微萃取技術在生物醫(yī)學的發(fā)展和趨勢
前言：想要寫出一篇引人入勝的文章？我們特意為您整理了微萃取技術在生物醫(yī)學的發(fā)展和趨勢范文，希望能給你帶來靈感和參考，敬請閱讀。
【摘要】在分析方法學中，樣品制備對于從復雜的基質(zhì)中分離、濃縮需要的痕量組分是非常重要的。樣品制備是勞動力最密集而且最容易出錯的過程，極大地影響了分析物測定的可靠性和準確性。通過使用微萃取技術和微型設備可以有效地完成之前需要多種分析儀器才可以做到的復雜樣品的制備。固相微萃取（Solid-phasemicroextraction，SPME）作為其中一類，既簡單又有效，具有小型化，自動化和高通量的特點。此外，固相微萃取可減少分析時間，降低溶劑消耗和處置成本。本文綜述了新型固相微萃取技術的當前發(fā)展狀況及未來趨勢，包括纖維固相微萃取，管內(nèi)固相微萃取和相關的新微萃取技術。這些方法在制藥和生物醫(yī)學分析中至關重要。
【關鍵詞】固相微萃??；分析方法；樣品制備
1固相微萃取技術在生物分析中的發(fā)展現(xiàn)狀
SPME技術可粗略地分為靜態(tài)批量平衡微萃取和動態(tài)流動平衡微萃取的方法。最常用的技術是利用在纖維（纖維固相微萃取，fiber-SPME）和毛細管（管內(nèi)固相微萃?。┩馔扛灿幸粋€適當?shù)墓潭ㄏ啵壳皵嚢璋簦⊿BSE），薄膜（TFME），微量注射器（syringeSPME）和吸頭（in-tipSPME）也已經(jīng)被開發(fā)利用于SPME。在此技術上，科學家們研制了新的圖層、設備來提高提萃取效率；設計了新的接口可以連接多種分析儀器系統(tǒng)和自動化在線系統(tǒng)。目前多種SPME方法已經(jīng)被用于測定生物樣品中的化合物，包括尿、血清、血漿、全血、唾液、呼氣和頭發(fā)。本節(jié)將回顧這些新型SPME技術及其在生物分析中的新應用。
1.1纖維固相微萃取技術：fiber-SPME裝置是由一個內(nèi)置萃取纖維的針頭和一個外部支架集合體構成的。含有熔融二氧化硅的可伸縮固相微萃取纖維（1或2cm）目前可以在市場上買到。當纖維被插入到樣品，目標分析物從樣品基質(zhì)中分離，進入涂布在纖維的外表面的固定相，直至達到平衡。與有填充柱的傳統(tǒng)固相萃取相比，該方法可以將所有的樣品制備步驟整合在一起。fiber-SPME通過在GC中的熱吸附作用與GC或GC-MS聯(lián)用，已經(jīng)成功地應用于檢測多種氣體、液體及固體樣品內(nèi)的揮發(fā)性和半揮發(fā)性有機化合物。fiber-SPME也可以連接HPLC和LC-MS來分析不適合GC的弱揮發(fā)性或熱不穩(wěn)定化合物，SPME/HPLC接口配備了一個微量的溶劑室用于溶劑解吸。市售的自動進樣器，如PAL、MPS-2、TriPlus、和Concept96，可以實現(xiàn)fiber-SPME的自動化。該系統(tǒng)通過簡單編程編可以執(zhí)行稀釋、攪拌和提取等多種樣品制備步驟，從而降低檢測時間、加快采樣處理量以及提高可重復性。
1.2批量平衡微萃取技術：其他幾種靜態(tài)批量平衡固相微萃取的差別在于提取設備的結構，如涂層位于攪拌棒或薄膜上。攪拌棒吸附萃?。⊿BSE）是一個新的樣品制備技術，克服了纖維固相微萃取的有限容量的缺點?，F(xiàn)在市售的磁性PDMS涂層攪拌棒，如Twister®攪拌棒，類似于SPME，但是有較厚的涂層（0.3~1.0mm），使相容量是纖維固相微萃取的50~250倍，但SBSE需要手動處理，自動化程度低。SBSE/GC-MS法檢測已經(jīng)發(fā)展到檢測血液、尿液和組織樣品的基本藥物，用于法醫(yī)毒理學中的常規(guī)藥物篩選。最近，一個高度敏感的分析方法利用SBSE可以測定人尿樣品中的微量酚類外源性雌激素。此外，SBSE與HPLC-UV聯(lián)合使用可用于檢測血漿樣品中卡馬西平、苯妥英及苯巴比妥的含量。雖然的固相微萃取方法的靈敏度可以通過增加萃取相的體積而提高，但是單純增加吸附層的厚度將需要更長的平衡時間，因為萃取率通過涂層厚度來控制。最近開發(fā)的薄膜固相微萃?。═FME）可以增加物質(zhì)的萃取速率和固相微萃取的敏感性。PDMS膜的薄層表面積大，比其他的固相微萃取的裝置（如纖維和攪拌棒）提取相容量大，萃取率高。這種方法是特別適用于具有高的分布常數(shù)的疏水性半揮發(fā)性組分。此外，一個新的C18薄膜萃取結構已被應用到LC-MS/MS分析尿液樣本中的苯二氮類藥物，該方法通過使用自動進樣器，使分析物能在96孔板中平行萃取來實現(xiàn)高通量分析。
1.3管內(nèi)固相微萃取技術：管內(nèi)固相微萃?。↖n-tubeSPME）使用一個毛細管柱，具有小型化，自動化，高通量的特點，可以即時與分析儀器聯(lián)用以減少溶劑消耗。不同于fiber-SPME，In-tubeSPME通常使用很短的內(nèi)壁涂層為熔融石英的毛細管。根據(jù)填充類型的不同，纖維填充，吸附劑填充和桿型整料柱被開發(fā)出來以提高提取效率和增加特異性。纖維填充柱由裝有纖維的剛性棒狀雜環(huán)聚合物組成，吸附劑填充和桿型整料柱具備一個附有萃取相的微型液相毛細管柱。在In-tubeSPME方法中，分析物被吸收或吸附到填充纖維和吸附劑的外表面上。In-tubeSPME操作系統(tǒng)可以分類為溢流萃取系統(tǒng)和吸入/噴射萃取系統(tǒng)，第一種系統(tǒng)中溶液是朝一個方向上連續(xù)地通過一個提取的毛細管柱，第二種系統(tǒng)中樣品溶液被毛細管柱被反復吸入和分配。分析物可以隨流動相或靜態(tài)解吸溶劑解吸，與GC，LC或CE聯(lián)用進行分析。
1.4其他新型SPME技術：目前更多新型的圖層及裝置已經(jīng)被研發(fā)用于醫(yī)學生物檢測。聚吡咯和聚噻吩涂層纖維已被用于萃取血液中的治療多重耐藥性金黃色葡萄球菌的抗生素和血漿中抗腎上腺素藥物。睪酮印跡SPME纖維被用于選擇性萃取在尿液樣本中合成代謝類固醇。最近，有生物相容性的In-tubeSPME聯(lián)合HPLC-熒光檢測方法被用于血漿樣品中干擾素α的治療監(jiān)測。此外，具有唯一萃取相的鉛筆芯纖維，被用于從人的唾液中提取微量的甲基苯丙胺。一個基于DI-SPME，使用溶膠-凝膠法制得的衍生纖維聯(lián)用GC-MS，被用來分析21例肺結核患者的痰中的脂肪酸。
2結論和未來發(fā)展趨勢
科研工作者為了從復雜基質(zhì)中提取分析物而研究更新、更有效的方法，樣品制備一直位于制藥和生物化學研究的最前沿。多種類型SPME裝置與GC、LC或CE聯(lián)用成為高效的樣品制備方法，包括纖維、攪拌棒、薄膜及毛細管。批量平衡微萃取克服了SPME萃取相容量有限的缺點。固相微萃取技術已廣泛地應用于生物分析，他們是目前的樣品制備方法的優(yōu)秀替代品。在未來的研究中，可以實現(xiàn)即時分析和自動化樣品萃取的設備和系統(tǒng)是SPME重要的發(fā)展方向。小型化和自動化的樣品制備技術在高通量分析中必不可少，并且需要連接多種微型分析裝置。此外，在96孔板中纖維或薄膜涂層的使用有利于并行高通量樣品處理。改良固相微萃取的涂層使其吸附能力和選擇性增強也是科研工作者重要的發(fā)展方向，利用它可以有效地提取復雜基質(zhì)中的低濃度的目標分析物。目前已經(jīng)開發(fā)利用的涂層材料包括聚吡咯、溶膠-凝膠法制備的多孔二氧化硅等。此外，利用光響應的聚合物和聚合物磁性顆粒也可用于選擇性樣品制備。SPME發(fā)展的主要障礙是缺乏特異性設備，找到既有良好的生物相容性又有高精準度的纖維已經(jīng)成為攻關難點，這也限制了這種技術在實驗室的應用?？傊滔辔⑤腿〖夹g對于制藥和生物醫(yī)學的樣品制備是有良好的發(fā)展前景，特別是考慮到固相微萃取的獨特功能，使得未來研究變得生機勃勃。由于智能材料的發(fā)展、新型集成高通量采樣設備及方法的研究，固相微萃取的潛在應用范圍有望擴大。
作者：郭慧 徐卓 單位：遼寧省大連大學附屬新華醫(yī)院