭參加仲裁活動,行使權(quán)利,特向你會申請推遲本案開庭審理時間。
此致
______市仲裁委員會
申請人:______
______年______月______日
相關(guān)知識:開庭通知與延期開庭
(一)開庭通知
仲裁庭應(yīng)當(dāng)在開庭五日前,將開庭日期、地點(diǎn)書面通知雙方當(dāng)事人。根據(jù)一案一庭的原則,此時針對該案件的仲裁庭已經(jīng)成立,具體承擔(dān)對案件的仲裁工作。仲裁庭成員應(yīng)當(dāng)認(rèn)真審閱申訴、答辯材料,調(diào)查、收集證據(jù),查明爭議事實(shí)。遇有需要勘驗(yàn)或鑒定的問題,應(yīng)交由法定部門勘驗(yàn)或鑒定;沒有法定部門的,由勞動爭議仲裁委員會委托有關(guān)部門勘驗(yàn)或鑒定。仲裁庭成員應(yīng)當(dāng)根據(jù)調(diào)查的事實(shí),擬定處理方案,并根據(jù)法律對勞動爭議仲裁案件仲裁期限的規(guī)定,合理確定開庭日期。在確定開庭日期后,仲裁庭應(yīng)當(dāng)在開庭五日前,將開庭日期、地點(diǎn)書面通知雙方當(dāng)事人。明確規(guī)定仲裁庭應(yīng)當(dāng)在開庭五日前通知當(dāng)事人開庭日期、地點(diǎn),一方面有利于當(dāng)事人調(diào)查收集有關(guān)證據(jù)、資料,為開庭辯論、質(zhì)證做準(zhǔn)備,另一方面也便于當(dāng)事人適當(dāng)安排個人事務(wù),以便按時出庭,體現(xiàn)了法律規(guī)定的人性化。關(guān)于通知的方式,本條明確規(guī)定為書面通知。
(二)延期開庭
第一條根據(jù)《中華人民共和國行政復(fù)議法》和《中華人民共和國行政訴訟法》及其他有關(guān)法律、法規(guī)和規(guī)章的規(guī)定,制定本規(guī)則。
第二條我局按照《中華人民共和國行政復(fù)議法》及時接受上級財政部門和昆山市人民政府的行政復(fù)議。
第三條有下列情形之一的,各級財政部門應(yīng)當(dāng)依法應(yīng)訴:
(一)公民、法人或者其他組織因不服本級財政部門具體行政行為提起行政訴訟的;
(二)公民、法人或者其他組織因不服本級財政部門改變原具體行政行為的行政復(fù)議決定提起行,政訴訟的;
(三)其他應(yīng)當(dāng)依法應(yīng)訴的情形。
第四條財政部門依法應(yīng)訴應(yīng)當(dāng)確定訴訟人。
訴訟人一般由法制機(jī)構(gòu)或者有關(guān)機(jī)構(gòu)的工作人員擔(dān)任。必要時也可以委托律師擔(dān)任。
訴訟人人選由法制機(jī)構(gòu)或者由法制機(jī)構(gòu)與有關(guān)機(jī)構(gòu)提出建議,報經(jīng)部門主要負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后,辦理授權(quán)委托書。
第五條財政部門應(yīng)當(dāng)依法及時向人民法院提交答辯狀及有關(guān)證據(jù)和材料。
對不服有關(guān)機(jī)構(gòu)以本級財政部門名義作出的具體行政行為提出行政訴訟的,由有關(guān)機(jī)構(gòu)在收到狀副本之日起五日內(nèi)提出答辯狀,連同作出具體行政行為的有關(guān)證據(jù)和材料送交法制機(jī)構(gòu)。法制機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)對答辯狀進(jìn)行審核,報經(jīng)部門主要負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后提交人民法院。
對不服財政部門改變具體行政行為的行政復(fù)議決定提起行政訴訟的,由法制機(jī)構(gòu)提出答辯狀,報經(jīng)部門主要負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后提交人民法院。
第六條下列行政復(fù)議和應(yīng)訴文書應(yīng)當(dāng)加蓋財政部門印章:
(一)不予受理行政復(fù)議申請決定書;
(二)行政復(fù)議決定書;,
(三)強(qiáng)制執(zhí)行具體行政行為申請書;
(四)強(qiáng)制執(zhí)行行政復(fù)議決定申請書;
(五)停止執(zhí)行具體行政行為通知書;
(六)中止審查具體行政行為通知書;
(七)同意撤回行政復(fù)議申請通知書:
(八)責(zé)令履行行政復(fù)議決定通知書;
(九)作為行政復(fù)議案件被申請人提出的書面答復(fù);
(十)訴訟人授權(quán)委托書;
(十一)行政訴訟、民事訴訟答辯狀;
(十二)其他應(yīng)當(dāng)依法加蓋財政部門印章的行政復(fù)議或應(yīng)訴文書。
前款規(guī)定以外的其他行政復(fù)議和應(yīng)訴文書,可以加蓋法制機(jī)構(gòu)印章。
第七條行政復(fù)議文書應(yīng)當(dāng)按照《行政復(fù)議法》第四十條的規(guī)定送達(dá)。送達(dá)行政復(fù)議文書應(yīng)當(dāng)填制《送達(dá)回證》。
據(jù)統(tǒng)計,到目前為止,全國已有30多個省和副省級市及200多個地市、800多個縣成立了仲裁機(jī)構(gòu),去年全國共處理了5000多起各類人事爭議案件,保護(hù)了個人、單位的合法權(quán)益。
仲裁機(jī)構(gòu)的管轄權(quán)限,受理仲裁范圍
按照《人事爭議處理暫行規(guī)定》,國務(wù)院各部委、國務(wù)院直屬事業(yè)單位以及各部委直屬在京事業(yè)單位的人事爭議,跨?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市)的人事爭議,由人事部人事仲裁公正廳負(fù)責(zé)處理。?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市)、副省級市、地(市)、縣(市、區(qū))仲裁委員會的管轄范圍,由?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市)確定,其各地設(shè)立的人事爭議仲裁機(jī)構(gòu),分別負(fù)責(zé)處理管轄范圍內(nèi)的人事爭議。
下列四類情況為人事爭議處理的適用范圍:國家行政機(jī)關(guān)與工作人員之間因錄用、調(diào)動、履行聘任合同發(fā)生的爭議;事業(yè)單位與工作人員之間因辭職、辭退以及履行聘任合同或聘用合同發(fā)生的爭議;企業(yè)單位與管理人員和專業(yè)技術(shù)人員之間因履行聘任合同或聘用合同發(fā)生的爭議;依照法律、法規(guī)、規(guī)章規(guī)定可以仲裁的人才流動爭議和其他人事爭議。
怎樣寫仲裁申請書
當(dāng)事人應(yīng)當(dāng)在爭議發(fā)生之日起60日內(nèi),以書面形式向仲裁委員會申請仲裁。仲裁申請書須載明的事項(xiàng)有:
(一)申請人姓名、性別、年齡、職業(yè)、工作單位和住所。如果申請人是單位,則應(yīng)寫明單位的名稱、住所、法定代表人或者主要負(fù)責(zé)人的姓名、職務(wù)。
被申請人的姓名、性別、年齡、職業(yè)、工作單位和住所。如果被申請人是單位,則應(yīng)寫明單位的名稱、住所、法定代表人或者主要負(fù)責(zé)人的姓名、職務(wù)。
(二)仲裁請求和所根據(jù)的事實(shí)、理由。
(三)證據(jù)和證據(jù)來源、證人姓名和住所。
仲裁委員會收到仲裁申請書后,15日內(nèi)作出受理或者不受理的決定,如果已決定受理的,應(yīng)在7日內(nèi)將仲裁申請書副本送達(dá)被申請人并組成仲裁庭。被申請人在收到仲裁申請書副本之日起15日內(nèi)應(yīng)提交答辯書和有關(guān)證據(jù)。被申請人沒按時提交或者不提交答辯書,不影響仲裁程序的進(jìn)行。
仲裁庭和仲裁參加人的組成
仲裁委員會處理人事爭議案件,實(shí)行仲裁庭制度。仲裁庭由三名以上(含三名)的單數(shù)仲裁員組成,仲裁委員會指定一名仲裁員擔(dān)任首席仲裁員;簡單的人事爭議案件,仲裁委員會可以指定一名仲裁員獨(dú)任處理。仲裁委員會可以聘任政府有關(guān)部門的人員、專家學(xué)者和律師為仲裁員。
國家行政機(jī)關(guān)、事業(yè)單位及其工作人員,企業(yè)及其經(jīng)營管理人員和專業(yè)技術(shù)人員為人事爭議案件的當(dāng)事人。法人由法定代表人參加仲裁活動,非法人組織由其主要負(fù)責(zé)人參加仲裁活動。
在仲裁過程中,法定代表人或者主要負(fù)責(zé)人更換,應(yīng)由新的法定代表人或者主要負(fù)責(zé)人繼續(xù)參加仲裁活動,原法定代表人或者主要負(fù)責(zé)人參加仲裁活動的行為有效。
當(dāng)事人為無行為能力或者是限制行為能力人,由其監(jiān)護(hù)人參加仲裁活動;當(dāng)事人死亡的,由其法定人或者利害關(guān)系人參加仲裁活動。當(dāng)事人可以委托一到二人參加仲裁活動。委托他人的,必須向仲裁委員會提交有委托人簽名或蓋章的委托書。委托書應(yīng)當(dāng)明確委托事項(xiàng)和權(quán)限。
仲裁的程序
仲裁處理人事爭議應(yīng)先行調(diào)解,在查明事實(shí),分清責(zé)任的基礎(chǔ)上促使當(dāng)事人雙方在不違反法律、法規(guī)的前提下,自愿達(dá)成協(xié)議。調(diào)解達(dá)成協(xié)議的,仲裁庭根據(jù)協(xié)議制作調(diào)解書。調(diào)解書上寫明仲裁請求和當(dāng)事人協(xié)議的結(jié)果。調(diào)解書由仲裁庭成員簽名,加蓋仲裁委員會印章,送達(dá)雙方當(dāng)事人。調(diào)解書經(jīng)雙方當(dāng)事人簽收后,即發(fā)生效力。如果調(diào)解未達(dá)成協(xié)議,或者在調(diào)解書送達(dá)前當(dāng)事人反悔的,仲裁庭應(yīng)當(dāng)及時進(jìn)行仲裁。
仲裁一般是開庭進(jìn)行的。但當(dāng)事人協(xié)議不開庭或仲裁庭認(rèn)為不宜開庭的,也可以書面仲裁。決定開庭處理的,仲裁庭應(yīng)當(dāng)于開庭前5日內(nèi)將開庭時間、地點(diǎn)等書面通知當(dāng)事人。仲裁申請人經(jīng)書面通知,無正當(dāng)理由不到庭或者未經(jīng)仲裁庭許可中途退庭的,可以視為撤回仲裁申請。被申請人經(jīng)書面通知,無正當(dāng)理由不到庭或者未經(jīng)仲裁庭許可中途退庭的,可以缺席仲裁。
當(dāng)事人應(yīng)該對自己的主張?zhí)峁┳C據(jù)。仲裁庭可根據(jù)需要自行收集證據(jù)。但是仲裁的證據(jù)必須是經(jīng)過質(zhì)證認(rèn)定的事實(shí)。
當(dāng)事人在仲裁過程中有權(quán)進(jìn)行辯論。辯論終結(jié)時,首席仲裁員或者獨(dú)任仲裁員應(yīng)當(dāng)征詢當(dāng)事人的最后意見。
裁決應(yīng)按多數(shù)仲裁員的意見作出,當(dāng)仲裁庭不能形成多數(shù)意見時,裁決按首席仲裁員的意見作出。仲裁庭對重大的或疑難的人事爭議案件的處理,可以提交仲裁委員會討論決定。仲裁庭應(yīng)當(dāng)在裁決作出后5日內(nèi)制作裁決書。裁決書應(yīng)當(dāng)寫明仲裁請求、爭議事實(shí)、裁決理由、裁決結(jié)果、仲裁費(fèi)用的負(fù)擔(dān)和裁決日期。裁決書由仲裁庭成員簽名并加蓋仲裁委員會的印章。裁決書一經(jīng)送達(dá),即發(fā)生效力。
仲裁庭處理人事爭議案件,一般應(yīng)當(dāng)在仲裁庭組成之日起60日內(nèi)結(jié)案。案件復(fù)雜需要延期的,經(jīng)仲裁委員會批準(zhǔn),可以適當(dāng)延期,但是延長的期限不得超過30日。
發(fā)生效力的調(diào)解書、裁決書當(dāng)事人必須執(zhí)行。
1通過產(chǎn)學(xué)研結(jié)合推進(jìn)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理實(shí)踐性教學(xué)
教育部在《關(guān)于深化教學(xué)改革,培養(yǎng)21世紀(jì)需要的高質(zhì)量人才的意見》中明確強(qiáng)調(diào)“樹立人才培養(yǎng)要更加積極主動地適應(yīng)社會發(fā)展需要,堅定不移地走‘產(chǎn)學(xué)研3結(jié)合’的人才培養(yǎng)道路的思想”。產(chǎn)學(xué)研結(jié)合是高等學(xué)校培養(yǎng)人才、科學(xué)研究和服務(wù)社會三大職能的具體要求。世界各國的著名高校在產(chǎn)學(xué)研結(jié)合這一環(huán)節(jié)上都做得相當(dāng)成功,我國在這方面也在逐步加強(qiáng)。改革開放以來,農(nóng)業(yè)企業(yè)不斷增多,促進(jìn)了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的不斷發(fā)展和農(nóng)產(chǎn)品的不斷豐富,但農(nóng)業(yè)的經(jīng)營思想和農(nóng)業(yè)企業(yè)的經(jīng)營管理觀念還比較落后。這就需要農(nóng)林高校和企業(yè)緊密結(jié)合,加強(qiáng)科研和教育的雙向交流。開辦農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理專業(yè)的高等院校應(yīng)盡量加強(qiáng)教學(xué)與生產(chǎn)實(shí)際、企業(yè)經(jīng)營管理的結(jié)合,使學(xué)生走出校園,了解當(dāng)前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的現(xiàn)狀、農(nóng)業(yè)企業(yè)管理和科學(xué)技術(shù)方面的現(xiàn)狀及缺陷。從而達(dá)到理論聯(lián)系實(shí)際、知行合一的目的。
2007年,在《教育部關(guān)于進(jìn)一步深化本科教學(xué)改革全面提高教學(xué)質(zhì)量的若干意見》中明確指出,要進(jìn)一步加強(qiáng)對本科實(shí)驗(yàn)實(shí)踐等教學(xué)基本條件的投入。當(dāng)前農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理專業(yè)的實(shí)踐教學(xué)基礎(chǔ)仍然比較薄弱,如何加強(qiáng)實(shí)踐教學(xué)是農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理課程的重要課題。這就要求高等院校加大專業(yè)硬件投入,要求擔(dān)任農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理課程的教師積極改善實(shí)踐性教學(xué)條件,加強(qiáng)與有關(guān)企業(yè)聯(lián)系及合作,指導(dǎo)學(xué)生在實(shí)踐中學(xué)習(xí)、在學(xué)習(xí)中實(shí)踐,通過產(chǎn)學(xué)研結(jié)合方式發(fā)展農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理教學(xué),培養(yǎng)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理人才。
2通過社會實(shí)踐和科研學(xué)術(shù)活動提高農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理專業(yè)實(shí)踐教學(xué)質(zhì)量
農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理類本科實(shí)踐性教學(xué)主要分為課程實(shí)驗(yàn)、專業(yè)綜合實(shí)訓(xùn)、科研實(shí)踐、情景模擬實(shí)驗(yàn)和社會實(shí)踐5個階段。開展社會實(shí)踐和科研學(xué)術(shù)活動能將不同階段所學(xué)內(nèi)容有機(jī)結(jié)合起來,在教學(xué)活動中,做了以下嘗試性研究。
2.1教學(xué)活動組織環(huán)節(jié)
(1)學(xué)生自由組成4~5人的團(tuán)隊,根據(jù)自己了解的情況,自由選題,并撰寫申請書。申請書按照自然科學(xué)基金申請的格式,分為立項(xiàng)依據(jù)、研究內(nèi)容、研究路線、創(chuàng)新性和經(jīng)費(fèi)預(yù)算。由于具有社會實(shí)踐的功能,申請書中增加了技術(shù)可行性和風(fēng)險性分析這部分內(nèi)容。
(2)申請書以作業(yè)形式交給任課教師。任課教師根據(jù)申請書的情況審批后,組織相關(guān)學(xué)生團(tuán)隊進(jìn)行討論。好的項(xiàng)目爭取和相關(guān)企業(yè)、村委會等部門取得聯(lián)系,然后進(jìn)行類似實(shí)習(xí)的方式推進(jìn)該研究活動。
(3)各團(tuán)隊針對申請書研究內(nèi)容開展實(shí)踐性教學(xué)活動,并在期末面向全體同學(xué)進(jìn)行答辯。答辯過程中其他學(xué)生每人至少提一個問題,從而達(dá)到雙向互動的目的。
2.2教學(xué)活動效果分析
從這幾個學(xué)期的教學(xué)效果來看,此活動收到了良好的效果,對于提高學(xué)生的寫作能力、實(shí)踐能力、分析能力和領(lǐng)導(dǎo)力均有很大好處。專業(yè)與社會實(shí)踐是一項(xiàng)重要的模擬實(shí)踐活動,由于農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理學(xué)科的交叉性,加上國與國、地區(qū)與地區(qū)之間的差異,實(shí)踐性教學(xué)的內(nèi)容本應(yīng)是豐富多彩的,但目前由于條件所限,實(shí)踐性教學(xué)內(nèi)容比較單一,這就導(dǎo)致老師難教、學(xué)生難學(xué)的局面出現(xiàn)。因此,農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理的實(shí)踐性教學(xué)應(yīng)當(dāng)與相關(guān)的農(nóng)業(yè)企業(yè)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)部門、政府相關(guān)職能部門建立廣泛的合作機(jī)制,使得學(xué)生能夠在學(xué)習(xí)階段了解企業(yè)的經(jīng)營管理,了解相關(guān)部門對農(nóng)業(yè)的宏觀調(diào)控。在教學(xué)中,可以借鑒東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的經(jīng)驗(yàn),即“班村共建”的措施。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)最初是以農(nóng)林經(jīng)濟(jì)管理專業(yè)的一個班級和學(xué)校附近的一個村對接,學(xué)生通過義務(wù)支教、擔(dān)任村主任助理、為村委會建網(wǎng)站、辦信息報等形式開展社會實(shí)踐,取得了很好的效果。目前已經(jīng)推廣到全校百余個班級,成為該校學(xué)生實(shí)踐性教學(xué)的重要載體。
3農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理專業(yè)實(shí)踐性教學(xué)中需要關(guān)注的問題
3.1通過實(shí)踐性教學(xué)提升學(xué)生的綜合能力
農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理是一項(xiàng)復(fù)雜的社會活動,當(dāng)前社會對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)管理人員具有很高的要求。通過實(shí)踐性教學(xué)增強(qiáng)學(xué)生的綜合能力是教學(xué)的重要方面,可從如下幾個方面加以培養(yǎng):(1)增強(qiáng)學(xué)生動手能力的培養(yǎng)。學(xué)校應(yīng)重視概率論與統(tǒng)計等基礎(chǔ)課的開設(shè),要求學(xué)生必須熟練掌握相關(guān)的財務(wù)及統(tǒng)計軟件,熟練分析各種規(guī)律,迅速生成報表,并撰寫報告。(2)增強(qiáng)學(xué)生領(lǐng)導(dǎo)力的培養(yǎng)。通過各種競賽活動、各種創(chuàng)業(yè)模擬活動,提高學(xué)生的領(lǐng)導(dǎo)能力。(3)增強(qiáng)學(xué)生全球化觀念。專門對這方面的能力進(jìn)行訓(xùn)練和培養(yǎng),既可學(xué)習(xí)國外先進(jìn)的管理經(jīng)驗(yàn),還能培養(yǎng)學(xué)生全球化觀念,把自己放在全球農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中來思考和觀察問題,有助于培養(yǎng)和提升學(xué)生的綜合能力。
【關(guān)鍵詞】缺血-再灌注損傷;細(xì)胞凋亡;TNF-α;IL- 6;Bcl- 2;Fas
缺血-再灌注損傷是導(dǎo)致急性腎損傷(Acute Renal Injury,AKI)的常見原因之一。腎臟缺血再灌損傷早期的細(xì)胞死亡在AKI的發(fā)生機(jī)制有關(guān)鍵作用[1-2]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已得出結(jié)論,Bcl-2、Bax、Fas等凋亡調(diào)節(jié)蛋白及許多炎癥因子如TNF-α、細(xì)胞因子及生長因子會在細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重大影響[3-5]。凋亡腎小管上皮細(xì)胞在AKI中的病理生理作用及形態(tài)學(xué)改變尚不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)以缺血再灌損傷的動物模型從分子水平進(jìn)一步探討急性腎損傷中腎小管上皮細(xì)胞Bcl-2、Fas蛋白表達(dá)及血清中TNF-α、IL-6的變化對細(xì)胞凋亡的影響。
1 材料與方法
1.1 材料 SD大鼠,雌雄不拘,體重100~120g,細(xì)胞凋亡檢測試劑盒,F(xiàn)as免疫組化染色試劑盒、Bcl- 2免疫組化染色試劑盒,大鼠TNF-αELISA試劑盒, 大鼠IL- 6 ELISA試劑盒(美國BPB Biomedical)。
1.2 方法
1.2.1 腎缺血再灌注(IR)動物模型制備SD大鼠放在室溫為18~22℃的環(huán)境下按日常標(biāo)準(zhǔn)喂養(yǎng)。2%戊巴比妥鈉30~40mg/kg腹腔內(nèi)注射,腹部正中線切口,用無損傷動脈夾鉗夾雙側(cè)腎蒂40min造成缺血-再灌注損傷動物模型,松開后觀察到大鼠腎臟由顏色變成鮮紅,即灌注成功。處理好傷口之后照常標(biāo)準(zhǔn)喂養(yǎng)。依次在模型建立之后2小時、6小時、12小時、24小時、48小時分批處死動物,心臟采血檢測TNF-α、IL-6、SCr。采集血樣后馬上將左側(cè)腎臟摘下來,用4%多聚甲醛固定后作常規(guī)石蠟包埋切片。假手術(shù)組(Sham組)僅暴露雙側(cè)腎臟,不鉗夾腎蒂,其余處理方式相同。
1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組48只健康、雄性SD大鼠,隨機(jī)分為6組(每組8例):_ Sham組;_ IR2h組;_IR6h組;_IR12h組;_ IR24h組;_IR48h組;實(shí)驗(yàn)方法同上。
1.2.3 腎小管上皮細(xì)胞凋亡的檢測取HE染色切片相鄰的切片常規(guī)脫蠟入水,并按試劑盒流程處理,用顯微鏡觀察。腎小管上皮細(xì)胞核中出現(xiàn)的棕黃色顆粒就是陽性細(xì)胞,即凋亡細(xì)胞。檢測結(jié)果分析:隨機(jī)選取5個200倍清晰視野,并采用圖像分析儀計數(shù)視野中的細(xì)胞總數(shù)及陽性細(xì)胞數(shù),然后得出每張切片的陽性細(xì)胞百分率。
1.2.4 采用SABC免疫組化法檢測腎小管上皮細(xì)胞中Fas及Bcl-2表達(dá)水平腎小管上皮細(xì)胞膜或胞漿著色呈棕黃色者為Fas陽性細(xì)胞;腎小管上皮細(xì)胞漿著色呈棕黃色者為Bcl-2陽性細(xì)胞。檢測分析同上。
1.2.5 腎功能采用Beckman全自動生化分析儀檢測SCr,苦味酸法。
1.2.6 血清TNF-α、IL-6測定每個標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值減去零孔的OD值;標(biāo)準(zhǔn)品濃度作為橫坐標(biāo),OD值作為縱坐標(biāo),用線連接個標(biāo)點(diǎn),通過標(biāo)本的OD值就可查出其濃度。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù),計量資料進(jìn)行t檢驗(yàn),計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 形態(tài)學(xué)改變
2.1.1 HE染色
Sham組:一切正常;IR2h組:腎小管上皮細(xì)胞呈不規(guī)則形狀排列,腎小球一切正常,間質(zhì)之間存在淤血現(xiàn)象;IR6h組:腎小管上皮細(xì)胞瓦解并脫落,管腔呈現(xiàn)蛋白管型,紅細(xì)胞管型,細(xì)胞碎片,腎小球腫脹變形,炎性細(xì)胞浸潤;IR12h組:腎小管上皮細(xì)胞瓦解較為顯著,可觀測到灶性壞死區(qū)和裸基底膜,結(jié)構(gòu)模糊不清,蛋白管型大量出現(xiàn),紅細(xì)胞管型及細(xì)胞管型,腎小球腫脹,腎小囊腔變得狹窄,并且可以觀察到白色滲出物質(zhì),炎性細(xì)胞浸潤;IR24h組:腎小管上皮細(xì)胞仍有脫落,細(xì)胞扁平,管腔擴(kuò)張,不規(guī)則,腎小球的灌注較好,間質(zhì)淤血減輕;IR48h組:腎小管上皮細(xì)胞腫脹,管型少見,細(xì)胞核大小不等,損傷較前減輕,腎小球基本正常,灌注較好,間質(zhì)淤血減輕。
2.1.2 腎小管上皮細(xì)胞凋亡 Sham組凋亡細(xì)胞百分率明顯低于IR12h 組,陽性率分別為2.03±0.82%,77.74±5.00%(P0.01)(見表1),以皮髓交界區(qū)為甚,見圖1
2.2 Fas及Bcl- 2免疫組化結(jié)果
2.2.1 Sham組Fas少量分布于腎小管上皮細(xì)胞,而IR12h組表達(dá)明顯增強(qiáng),見圖2,其陽性細(xì)胞百分率分別為:3.02±0.82%,83.23±2.22%(P0.01)見表1
2.2.2 Sham組Bcl-2少量分布于腎小管上皮細(xì)胞,以遠(yuǎn)端小管為甚,而IR12h組腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)更為減少,見圖3,其陽性細(xì)胞百分率分別為:2.00±0.90%,0.40±0.05%(P0.01)見表1
2.3 腎功能
IR后2h SCr水平逐漸升高,以IR后12h最為明顯,IR后24h SCr水平逐漸恢復(fù)。Sham組及IR12h組SCr分別為:29.04±9.59(μmol/l),196.97±19.94(μmol/l)見表2(每組8例,χ±s)(P0.01)
2.4 清TNF-α、IL-6含量血清TNF-α、IL-6變化趨勢與SCr一致,Sham組及IR12h組血清TNF-α含量分別為:19.54±3.00(pg/ ml),130.58±36.57(pg/ml),Sham組及IR12h組血清IL-6含量分別為:65.72±16.45(pg/ ml),352.70±58.32(pg/ml)見表2(每組8例,χ±s)(P0.01)。
表1 腎缺血再灌注后12小時腎小管上皮細(xì)胞凋亡、Fas、Bcl-2蛋白表達(dá)的比較 [陽性細(xì)胞百分率(%)]
組別
例數(shù)(n)
凋亡細(xì)胞(%)
Fas(%)
Bcl-2(%)
Sham組
8
2.03±0. 82
3.02±0.82
2.00±0.90
IR12h組
8
77.74±5.00(1)
83.23±2.22(1)
0.40±0.05(1)
注:與Sham組比較,(1)P0.01
表2 腎缺血再灌注后12小時血清中SCr(μmol/l)、TNF-α、IL-6(pg/ml)水平(χ±s)
組別
例數(shù)(n)
SCr(μmol/l)
TNF-α(pg/ml)
IL-6(pg/ml)
Sham組
8
29.04±9.59
19.54±3.00
65.72±16.45
IR12h組
8
196.97±19.94(1)
130.5±36.57(1)
352.70±58.32 (1)
注:與Sham組比較,(1)P0.01
3 討論
隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)飛速發(fā)展,IRI機(jī)制在AKI的發(fā)生中備受關(guān)注。此實(shí)驗(yàn)表明,IR所致的AKI中存在腎小管上皮細(xì)胞凋亡的情況,尤其以皮髓交界區(qū)最為常見,此現(xiàn)象極有可能跟腎缺血再灌注后腎皮髓質(zhì)的能量差異有密切關(guān)系;除此之外還可能由于缺血再灌注后細(xì)胞內(nèi)鈣超載、氧自由基增多、炎性介質(zhì)釋放等多種因共同作用下而導(dǎo)致,確切機(jī)制仍未完全清楚。本實(shí)驗(yàn)表明,細(xì)胞凋亡是缺血再灌注所致AKI中腎小管上皮細(xì)胞死亡的重要方式,在腎功能損害最嚴(yán)重時細(xì)胞凋亡數(shù)目逐漸遞增,由此可見細(xì)胞凋亡在腎功能損害中起著相當(dāng)重要的作用。HE染色提示缺血再灌注后12h腎小管上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清、排列紊亂、脫落、灶性壞死、管型形成、炎性細(xì)胞浸潤等改變相對于其他各組織損害最為嚴(yán)重,由此可分析出在急性腎損傷的極期壞死與凋亡可共存于同一模型中,嚴(yán)重影響了腎功能。
急性腎損傷的得病人群很廣泛,任何一個年齡段的人都會發(fā)生,但是最容易得的急性腎損傷的應(yīng)該是老年人。年紀(jì)大的人,可以理解,它的腎臟老化了,那么血管病變高血壓器官老化比較明顯,這樣腎臟耐受打擊的能力下降。所以他們?nèi)菀椎眉毙阅I損傷;通過持續(xù)性腎臟替代治療清除血清TNF-α、IL-6能改善AKI患者預(yù)后。TNF-α是一種單核細(xì)胞來源的致死性因子。本實(shí)驗(yàn)中血清TNF-α、IL-6在缺血再灌注后12h相對較高,比假手術(shù)組有高度顯著性(P0.01),且與SCr變化程度相一致,此現(xiàn)象表明缺血性急性腎損傷也可能由于炎癥而引起。腎缺血再灌注可能會引起全身或者局部炎癥,釋放了包括TNF-α、IL-6在內(nèi)的多種炎癥介質(zhì),這些炎癥因子的產(chǎn)生將啟動腎IRI的炎癥級聯(lián)反應(yīng)。TNF-α和FasL可能通過炎性腎小球漏出到達(dá)腎小管上皮細(xì)胞或者局部分泌增加,來發(fā)揮其對腎小管的生物學(xué)作用。當(dāng)前醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的是IL-6是AKI炎癥因子之一,可由內(nèi)皮細(xì)胞在缺氧和TNF-α刺激下合成[8]。次試驗(yàn)表明TNF-α可能是腎缺血再灌注的損傷因子,可能介導(dǎo)AKI極期的細(xì)胞凋亡。
此實(shí)驗(yàn)研究顯示腎缺血再灌注后12h Fas蛋白顯著增高,并且以皮髓交界區(qū)明顯,假手術(shù)組Fas蛋白僅少量表達(dá),表明Fas可能介導(dǎo)缺血性急性腎損傷極期腎小管上皮細(xì)胞凋亡過程, 認(rèn)為Fas的上調(diào)與局部TNF-α增高有關(guān),但TNF-α與Fas結(jié)合后信號傳遞的確切機(jī)制仍不清楚,需要進(jìn)行進(jìn)一步探討。
本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白在假手術(shù)組中可呈少量陽性表達(dá),而在缺血再灌注后12小時下調(diào),缺血再灌注所致急性腎損傷極期,Bcl-2蛋白的下調(diào)與TNF-α大量釋放有關(guān)。TNF-α可通過抑制 Bcl-2及Bcl-xl的mRNA的表達(dá),導(dǎo)致Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bax比值下降而發(fā)生細(xì)胞凋亡[9];另一方面缺血性急性腎損傷中Bcl-2的下調(diào)也可能與某些生存因子的相對缺乏有關(guān)[10]。
綜上所述,此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明腎缺血再灌注損傷動物模型中確實(shí)存在細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。凋亡調(diào)控蛋白表達(dá)的改變極有可能是炎癥引起,TNF-α大量釋放后通過上調(diào)Fas和下調(diào)Bcl-2蛋白來參與。本研究提示,促進(jìn)抗損傷機(jī)制而抑制腎臟損傷,延緩細(xì)胞凋亡,誘導(dǎo)再生,對組織損傷后解剖生理及功能的恢復(fù)將有重要意義。
參考文獻(xiàn)
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[10]Franquesa M,Alperovich G,Herrero- Fresneda I,et al. Direct electrotransfer of hHGF gene into kidney ameliorates ischemic acute renal failure[J]. Gene Therapy,2005(21).
第一條 為加強(qiáng)我市城鎮(zhèn)房屋管理,及時處理房屋糾紛,保護(hù)當(dāng)事人的合法權(quán)益,根據(jù)有關(guān)法律、法規(guī),結(jié)合我市實(shí)際,制定本辦法。
第二條 本辦法適用于平等主體的公民之間、法人之間、其他組織之間以及他們相互之間在本市城鎮(zhèn)發(fā)生的房屋糾紛。
第三條 本辦法所指房屋包括其附屬物。
第四條 貴陽市人民政府設(shè)立貴陽市房屋糾紛仲裁委員會(以下簡稱仲裁委員會),負(fù)責(zé)本市城鎮(zhèn)房屋糾紛的仲裁。
第五條 仲裁委員會受理的房屋糾紛案件,必須是當(dāng)事人在合同中訂有仲裁條款或者事后達(dá)成書面仲裁協(xié)議的。在處理中,必須堅持調(diào)查研究,以事實(shí)為依據(jù),以法律為準(zhǔn)繩,保障當(dāng)事人平等地行使權(quán)利。
第六條 仲裁委員會仲裁房屋糾紛案件,實(shí)行一次仲裁制度。
第七條 當(dāng)事人向仲裁委員會申請仲裁,應(yīng)從其知道或者應(yīng)當(dāng)知道權(quán)利被侵害之日起二年內(nèi)提出。法律另有規(guī)定的除外。
第八條 當(dāng)事人、法定代表人可以委托一至二人為人。人必須向仲裁委員會提交當(dāng)事人載明委托事項(xiàng)和權(quán)限的授權(quán)委托書。
第二章 仲裁組織
第九條 仲裁委員會由主任委員、副主任委員、委員組成。
仲裁委員會的組成人員經(jīng)市人民政府批準(zhǔn)。
仲裁委員會下設(shè)辦公室,辦理日常工作。
第十條 仲裁委員會設(shè)專職仲裁員若干人,由仲裁委員會任命,并可聘請若干兼職仲裁員,兼職仲裁員與專職仲裁員在履行職務(wù)時享有同等權(quán)利。
仲裁員由具有專業(yè)知識、法律知識和實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)的人擔(dān)任。
第十一條 仲裁委員會辦理房屋糾紛案件,由仲裁員二人和仲裁委員會指定的首席仲裁員一人組成仲裁庭進(jìn)行。
第十二條 仲裁庭評議案件,實(shí)行少數(shù)服從多數(shù)的原則。評議應(yīng)當(dāng)制作筆錄,由仲裁庭成員簽名。評議中的不同意見,應(yīng)當(dāng)如實(shí)記入筆錄。
疑難、復(fù)雜的案件以及仲裁庭分歧較大的案件,應(yīng)當(dāng)提交仲裁委員會討論決定。仲裁委員會討論決定案件,實(shí)行少數(shù)服從多數(shù)的原則。仲裁委員會的決定,仲裁庭必須執(zhí)行。
第十三條 仲裁員、記錄員、鑒定人有下列情形之一的,應(yīng)當(dāng)回避:
(一)是本案當(dāng)事人;
(二)是本案當(dāng)事人的近親屬;
(三)與本案有利害關(guān)系;
(四)與本案當(dāng)事人有其他關(guān)系,可能影響對案件公正處理。
當(dāng)事人發(fā)現(xiàn)仲裁員、記錄員、鑒定人有上述情形之一的,有權(quán)申請其回避。
第十四條 首席仲裁員的回避由仲裁委員會決定;仲裁員的回避由仲裁委員會主任委員或副主任委員決定。記錄員、鑒定人的回避由首席仲裁員決定。對申請回避作出的決定,可以采取口頭或書面方式告訴當(dāng)事人。
第十五條 仲裁人員應(yīng)當(dāng)依法秉公辦案,不得接受當(dāng)事人及其人請客送禮。
仲裁人員有貪污受賄,徇私舞弊,枉法裁決行為的,應(yīng)當(dāng)追究行政責(zé)任和法律責(zé)任;構(gòu)成犯罪的,依法追究刑事責(zé)任。
第三章 仲裁范圍
第十六條 仲裁委員會受理下列房屋糾紛案件:
(一)因房屋的買賣、贈與、分割、典當(dāng)、抵押等發(fā)生的糾紛;
(二)因房屋租賃、使用、互換、修繕等發(fā)生的糾紛;
(三)有關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章規(guī)定受理的房屋糾紛;
(四)仲裁委員會認(rèn)為應(yīng)當(dāng)受理的其他房屋糾紛。
第十七條 仲裁委員會不受理下列房屋糾紛:
(一)人民法院已經(jīng)受理或?qū)徖磙k結(jié)了的房屋糾紛;
(二)因離婚、繼承、析產(chǎn)發(fā)生的房屋糾紛;
(三)涉及尚未落實(shí)政策的房屋糾紛;
(四)涉及外國人和華僑、港、澳、臺同胞的房屋糾紛;
(五)單位內(nèi)部分配、調(diào)整房屋發(fā)生的房屋糾紛。
第四章 仲裁程序
第十八條 當(dāng)事人向仲裁委員會申請仲裁房屋糾紛,應(yīng)按照本辦法的規(guī)定遞交申請書和有關(guān)證據(jù),并按照被申請人數(shù)提交副本。申請書應(yīng)當(dāng)寫明以下事項(xiàng):
(一)申請人名稱(姓名)、住所、法定代表人姓名、職務(wù);
(二)被申請人名稱(姓名)、住所、法定代表人姓名、職務(wù);
(三)申請的要求及其理由;
(四)證人姓名和住址。
第十九條 仲裁委員會接到申請書后,經(jīng)審查符合法律、法規(guī)規(guī)定的,應(yīng)當(dāng)在七日內(nèi)立案;不符合規(guī)定的,應(yīng)在七日內(nèi)通知申請人不予受理并說明理由。
案件受理后,應(yīng)在五日內(nèi)將申請書副本送達(dá)被申請人。被申請人收到申請書副本后,應(yīng)在十五日內(nèi)提交答辯書和有關(guān)證據(jù)。被申請人沒有按時提交或不提交答辯書的,不影響案件的處理。
案件受理后,仲裁庭應(yīng)當(dāng)在自立案之日起三個月內(nèi)辦結(jié),確需延長的,經(jīng)仲裁委員會批準(zhǔn),可以適當(dāng)延長,但最長不得超過六個月。
第二十條 仲裁庭對受理的案件,應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查,收集和審查有關(guān)證據(jù)。各種證據(jù)經(jīng)驗(yàn)證核實(shí)后,方能作為認(rèn)定事實(shí)和仲裁的依據(jù)。
仲裁委員會有權(quán)自行調(diào)查取證,可向有關(guān)單位或個人查閱有關(guān)案件的檔案、資料和原始憑證,有關(guān)單位或個人應(yīng)如實(shí)提供材料,協(xié)助進(jìn)行調(diào)查;需要時,應(yīng)出具證明。
第二十一條 現(xiàn)場勘驗(yàn)或者對物證進(jìn)行技術(shù)鑒定,可通知當(dāng)事人及有關(guān)人員到場,必要時可邀請有關(guān)單位派人協(xié)助??彬?yàn)筆錄和技術(shù)鑒定書,應(yīng)寫明時間、地點(diǎn)、勘驗(yàn)鑒定結(jié)論,由參加勘驗(yàn)、鑒定的人員簽字或者蓋章。
仲裁委員會委托有關(guān)單位進(jìn)行技術(shù)鑒定時,受托單位應(yīng)按照委托鑒定的項(xiàng)目、標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)真辦理。
第二十二條 仲裁委員會認(rèn)為有必要時,可以在作出仲裁決定之前,通知有關(guān)部門對有爭議的房屋停辦過戶、轉(zhuǎn)讓和改擴(kuò)建等手續(xù)。有關(guān)部門接到通知后,應(yīng)予以執(zhí)行。
第二十三條 仲裁委員會處理案件期間,有關(guān)單位和有關(guān)人員在接到仲裁委員會的協(xié)助通知書后,應(yīng)積極協(xié)助,不得拖延。
第二十四條 仲裁委員會在處理案件時,應(yīng)先行調(diào)解。調(diào)解可以由仲裁庭主持,也可由仲裁員一人主持。
第二十五條 仲裁庭應(yīng)當(dāng)在查清事實(shí),分清責(zé)任的基礎(chǔ)上進(jìn)行調(diào)解,促使當(dāng)事人互相諒解,達(dá)成協(xié)議。
調(diào)解達(dá)成協(xié)議,必須出于雙方當(dāng)事人自愿,協(xié)議內(nèi)容不得損害國家利益、公共利益和他人的合法權(quán)益,不得違背法律、法規(guī)、規(guī)章和政策。
第二十六條 調(diào)解達(dá)成協(xié)議后應(yīng)制作調(diào)解書。調(diào)解書應(yīng)寫明當(dāng)事人基本情況,主要事實(shí),協(xié)議內(nèi)容和仲裁費(fèi)承擔(dān);調(diào)解書應(yīng)由當(dāng)事人簽名,仲裁員、記錄員署名,并加蓋仲裁委員會印章。
調(diào)解書經(jīng)雙方當(dāng)事人簽收并履行后生效。
第二十七條 調(diào)解未達(dá)成協(xié)議,或調(diào)解書送達(dá)后不履行的,應(yīng)當(dāng)由仲裁庭進(jìn)行仲裁。
需要開庭仲裁的,由仲裁庭在三日前將開庭時間、地點(diǎn),以書面方式通知當(dāng)事人。
申請人經(jīng)兩次通知,無正當(dāng)理由拒不到庭的,或未經(jīng)仲裁庭許可中途退庭的,可按撤回申請?zhí)幚怼?/p>
被申請人經(jīng)兩次通知,無正當(dāng)理由拒不到庭的,或未經(jīng)仲裁庭許可中途退庭的,可作缺席仲裁。
第二十八條 仲裁庭仲裁案件按下列順序進(jìn)行:
(一)宣布案由和仲裁人員名單,告知當(dāng)事人的權(quán)利和義務(wù);
(二)詢問當(dāng)事人,出示和宣讀有關(guān)證據(jù);
(三)申請人及其人發(fā)言;
(四)被申請人或其人答辯;
(五)雙方辯論。
雙方辯論終結(jié),仲裁庭按申請人、被申請人順序征詢最后意見,并可再行調(diào)解,調(diào)解未達(dá)成協(xié)議的,由仲裁庭評議后裁決。
第二十九條 仲裁決定書應(yīng)當(dāng)寫明:
(一)申請人和被申請人的名稱(姓名)、地址及其法定代表人或者人姓名、職務(wù);
(二)申請的理由、爭議的事實(shí)和要求;
(三)仲裁決定認(rèn)定的事實(shí)、理由和適用的法律、法規(guī)、規(guī)章和政策;
(四)仲裁決定的結(jié)果和仲裁費(fèi)用的承擔(dān);
(五)不服仲裁決定的起訴期限。
仲裁決定書由仲裁員、記錄員署名,加蓋仲裁委員會的印章。
第三十條 當(dāng)事人不服仲裁決定,可在收到仲裁決定書之日起十五日內(nèi),向房屋所在地的人民法院起訴;逾期不起訴的,仲裁決定書即發(fā)生法律效力。
第三十一條 對已經(jīng)發(fā)生法律效力的仲裁決定,發(fā)現(xiàn)確有錯誤,認(rèn)為需要重新處理的,由主任委員、副主任委員提交仲裁委員會討論決定。
第三十二條 已經(jīng)發(fā)生法律效力的裁決,當(dāng)事人應(yīng)當(dāng)履行,一方逾期不履行,另一方可向人民法院申請強(qiáng)制執(zhí)行。
第三十三條 參加仲裁活動的當(dāng)事人和有關(guān)人員,應(yīng)遵守仲裁秩序。阻礙仲裁員執(zhí)行公務(wù)的,給予批評教育;情節(jié)嚴(yán)重的,由公安機(jī)關(guān)依照《中華人民共和國治安管理處罰條例》處理;構(gòu)成犯罪的,由司法機(jī)關(guān)依法追究刑事責(zé)任。
第五章 附 則
第三十四條 當(dāng)事人應(yīng)繳納仲裁費(fèi)。仲裁費(fèi)包括案件受理費(fèi)和案件處理費(fèi)。
仲裁費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)由市房屋糾紛仲裁委員會會同市物價局另行制定。
仲裁費(fèi)由申請人預(yù)交。
經(jīng)仲裁終結(jié)的案件,仲裁費(fèi)由敗訴人承擔(dān);當(dāng)事人部分勝訴,部分?jǐn)≡V的,按比例分擔(dān)。
第三十五條 調(diào)解書和仲裁決定書發(fā)生法律效力后,權(quán)屬關(guān)系需要變更的,房地產(chǎn)管理部門和土地管理部門應(yīng)分別辦理手續(xù)。