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一、學(xué)習(xí)情況
學(xué)習(xí)是進(jìn)步的階梯,對于每個人都是終身任務(wù),作為一名基層的領(lǐng)導(dǎo)干部,學(xué)在前、用在前、把握好、運(yùn)用好政策是開展農(nóng)村工作的前提,因此在學(xué)習(xí)上我做到先學(xué)一步,融會貫通,更好的履行自己的職責(zé)。在學(xué)習(xí)理論的同時還注重向?qū)嵺`學(xué)習(xí),取他人之長,補(bǔ)己之短,通過學(xué)習(xí)提高自身素質(zhì),掌握工作主動權(quán)。
二、 分管工作
(一)以發(fā)展“五色經(jīng)濟(jì)”為重點,全面推進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)
發(fā)展,在種植和養(yǎng)殖的發(fā)展的基礎(chǔ)上,協(xié)調(diào)各種力量發(fā)展農(nóng)畜產(chǎn)品加工;以安全生產(chǎn)為主線,監(jiān)督保障各企業(yè)、經(jīng)營組織生產(chǎn)安全,維護(hù)好人民群眾的利益;以保障群眾利益為要點,開展組織好勞動保障等方面的工作。
(二)、人大工作
(1)、把握一個方向。半年來我充分認(rèn)識到,人大工作必須堅持正確的政治方向,牢固樹立“人民代表人民選,選好代表為人民”的觀念,讓代表不僅有當(dāng)代表的榮譽(yù)感,更有為民謀事、為民想事和為民服務(wù)的使命感和責(zé)任感,增強(qiáng)代表的責(zé)任意識、大局意識,在鎮(zhèn)黨委政府與群眾之間架起一座連心橋。
(2)、主動參與經(jīng)濟(jì)建設(shè),在有為中實現(xiàn)有位。鎮(zhèn)人大牢固樹立發(fā)展是第一要務(wù)的觀念,積極圍繞全鎮(zhèn)發(fā)展大局把服務(wù)招商引資、發(fā)展竹溝特色“五色經(jīng)濟(jì)”和促進(jìn)全鎮(zhèn)統(tǒng)籌協(xié)調(diào)發(fā)展作為人大工作的重要大事來抓。一是及時審議、決定全鎮(zhèn)發(fā)展和建設(shè)中的重大事項,保障和促進(jìn)經(jīng)濟(jì)建設(shè)、城鎮(zhèn)建設(shè)、農(nóng)牧業(yè)發(fā)展的順利進(jìn)行。二是服從工作安排,勇?lián)?jīng)濟(jì)發(fā)展重?fù)?dān)。鎮(zhèn)人大始終與鎮(zhèn)黨委、政府同心同步同調(diào),主動為政府分憂,為基層解難。困難面前不退讓,大膽負(fù)責(zé)不越位,求真務(wù)實見成效,真正做到共下經(jīng)濟(jì)建設(shè)一盤棋,同唱加快發(fā)展主題曲,齊做富民強(qiáng)鎮(zhèn)大文章。三是積極鼓勵人大代表開展創(chuàng)業(yè)競賽,進(jìn)一步發(fā)揮人大代表的示范作用,為全鎮(zhèn)經(jīng)濟(jì)的迅速崛起推波助瀾。
(3)、認(rèn)真實施工作監(jiān)督。一是召開主席團(tuán)會議,適時聽取和審議政府有關(guān)工作情況的匯報。二是組織政府組成人員在鎮(zhèn)人代會期間進(jìn)行述職,接受人大代表的評議促進(jìn)政府部門工作作風(fēng)的轉(zhuǎn)變和辦事效率的提高。三是組織人大代表
開展各種層次的觀察活動。重點就農(nóng)村各項基礎(chǔ)設(shè)施的建設(shè)、剩余勞動力的培訓(xùn)轉(zhuǎn)移、各項社會事業(yè)的發(fā)展等方面開展視察。四是圍繞改善經(jīng)濟(jì)發(fā)展環(huán)境,提高服務(wù)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的能力和水平,組織人大代表對鎮(zhèn)直有關(guān)單位和部門進(jìn)行視察、調(diào)查和評議。上半年,對全鎮(zhèn)中、小學(xué)、財政所等單位和部門調(diào)查、評議和視察,將發(fā)現(xiàn)的問題和解決問題辦法形成書面紀(jì)要,交鎮(zhèn)黨委、政府作為年度考評的參考依據(jù)。
(4)、積極組織代表活動,在指導(dǎo)中激發(fā)活力。竹溝鎮(zhèn)人大代表分別來自各條戰(zhàn)線,各個行業(yè)。一是開展代表學(xué)法、用法。組織代表系統(tǒng)的學(xué)習(xí)了《憲法》、《選舉法》、鄉(xiāng)鎮(zhèn)《人大工作條例》等法律法規(guī)。二是在代表中開展記民情日記活動。鎮(zhèn)人大統(tǒng)一制作民情日記本發(fā)到每位代表手中,要求代表根據(jù)自身實際情況記錄下基層百姓所需解決的問題,并定期調(diào)閱,充分掌握來自基層的第一手民情資料,傾聽群眾呼聲,關(guān)注社會熱點,為人大工作的開展創(chuàng)造更多的有利條件。
(5)、不斷加強(qiáng)自身建設(shè),在服務(wù)中樹立形象。一是加強(qiáng)人大制度建設(shè)。建立健全了鎮(zhèn)人大各項工作制度,堅持每季度主席團(tuán)會議制度、定期向黨委匯報工作制度,進(jìn)一步完善人大專職人員聯(lián)系選民、聯(lián)系基層代表制度等,通過制度建設(shè)推進(jìn)了人大工作的法制化、規(guī)范化。二是加強(qiáng)人大作風(fēng)建設(shè)不斷增強(qiáng)人大工作的影響力和滲透力。三是加強(qiáng)人大陣地建設(shè)。在黨委和政府的支持下改善鎮(zhèn)人大的辦公條件,重
點進(jìn)行基層代表活動點建設(shè),為廣大基層代表營造一個良好的活動環(huán)境。同時搞好這次鎮(zhèn)人大換屆選舉工作,按照區(qū)委和區(qū)委和區(qū)人大常委會的要求認(rèn)真扎實地完成換屆選舉的各階段工作。
三、存在的不足
一,思想政治
作為一名黨員,時刻認(rèn)識到不斷加強(qiáng)政治學(xué)習(xí)的重要性和緊迫性.結(jié)合本職工作,認(rèn)真學(xué)習(xí)黨的各項路線,方針,政策,在實踐中認(rèn)真落實科學(xué)發(fā)展觀.嚴(yán)于律己,廉潔奉公,高標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格要求自己.積極為地震災(zāi)區(qū)捐款捐物,繳納特殊黨費(fèi),為災(zāi)區(qū)來的學(xué)生排憂解難.
二,工作情況
作為一名領(lǐng)導(dǎo)干部,嚴(yán)格要求自己,認(rèn)真履行崗位職責(zé),不斷開拓進(jìn)取,使我系的各項工作取得明顯進(jìn)展.
(一),理清思路,明確工作重點.
根據(jù)學(xué)校的有關(guān)要求,密切結(jié)合我系實際,在充分調(diào)研的基礎(chǔ)上,明確了我系的工作計劃.計劃重點突出,圍繞教學(xué)條件的改善,重點搞好五項建設(shè),即師資隊伍建設(shè),專業(yè)建設(shè),學(xué)科建設(shè),課程建設(shè),實驗室與實習(xí)基地建設(shè);圍繞迎評工作,重點抓好五方面工作,即課堂教學(xué),實踐教學(xué),畢業(yè)論文,考試工作,教風(fēng)學(xué)風(fēng)工作.
(二),真抓實干,具體落實
1,師資隊伍建設(shè).認(rèn)真落實引進(jìn)計劃,引進(jìn)博士1名,碩士1名.在職教師中,有1名同志碩士研究生畢業(yè)學(xué)成歸來,有5名同志獲得高校教師碩士學(xué)位;有1名同志考取了博士研究生;有1名同志轉(zhuǎn)為碩博連讀.
2,專業(yè)建設(shè).在堅持穩(wěn)定發(fā)展現(xiàn)有專業(yè)基礎(chǔ)上,成立了新上專業(yè)調(diào)研小組,特別對資源環(huán)境與城鄉(xiāng)規(guī)劃管理(土地管理與房地產(chǎn)開發(fā))專業(yè)進(jìn)行了調(diào)研,為新上專業(yè)打下了良好基礎(chǔ).按照學(xué)校部署,作為我校特色專業(yè)的旅游管理專業(yè)積極申報了省級特色專業(yè).
3,學(xué)科建設(shè)和科研工作.旅游管理優(yōu)勢學(xué)科三年建設(shè)期滿,順利通過學(xué)校評估驗收.組織老師們積極參與上級( )科研項目的申報,共申報國家社科,省軟科學(xué),省教育廳,泰安市科技局,泰安市社科等項目12項,有2項獲得立項.有3項科研成果獲__學(xué)院優(yōu)秀科研成果獎二等獎.組織了地理學(xué)一級學(xué)科及旅游管理學(xué)科碩士點的申報材料.組織旅游管理團(tuán)隊申報了泰安市委組織部立項的優(yōu)秀科技創(chuàng)新團(tuán)隊.
4,課程建設(shè).省級精品課程《中國地理》,通過國家教學(xué)指導(dǎo)委員會申報了國家級精品課;有3門課程申報校級精品課,其中1門榜上有名.
5,實驗室與實習(xí)基地建設(shè).加強(qiáng)了地理科學(xué)教育實習(xí)基地和旅游管理賓館實習(xí)基地建設(shè),3個教育實習(xí)基地在新泰相繼掛牌,江蘇一家五星級酒店成為我系新的實習(xí)基地,旅游管理專業(yè)學(xué)生開辟了野外實習(xí)基地.實驗室建設(shè)上,旅游管理實驗室及天象館等獲準(zhǔn)立項.
6,課堂教學(xué).配合學(xué)校中青年教學(xué)競賽,積極組織教師加強(qiáng)訓(xùn)練,參與競賽,我系取得了二等獎1名,三等獎2名的較好成績.
7,實踐教學(xué).地理專業(yè)完成教育實習(xí)與野外實習(xí).旅游專業(yè)學(xué)生于7月,擬于1月奔赴東莞和杭州,常熟等地進(jìn)行賓館實習(xí).該專業(yè)學(xué)生的野外實習(xí)得到了切實落實,組織了省內(nèi)外兩條線路的野外實習(xí).
8,畢業(yè)論文.按照教務(wù)處的總體要求,對于屆畢業(yè)生論文工作的各個環(huán)節(jié)嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),學(xué)生畢業(yè)論文整體質(zhì)量比往年明顯提高.屆畢業(yè)生論文工作也已進(jìn)行了具體部署.
9,考試工作.組織教師認(rèn)真學(xué)習(xí)我??荚嚬ぷ饔嘘P(guān)規(guī)定,從考試動員到監(jiān)考,從命題到閱卷各個環(huán)節(jié)規(guī)范程序,切實增強(qiáng)廣大教職員工的責(zé)任心,落 實責(zé)任追究制.在學(xué)校組織的試卷檢查中取得了較好成績.
10,教風(fēng)學(xué)風(fēng)建設(shè).鼓勵支持教師提高業(yè)務(wù)水平,增強(qiáng)責(zé)任心,愛崗敬業(yè).通過召開學(xué)生座談會,加強(qiáng)學(xué)生考勤,強(qiáng)化班主任職能,加強(qiáng)考風(fēng)考紀(jì),表彰考研同學(xué)等措施,進(jìn)一步加強(qiáng)了學(xué)風(fēng)建設(shè).
(三)周密安排,精心組織,成功舉行了建系20周年的慶典工作
我叫XXX,現(xiàn)任XX科科長,現(xiàn)就本人在生技科一年來的工作和學(xué)習(xí)情況向各位領(lǐng)導(dǎo)和同志們作以下匯報:
一年來,在局黨委和局領(lǐng)導(dǎo)的正確領(lǐng)導(dǎo)下,緊緊圍繞我局工作重點,按時組織全科人員學(xué)習(xí)有關(guān)文件、政策精神,以轉(zhuǎn)變工作作風(fēng)、強(qiáng)化服務(wù)意識,圍繞創(chuàng)一流供電這個中心思想,努力在生產(chǎn)技術(shù)管理、電網(wǎng)建設(shè)上下功夫。在加強(qiáng)安全管理,優(yōu)質(zhì)服務(wù)。和各項考核的促進(jìn)下,圓滿完成了二OO三年局下達(dá)的各項工作任務(wù)。
一、完成我局制定的共同管理目標(biāo):
生技科堅持把提高職工的思想覺悟和工作熱情放在首位,從不把政治思想學(xué)習(xí)作為形式主義來抓,不但堅持了每星期二、五的政治學(xué)習(xí)制度,按照布置的學(xué)習(xí)內(nèi)容組織認(rèn)真進(jìn)行學(xué)習(xí),每個人都作好了心得筆記和學(xué)習(xí)感想,并且把學(xué)習(xí)的結(jié)果運(yùn)用到生產(chǎn)技術(shù)管理的各個方面,以學(xué)習(xí)促進(jìn)各項工作的開展,端正了工作態(tài)度,提高了大家的工作積極性,從而保證了全科職工自覺遵守勞動紀(jì)律,無發(fā)生遲到曠工現(xiàn)象;在完成本職工作任務(wù)的同時,認(rèn)真完成上級布置的臨時任務(wù);自覺遵守法規(guī)、法令,沒有發(fā)生任何違紀(jì)現(xiàn)象;積極開展黨風(fēng)廉政建設(shè),無發(fā)生任何與黨風(fēng)廉政建設(shè)相違背的人和事;無發(fā)生違犯計劃生育現(xiàn)象;上半年完成通訊報導(dǎo)12篇,按局規(guī)定篇數(shù)完成上半年宣傳工作。
二、圓滿完成XX科工作目標(biāo):
進(jìn)入2003年以來,我們首先對我局工程安排情況進(jìn)行了認(rèn)真的分析,分清輕重緩急,工作有重點有重心,把110千伏XX輸變電工程、110KVXX電廠配套工程的XXX變電站、XX變電站和110KVXX線、第二期35KV農(nóng)網(wǎng)建設(shè)改造項目和35千伏XX、XX、XX、XX、XXX、XX、XX、XX、XX等變電站的設(shè)備工程,站容站貌、主變增容等電網(wǎng)改造工作作為今年工作重點來完成,全年共完成以下幾個方面的工作。
1、完成110KVXX變前期準(zhǔn)備土建施工協(xié)調(diào)以及安裝協(xié)調(diào)工作,110KVXX輸變電工程是我局今年工作的重點工作,也是省市電業(yè)局要求必須按時完成的項目。為了作好這項工作,我們生技科進(jìn)行了具體分工,明確了責(zé)任。盡可能壓縮前期設(shè)計時間,經(jīng)常與市院設(shè)計人員溝通,為下一步施工盡可能爭取多余的時間,在施工過程中及時協(xié)調(diào)施工過程中存在的有工程技術(shù)等方面的問題并及時向領(lǐng)導(dǎo)進(jìn)行匯報,并與施工安裝單位、設(shè)計單位、設(shè)備廠家等聯(lián)系,協(xié)商督促解決,有力的促進(jìn)了工程順利實施。目前,已完成該工程基礎(chǔ)開挖,砼墊層預(yù)制,設(shè)備招標(biāo),圖紙會審、土建施工、設(shè)備安裝等方面的工作,為惠溝變早日投運(yùn)奠定了良好的基礎(chǔ)。
2、完成我局部分輸、配電改造工作,由于我局輸、變電設(shè)備以及站容站貌陳舊,我們結(jié)合我局實際,先后制定出XX變、XX變土建改造方案,XX新建方案、XX變、XXX增容方案,全市渡夏方案。目前,大部分工程都已實施結(jié)束,為我局供電安全提供了可靠的供電保證。為我局創(chuàng)一流縣級供電企業(yè)有了一個良好的開端。
3、規(guī)劃設(shè)計和上報第二期35KV農(nóng)網(wǎng)建設(shè)改造項目、第二期35KV農(nóng)網(wǎng)改造是我局一項重要工作之一,也是XX科工作的一項重要內(nèi)容,為此,我科10名成員均參與了該項工作,付出了大量勞動和精力。本次共實施35KV輸變電工程7項,完成投資XXXX萬元,由于對施工加大了協(xié)調(diào)力度,及時處理施工過程中存在問題,使35KV工程按省市局要求時間完工,并順利通過市局組織的初步驗收,受到了市局驗收人員的好評。
4、根據(jù)省市局領(lǐng)導(dǎo)安排和農(nóng)網(wǎng)指揮部的統(tǒng)一部署,組織有關(guān)人員對第三期城網(wǎng)工程進(jìn)行了勘測、設(shè)計。目前,已完成整個城區(qū)的負(fù)荷調(diào)查、預(yù)測。中低壓電網(wǎng)的規(guī)劃,配電變壓器的位置選擇,短路電流計算,無功補(bǔ)償、圖紙繪制框架設(shè)計、匯總項目選擇等工作。
5、為配合路網(wǎng)和城區(qū)嵩山大道改造,先后制訂了XX公路兩側(cè)電力線路改造工程和XX道路兩側(cè)電力線路改遷計劃。
6、完成我市變電站一次系統(tǒng)圖繪制和保護(hù)方案的計算工作。
7、在非典防治工作方面,我們按照局要求,堅持作到一天四簽到,天天量體溫,杜絕了非典源的傳播途徑。
8、完成電網(wǎng)安全度夏高峰負(fù)荷調(diào)整方案的制訂工作。
9、完成電網(wǎng)應(yīng)急措施制訂工作。
10、完成了新增變電布點35KVXX變電站的可研、初設(shè)、施設(shè)工作。
11、完成XXX變電站的擴(kuò)建開工準(zhǔn)備工作。
12、根據(jù)局安全風(fēng)暴會議精神完成了輸電線路缺陷處理的方案制訂工作。
13、完成東、西區(qū)電網(wǎng)優(yōu)化方案編設(shè)工作。
14、完成XX電廠接入系統(tǒng)110KV音紙線路的規(guī)劃、勘測、設(shè)計工作。
15、完成局下達(dá)的各項臨時性的任務(wù)。
三、廉潔自律方面
在完成本職工作的同時,注重對職工進(jìn)行廉潔方面的教育,杜絕吃、拿、卡要現(xiàn)象在我科發(fā)生,無發(fā)生任何與黨風(fēng)廉政建設(shè)相違背的人和事,無發(fā)生違紀(jì)現(xiàn)象。
四、團(tuán)結(jié)方面
由于近幾年來生技科的工作量大,設(shè)計、繪制圖紙量大,經(jīng)常加班加點,不分白天晝夜,全體同志不但沒有怨氣,而是相互配合,共同努力,全體職工從未發(fā)生爭吵現(xiàn)象,真正形成了工作上合力行動上合格的的良好局面。
xx年本人任總工辦及地理信息中心主任(兼職),7月份之前借調(diào)到省調(diào)查辦。在總工和院領(lǐng)導(dǎo)的正確領(lǐng)導(dǎo)下,在各部門的大力支持和協(xié)助下,本人工作勤勤懇懇、任勞任怨、加班加點完成了各項工作任務(wù),現(xiàn)將各項工作總結(jié)
(一)總工辦工作
一、基本情況
xx年總工辦在崗人員四人,高級工程師一名負(fù)責(zé)技術(shù),二名工程師負(fù)責(zé)資料室管理。年初,總工辦按照院xx年工作部署,研究制定了總工辦年度工作目標(biāo)和任務(wù),明確了每個人的工作職責(zé),細(xì)化了日常工作和重點工作內(nèi)容。
技術(shù)方面的日常工作,一是我院各項測繪業(yè)務(wù)涉及到的各種技術(shù)資料,主要是各類項目的技術(shù)設(shè)計書、指導(dǎo)書、技術(shù)總結(jié)、工作總結(jié)等;二是根據(jù)搜集的資料及項目完成過程中存在的問題和不足,匯編各類項目技術(shù)培訓(xùn)材料;三是學(xué)習(xí)研究新技術(shù)、新方法。重點工作是按院里安排,組織參加技術(shù)學(xué)習(xí)、培訓(xùn),項目的檢查、驗收。
資料管理的日常工作,一是整理查清各類資料,按檔案資料管理的要求進(jìn)行維護(hù);二是對使用頻繁、可數(shù)字化的資料進(jìn)行數(shù)字化,便于今后查找使用;三是接收、整理各個項目提交的資料。重點工作是根據(jù)院需要及時搜集、發(fā)放項目所需的各種控制點成果、圖件資料等,配合各項目承擔(dān)部門向甲方提交成果資料。
項目申報。按院安排,編寫項目可行性報告及項目申報書。
二、完成的主要工作
1、組織完成了歷年測繪項目存檔控制點成果的數(shù)字化;整理編輯了所有存檔測繪項目的電子目錄;
2、 組織參與編寫了《全省礦業(yè)權(quán)核查基礎(chǔ)控制測量、水準(zhǔn)測量實施方案》和《全省探礦權(quán)核查實施
方案》;
3、組織編寫了《縣級土地資源利用數(shù)據(jù)庫建立技術(shù)設(shè)計書》、《西藏山南四個縣數(shù)據(jù)庫建設(shè)設(shè)計書》;
4、 組織編寫了《xx省地質(zhì)信息連續(xù)采集運(yùn)行系統(tǒng)可行性研究報告》、《xx省淮河流
域沉降動態(tài)監(jiān)測管理信息系統(tǒng)》申報書。
5、 全面參與全省礦業(yè)權(quán)核查基礎(chǔ)控制測量、水準(zhǔn)測量和全省探礦權(quán)核查項目具體
一是資料收集、整理、發(fā)放
資料的收集、整理和發(fā)放是測繪項目重要的環(huán)節(jié)之一。此項工作不僅要責(zé)任心強(qiáng)、細(xì)致,而且要規(guī)范、有序,符合資料管理的相關(guān)規(guī)定,為此特別制定了資料領(lǐng)借程序、院資料管理規(guī)定等。xx年是我院測繪項目最多,任務(wù)量最大的一年,尤其是我院承擔(dān)的全省礦業(yè)權(quán)基礎(chǔ)控制測量和探礦權(quán)核查任務(wù),涉及到了大量資料的收集、整理和發(fā)放。
首先是近800個c級gps控制點、5000多幅正攝影像圖(文秘范文)及所需的1:5萬地形圖的收集、整理,并為十四家作業(yè)單位(十家外協(xié)單位)發(fā)放成果、簽訂保密責(zé)任書。資料室的同志經(jīng)常加班加點,及時無誤地為各生產(chǎn)單位分發(fā)資料。
【關(guān)鍵詞】 川芎嗪注射液; 腹膜間皮細(xì)胞; 高糖; ⅰ型膠原; 基質(zhì)金屬蛋白酶?1; 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑?1; 體外實驗
zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 65?69.
received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.
indexed/abstracted in and full text link?out at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.
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doi: 10.3736/jcim20090110open access
effects of ligustrazine injection on high glucose?induced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro
gui?song zhu, jin?song he
department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china
objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 (mmp?1) and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 (timp?1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.
methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low?, medium? and high?dose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semi?quantitative reverse transcription?polymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 in culture supernatants were measured by enzyme?linked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.
results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucose?induced type ⅰ collagen and timp?1 expressions in a dose?dependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium? and high?dose ligustrazine injection could significantly increase mmp?1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).
conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp?1/timp?1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.
keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase?1; tissue inhibitor of metalloproteinase?1; in vitro
腹膜纖維化是腹膜透析治療的主要并發(fā)癥,最終導(dǎo)致腹膜功能衰竭,這是腹膜透析患者退出治療的主要原因[1]。腹膜纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ecm)的過度沉積為特點[2]。研究表明,ecm的過度沉積是由于ecm合成與降解失衡而引起[3]。ⅰ型膠原是腹膜纖維化中主要的ecm[4],其降解過程受基質(zhì)金屬蛋白酶?1(matrix metalloproteinase?1, mmp?1)及其特異性抑制劑金屬蛋白酶組織抑制劑?1(tissue inhibitor of metalloproteinase?1, timp?1)調(diào)控[5]。有研究證實,高糖能上調(diào)腹膜間皮細(xì)胞(human peritoneal mesothelial cells, hpmcs)ⅰ型膠原和timp?1的表達(dá),降低mmp?1活性[3]。本研究通過觀察川芎嗪注射液對高糖刺激下hpmcs ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)的影響,探討川芎嗪在防治腹膜纖維化中的作用及其機(jī)制。
1 材料和方法
1.1 試劑和主要儀器 川芎嗪注射液(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司,批準(zhǔn)號為國藥準(zhǔn)字h20020630);50%葡萄糖注射液(江蘇方強(qiáng)制藥廠,批號為200710111)。磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered solution, pbs)、胎牛血清(fetal calf serum, fcs)、trizol和rpmi?1640粉劑等(gibco公司);胰蛋白酶和瓊脂糖粉等(promega公司);ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme?linked immunosorbent assay, elisa)試劑盒(adl公司);二喹啉甲酸(bicinchoninic acid, bca)蛋白含量檢測試劑盒(南京凱基生物科技公司);ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物,m?mlv第一鏈cdna合成試劑盒和taq酶等(invitrogen公司);抗細(xì)胞角蛋白抗體、抗細(xì)胞波形蛋白抗體、第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體(北京中山生物技術(shù)有限公司)。nu?2500e二氧化碳培養(yǎng)箱(nuaire公司);全自動酶標(biāo)儀(biobank公司);生物電泳圖像分析系統(tǒng)(上海復(fù)日科技有限公司)。
1.2 實驗方法
1.2.1 hpmcs的培養(yǎng)與鑒定 取來自南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院普外科擇期腹部手術(shù)患者(排除尿毒癥、腹膜炎)捐獻(xiàn)的大網(wǎng)膜組織,按文獻(xiàn)[3]方法原代培養(yǎng)hpmcs,按1?3傳代,第3代細(xì)胞用于實驗,每次實驗均由來自3個患者的標(biāo)本進(jìn)行3次獨立實驗。倒置相差顯微鏡觀察hpmcs呈多邊形,似鋪路鵝卵石樣外觀;免疫組化鑒定抗細(xì)胞角蛋白抗體和抗波形蛋白抗體染色陽性,抗第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體染色陰性。
1.2.2 實驗步驟和分組 hpmcs用含1%fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液同步培養(yǎng)24 h后分為5組(每組設(shè)3個樣本):正常組(完全培養(yǎng)液)、高糖對照組(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高劑量川芎嗪(10、20和40 mg/l)組。各組完全培養(yǎng)液均為含有15% fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液。細(xì)胞置于37 ℃、5% co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h。
1.2.3 elisa法檢測細(xì)胞上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1含量 分組干預(yù)48 h后,離心收集上清液,按elisa試劑盒說明書檢測ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)水平。用0.1 mol/l naoh溶解細(xì)胞沉淀,bca蛋白檢測試劑盒測定細(xì)胞沉淀中蛋白質(zhì)濃度,用相應(yīng)蛋白質(zhì)濃度結(jié)果校正檢測結(jié)果。
1.2.4 半定量rt?pcr 分組處理同上。采用trizol一步法提取總rna,2 μg總rna進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cdna,50 μl反應(yīng)體系進(jìn)行pcr擴(kuò)增,以β?actin作內(nèi)參照(引物序列及反應(yīng)條件見表1)。1.5%瓊脂糖凝膠電泳(110 v,15 min)進(jìn)行pcr產(chǎn)物鑒定,電泳圖像分析儀掃描分析,mrna相對含量用其pcr產(chǎn)物吸光值(absorance, a)與β?actin a值的比值表示。引物及pcr反應(yīng)條件見表1。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)用x±s表示,采用spss 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,組間差異比較采用單因素方差分析,兩組間均數(shù)比較采用lsd?t檢驗。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。 表1 ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物序列及pcr反應(yīng)條件
2 結(jié) 果
2.1 上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)水平 與正常組比較,高糖對照組上清液中ⅰ型膠原和timp?1含量顯著升高(p<0.01),mmp?1含量顯著下降(p<0.01);與高糖對照組比較,低、中和高劑量川芎嗪組上清液中的ⅰ型膠原和timp?1含量顯著降低(p<0.05, p<0.01),且兩者均呈量效關(guān)系,中、高劑量川芎嗪組上清液mmp?1含量顯著增加(p<0.01)。見表2。表2 各組上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)表達(dá)
2.2 hpmcsⅰ型膠原、mmp?1和timp?1 mrna的表達(dá) 與正常組比較,高糖對照組hpmcs ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna分別上升(15.43±0.83)倍和(4.19±0.09)倍(p<0.01),mmp?1/β?actin mrna下降(86.9±0.44)%(p<0.01);與高糖對照組相比,低、中、高劑量川芎嗪組ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna表達(dá)水平均顯著下調(diào)(p<0.05),兩者均呈量效關(guān)系,中、高劑量川芎嗪組mmp?1/β?actin mrna表達(dá)顯著增加(p<0.05)。見圖1和圖2。
3 討 論
高糖透析液導(dǎo)致ecm過度沉積是腹膜纖維化的病理基礎(chǔ)[2],研究表明,高糖不僅增加hpmcsⅰ型膠原的表達(dá),并且引起ⅰ型膠原降解酶系mmp?1/timp?1的表達(dá)失衡[3]。我們的研究結(jié)果與之基本相同,此外我們發(fā)現(xiàn),川芎嗪能顯著對抗高糖的上述作用。
在生理條件下,hpmcs可以產(chǎn)生一定量的ecm和mmps/timps[3, 6]。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系,幾乎能降解全部ecm成分。timps是內(nèi)源性分泌蛋白,作為mmps的特異性抑制因子,其n'端可與相應(yīng)的mmps催化活性中心的鋅離子結(jié)合而抑制其催化活性[7]。本實驗通過研究川芎嗪對hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型膠原及其降解酶系mmp?1/timp?1分泌及表達(dá)的影響,旨在探討川芎嗪對hpmcs在高糖環(huán)境下ⅰ型膠原的合成和降解的干預(yù)作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示,川芎嗪能顯著降低高糖所致的ⅰ型膠原的過度合成,同時顯著下調(diào)timp?1的表達(dá),增加mmp?1的表達(dá),提示川芎嗪亦能通過調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡,從而促進(jìn)ⅰ型膠原的降解,減少ecm沉積。由此我們推測,川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用。
川芎嗪是中藥川芎的有效成分之一,屬酰胺類生物堿,具有活血化瘀的功效。藥理實驗證明,川芎嗪具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫和鈣離子拮抗的作用[8]。目前川芎嗪抑制ⅰ型膠原、timp?1和增加mmp?1表達(dá)的機(jī)制尚不清楚。以往的研究發(fā)現(xiàn)這可能與抑制轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長因子β1(transforming growth factor?β1, tgf?β1)表達(dá)有關(guān)[9, 10]。tgf?β1是重要的致纖維化細(xì)胞因子,參與了腹膜纖維化的病理過程[2]。tgf?β1可增加ⅰ型膠原的合成,并且抑制mmps的活性而激活timps,使ⅰ型膠原降解減少[3, 11]。有研究報道,川芎嗪能降低多種細(xì)胞如心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的膠原合成和timp?1表達(dá),而增加mmp?1的分泌和表達(dá),進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這可能是通過抑制tgf?β/smads信號傳導(dǎo)通路繼而抑制tgf?β1表達(dá)的結(jié)果[9, 10, 12]。我們前期研究證實,川芎嗪能下調(diào)高糖致hpmcs tgf?β1的表達(dá)(文章待發(fā)表)。因此我們推測,川芎嗪抑制tgf?β1的表達(dá)可能是其抑制hpmcs ⅰ型膠原合成和調(diào)整mmp?1/timp?1表達(dá)平衡的機(jī)制之一,其具體機(jī)制將是我們下一步要研究的內(nèi)容。
綜上所述,川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型膠原的過度合成,并且通過調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡,促進(jìn)ⅰ型膠原降解,從而減少ecm的沉積,防止腹膜纖維化的發(fā)生和發(fā)展。因此,川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用,這對腹膜纖維化的機(jī)制及其防治的研究有一定借鑒和應(yīng)用價值。
【參考文獻(xiàn)】
1 plum j, hermann s, fussh?ller a, schoenicke g, donner a, r?hrborn a, grabensee b. peritoneal sclerosis in peritoneal dialysis patients related to dialysis settings and peritoneal transport properties. kidney int suppl. 2001; 78: s42?s47.
2 yung s, liu zh, lai kn, li ls, chan tm. emodin ameliorates glucose?induced morphologic abnormalities and synthesis of transforming growth factor beta1 and fibronectin by human peritoneal mesothelial cells. perit dial int. 2001; 21(suppl 3): s41?s47.
3 kim jj, li jj, kim ks, kwak sj, jung ds, ryu dr, yoo th, choi hy, han sh, kim hj, yoon sy, han ds, kang sw. high glucose decreases collagenase expression and increases timp expression in cultured human peritoneal mesothelial cells. nephrol dial transplant. 2008; 23(2): 534?541.
4 perfumo f, altieri p, degl'innocenti ml, ghiggeri gm, caridi g, trivelli a, gusmano r. effects of peritoneal effluents on mesothelial cells in culture: cell proliferation and extracellular matrix regulation. nephrol dial transplant. 1996; 11(9): 1803?1809.
5 wang yd, yan py. expression of matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 in ulcerative colitis. world j gastroenterol. 2006; 12(37): 6050?6053.
6 visse r, nagase h. matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. circ res. 2003; 92(8): 827?839.
7 fujisaki k, tanabe n, suzuki n, mitsui n, oka h, ito k, maeno m. the effect of il?1alpha on the expression of matrix metalloproteinases, plasminogen activators, and their inhibitors in osteoblastic ros 17/2.8 cells. life sci. 2006; 78(17): 1975?1982.
8 huang y, chen sq, zhang g, chen rh. effect of tetromethylpyrazine and aminoguanidine on expression of vascular endothelial growth factor in kidney of diabetic rats. j chin integr med. 2004; 2(1): 39?41. chinese with abstract in english.
黃焱, 陳少強(qiáng), 張更, 陳瑞華. 川芎嗪聯(lián)合氨基胍對糖尿病大鼠腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子表達(dá)的影響. 中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報. 2004; 2(1): 39?41.
9 lin yz, xu cx, deng yl, chen l, huang h, du j. effects of tetramethylpyrazine on fibrosis of atrial tissue and atrial fibrillation in a canine model of congestive heart failure induced by ventricular tachypacing. j chin integr med. 2006; 4(1): 35?38. chinese with abstract in english.
林亞洲, 許春萱, 鄧玉蓮, 陳林, 黃海, 杜建. 川芎嗪對心室快速起搏心力衰竭實驗犬心房顫動及心房纖維化的影響. 中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報. 2006; 4(1): 35?38.
10 hua hy, li yy, ge sw. study of tetramethylpyrazine in treatment on liver fibrosis and mechanism in rats. zhong yao yao li yu lin chuang. 2007; 23(5): 60?62. chinese with abstract in english.
華海嬰, 李艷瑛, 戈士文. 川芎嗪抗大鼠免疫損傷性肝纖維化作用及機(jī)制研究. 中藥藥理與臨床. 2007; 23(5): 60?62.