病毒樣本精選(九篇)

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第1篇：病毒樣本范文

關(guān)鍵詞：諾如病毒；PCR；食源性疾??；檢測(cè)技術(shù)

Abstract：Objective A laboratory investigation and analysis of school outbreaks of acute gastroenteritis caused by Norovirus was performed. Methods The method combined epidemiological investigation with laboratory testing was employed. A total of 40 samples includingswabs and feces of patients； food； condiments； smear samples of environment samples ； water samples were collected and utilized for RT-PCR detection and routine bacteriological testing. Results Norovirus nucleic acid were detected positive inswabs of six students， a health care teacher， three chefs and a feces sample， a food. Conclusion Norovirus inswab， feces and food can be detected quickly and effectively by RT-PCR.

Key words：Norovirus；PCR；Foodborne diseases；Detection technology

近年來(lái)，諾如病毒引起的急性胃腸炎暴發(fā)時(shí)有發(fā)生。諾如病毒可通過(guò)食物、水及人與人接觸而使人感染發(fā)病，若在學(xué)校及幼兒園等集體單位發(fā)生，則易引起群體性胃腸炎暴發(fā)。諾如病毒感染性腹瀉以起病急、傳播快、暴發(fā)多為特征，因該病的癥狀及其多在冬季流行率上升，故被稱為"胃腸道流感"或"冬季嘔吐病"[1]。本文針對(duì)2015年3月成都市成華區(qū)某小學(xué)發(fā)生的一起諾如病毒引起的聚集性急性胃腸炎，將相關(guān)實(shí)驗(yàn)室病原檢測(cè)情況及技術(shù)探討報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1臨床信息 學(xué)生聚集性病例的主要癥狀為嘔吐、腹瀉、腹痛、惡心，部分病例的血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果顯示白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞率增高。

1.2流行病學(xué)及衛(wèi)生學(xué)調(diào)查 患者均為在校學(xué)生及教師，有在校共同進(jìn)餐史，學(xué)校提供公用直飲水及生活用水。

1.3 樣本采集及其來(lái)源 根據(jù)流行病學(xué)信息，準(zhǔn)備的采樣物資包括病毒采樣管（北京友康）、自配滅菌1% NaCl肉湯、滅菌鹽水和腸道致病菌直劃平板（Mac、HE、TCBS）。采集病例肛拭8份、糞便樣1份、學(xué)校廚師肛拭8份、供餐食品留樣5份、調(diào)味品4份、環(huán)境涂抹樣16份及水樣2份（見(jiàn)表1）。

1.4實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 對(duì)采集的樣本進(jìn)行病毒學(xué)檢測(cè)和食物中毒常規(guī)致病菌檢測(cè)。用RT-PCR法檢測(cè)諾如病毒和輪狀病毒核酸；采用RT-PCR和細(xì)菌培養(yǎng)法檢測(cè)食物中毒常規(guī)致病菌：沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽孢桿菌、致瀉大腸埃希氏菌。

1.4.1 病毒檢測(cè)樣本處理 肛拭和糞便樣本無(wú)需前處理；對(duì)于食品樣本，采用無(wú)菌操作取適量（約5 g）樣本至病毒采樣管內(nèi)（若有體積較大的食材，則用滅菌剪刀剪碎后放入），充分振搖后，靜置待用。

1.4.2 細(xì)菌DNA 的提取及檢測(cè) 取樣本鹽水管上清液1mL，12000rpm離心5min后棄上清。沉淀加入滅菌水50μL，將其懸浮后100℃煮沸5min，12000rpm離心2min，取上清用于PCR反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)采用達(dá)安生物科技有限公司提供的沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽孢桿菌、致瀉大腸埃希氏菌核酸檢測(cè)試劑盒，按說(shuō)明書(shū)加入5μL核酸提取物，在ABi Step-one plus PCR擴(kuò)增儀依程序進(jìn)行40次循環(huán)擴(kuò)增，并檢測(cè)。

1.4.3病毒RNA 的提取及檢測(cè) 選用天隆核酸提取試劑盒（磁珠法）（Ex-RNA/DNA 病毒2.0）提取病毒RNA。取各樣本上清液200μL，按說(shuō)明書(shū)加入10μL Proteinase K，4μL Acryl Carrier，放入天隆NP 968核酸提取儀依程序自動(dòng)提取。RT-PCR采用達(dá)安生物科技有限公司的A、B、C 組輪狀病毒核酸、諾如病毒核酸檢測(cè)試劑盒，取核酸提取物5μL，加入PCR反應(yīng)管，放入ABi Step-one plus PCR擴(kuò)增儀依程序擴(kuò)增40個(gè)循環(huán)，并檢測(cè)。

1.4.4 細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)法常規(guī)檢測(cè) 按照WS 271-2007、GB 4789-2010方法進(jìn)行沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽孢桿菌、致瀉大腸埃希氏菌、變形桿菌、椰毒假單胞菌等病原菌的檢測(cè)。

2結(jié)果

2.1細(xì)菌PCR檢測(cè) 擴(kuò)增曲線均無(wú)明顯指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期，表明樣本中未檢出目標(biāo)菌核酸。

2.2病毒RT-PCR檢測(cè) RT-PCR結(jié)果表明，6名學(xué)生、1名保健教師、3名食堂廚師的肛拭樣本和1個(gè)糞便樣本、1個(gè)食品樣本（炒榨菜）中檢出諾如病毒；所有樣本中均未檢出輪狀病毒（見(jiàn)表2）。

注：打"/"號(hào)為該樣品未開(kāi)展檢測(cè)此項(xiàng)檢測(cè)。

2.3細(xì)菌學(xué)培養(yǎng) 細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)結(jié)果顯示，樣本均未檢出目標(biāo)菌。

2.4疫情控制 臨床資料、流行病學(xué)調(diào)查資料和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示，從食品加工者、食品及用餐者檢測(cè)出諾如病毒，構(gòu)成一條出清晰的傳播鏈。因此，此次疫情判定為諾如病毒引起的聚集性疫情，可能系諾如病毒污染學(xué)校供餐食品所致。明確診斷和進(jìn)行疫情分析后，疾控中心繼續(xù)開(kāi)展調(diào)查，指導(dǎo)并督促學(xué)校落實(shí)疫情控制措施，停止食用污染的食品，對(duì)相關(guān)區(qū)域進(jìn)行了消毒，對(duì)帶病毒廚師調(diào)離食品加工崗位，繼續(xù)開(kāi)展癥狀監(jiān)測(cè)、病例搜索等防控措施。對(duì)住院病例進(jìn)行有針對(duì)性治療。截止疫情發(fā)生后第3d，住院病例相繼痊愈出院，未發(fā)現(xiàn)新發(fā)病例，疫情得到有效控制。

3 討論

3.1在17例病例的臨床檢驗(yàn)結(jié)果中，有5例血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果顯示中性粒細(xì)胞率增高，淋巴細(xì)胞率降低，部分患者白細(xì)胞總數(shù)增高。一般情況，接診醫(yī)院會(huì)做出胃腸道細(xì)菌型感染診斷，但檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室不應(yīng)輕易排除對(duì)病毒的采樣、檢測(cè)。

3.2此次事件共采集了40個(gè)樣本，包括肛拭、糞便、食品、調(diào)味品、環(huán)境涂抹樣、水樣等不同的樣本類型，樣本容器包括病毒采樣管、1% NaCl肉湯采樣管、滅菌鹽水采樣管和Mac、HE、TCBS致病菌直劃平板。科學(xué)、適度、合理的采集樣本可提高病原微生物的檢出率。

3.3諾如病毒的檢測(cè)目前主要采用RT-PCR 技術(shù)，國(guó)內(nèi)食品類檢測(cè)研究?jī)H限于牡蠣等貝類樣本， 尚未見(jiàn)蔬菜、水果等其他食品的病毒檢測(cè)方法報(bào)道。另外，食品樣本一般體積大，病毒含量少，樣本處理、病毒富集是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的關(guān)鍵點(diǎn)，也是難點(diǎn)。一般采用有機(jī)絮凝沉淀法進(jìn)行富集[3]。但無(wú)論是PEG沉淀法，還是Trizol抽提法，過(guò)程都比較繁瑣、用時(shí)長(zhǎng)，加之多數(shù)基層疾控中心現(xiàn)階段并未配備相關(guān)設(shè)備和耗材，因此無(wú)法進(jìn)行病毒富集。在此次檢測(cè)中，我們根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷病毒含量可能比較大，所以采用均質(zhì)后靜置，取上清液直接進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示多個(gè)樣本諾如病毒陽(yáng)性。這表明在樣本數(shù)量足夠、污染病毒量大且成分單一的情況下，本方法對(duì)于突發(fā)公共衛(wèi)生事件的快速檢測(cè)有一定的可行性。

3.4 與常規(guī)培養(yǎng)方法相比，PCR技術(shù)用于病原微生物檢測(cè)具有靈敏、快速、檢出率高等優(yōu)勢(shì)。目前，該技術(shù)的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。此次采用PCR法檢出以諾如病毒為代表的腸道致瀉病毒，為聚集性胃腸炎的病因診斷提供了有力證據(jù)。

3.5對(duì)于基層疾控中心來(lái)說(shuō)，病原微生物的富集、檢測(cè)等基礎(chǔ)設(shè)備設(shè)施的匱乏給檢測(cè)帶來(lái)了一定的難度，特別是中西部地區(qū)的基層疾控中心應(yīng)加強(qiáng)檢測(cè)能力的建設(shè)。

參考文獻(xiàn)：

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第2篇：病毒樣本范文

關(guān)鍵詞：假病毒中和法；間接酶聯(lián)免疫吸附法；HPV疫苗免疫原性

據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)方面文獻(xiàn)報(bào)道，高危性人瘤病毒（HPV），臨床發(fā)生感染極其容易引起患者發(fā)生宮頸癌疾病；對(duì)此可以應(yīng)用HPV預(yù)防性疫苗，在臨床預(yù)防HPV感染方面發(fā)揮一定影響[1]。本研究分析了臨床間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測(cè)HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料 針對(duì)在醫(yī)院2013年4月～2014年1月收治100例HPV感染患者，以及接受HPV16/18型雙價(jià)疫苗（Cervarix）免疫后的100例自然感染患者，將其作為本次研究對(duì)象，抽取患者的血清，在對(duì)樣本進(jìn)行隨機(jī)編號(hào)后，比較間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測(cè)血清樣本中HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性。

1.2方法 間接酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)中，可以將HPV 16 VLP與HPV18 VLP，將其分別稀釋為2.7 ug/ml，然后，可以對(duì)于每孔的100 μl包被，將其放置在4℃酶標(biāo)板上，孵育3 d，然后可以用0.2%PBST進(jìn)行洗滌；在三遍之后可加入PBS，并在室溫內(nèi)封閉90 min之后，再洗滌4次；并運(yùn)用0.36N硫酸終止顯色反應(yīng)后，將其防治在96孔板中，進(jìn)行讀數(shù)，并設(shè)定其波長(zhǎng)參數(shù)450 nm，參比波長(zhǎng)為620 nm?？梢杂肧oftMax Pro 5.2版本軟件，擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，被計(jì)算出標(biāo)本血清抗體的滴度。

假病毒中和法檢測(cè)中，可以將1.5×104個(gè)/孔人293FT細(xì)胞，接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，然后放置在37℃的恒溫環(huán)境之中，并培養(yǎng)8 h后，將血清進(jìn)行10%DMEM稀釋，并同時(shí)能夠在96孔板對(duì)倍稀釋8個(gè)不同梯度的稀釋液，取60 μl的稀釋血清樣本，稀釋到MOI=0.2范圍，然后可以在4℃環(huán)境內(nèi)進(jìn)行孵育1 h，并去除100 μl血清與假病毒的混和液，加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板之中，在熒光顯微鏡下進(jìn)行結(jié)果觀察，分析檢測(cè)結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 對(duì)于本次研究結(jié)果處理，可以采用統(tǒng)計(jì)學(xué)SSPS 20.0版本軟件，采用Pearman相關(guān)性分析ELISA法和PBNS法測(cè)定的抗體值，且以結(jié)果P

2結(jié)果

采用Pearman相關(guān)性分析，對(duì)臨床間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法測(cè)量的血清滴度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，見(jiàn)圖1。

臨床中，在間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測(cè)血清的樣本之中，其中對(duì)于自然感染的HPV病毒血清樣本，其中的HPV16型抗體滴度相關(guān)系數(shù)為0.519，HPV18型相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.613，在接種疫苗后的血清樣本檢測(cè)之中，HPV16型的抗體滴度相關(guān)系數(shù)0.671，HPV18型為0.879其，兩組檢測(cè)方法在進(jìn)行HPV疫苗免疫原性檢測(cè)中具有相關(guān)性（P

3 討論

相關(guān)研究中指出，基于HPV疫苗，不僅是一種具有誘導(dǎo)型與特異性的中和抗體，同時(shí)，在臨床中也可以有效的保護(hù)機(jī)體免疫力，使機(jī)體免受到病毒的侵害[3]。采取間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，檢測(cè)同一批樣本，比較分析檢測(cè)結(jié)果，可以為疫苗免疫原性評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)[4]。在檢測(cè)血清樣本中抗HPV疫苗免疫原性方面，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，為進(jìn)一步臨床評(píng)價(jià)HPV疫苗免疫效果提供參考。間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法在檢測(cè)HPV疫苗原性方面，有相關(guān)性（P

本研究結(jié)果充分證實(shí)，針對(duì)HPV感染中，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，在檢測(cè)HPV疫苗免疫原性方面具有相關(guān)性，可見(jiàn)采取HPV疫苗預(yù)防可發(fā)揮重要作用。

參考文獻(xiàn)：

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第3篇：病毒樣本范文

關(guān)鍵詞：酶聯(lián)免疫法；丙型肝炎病毒抗體；測(cè)量不確定度；方式

測(cè)量不確定度是表征合理的賦予被測(cè)量之值的分散性，與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。目前篩查丙型肝炎病毒抗體的最主要方法是酶聯(lián)免疫法，對(duì)酶聯(lián)免疫法檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體結(jié)果的不確定度需要建立評(píng)定程序，并在此之前需要分析和量化典型例子的不確定度，并進(jìn)行完整的評(píng)估，可以降低檢測(cè)結(jié)果中出現(xiàn)較多的假陰性合假陽(yáng)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)選取2011年～2015年在我院就診的80例患者作為研究的對(duì)象，其中男性患者46例，女性患者34例，年齡在22～75歲。其中有40例患者患者有丙型肝炎病毒抗體，有15例可疑患者（S/CO0.86～1.01），有25例陰性患者（S/CO

1.2試劑 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供，微粒子酶免疫法丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒和定標(biāo)液由美國(guó)雅培公司提供的AxsymTM System免疫分析儀的配套試劑。

1.3儀器 DRW-320自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)，ZW-A微量振蕩器由江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠提供。KHB ST-360自動(dòng)多功能酶標(biāo)分析儀由上?？迫A生物工程股份有限公司提供AxsymTM System免疫分析儀由美國(guó)雅培公司提供。

1.4方法 檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體要按照酶聯(lián)免疫法標(biāo)準(zhǔn)化程序操作，把空白孔調(diào)零后，分別在450nm和630nm的雙波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值，最后將檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行打印。

2 結(jié)果

2.1 1號(hào)樣本檢測(cè)結(jié)果有62.3%的可能性為陰性，有37.7%的可能性為假陽(yáng)性，而3號(hào)樣本有85.6%的可能性為陽(yáng)性，有14.4%的可能性為假陰性。

2.2被測(cè)量的數(shù)學(xué)模型 用CA表示結(jié)論判定，用CO表示臨界限值，確定CA=S/CO式，cut off值=NCX+0.2。用OD表示吸光度，用NC表示為陰性質(zhì)控對(duì)照OD值，用NC1表示陰性質(zhì)控對(duì)照平均OD值，0.2為修正系數(shù)。

2.3結(jié)果判定 陰性質(zhì)控對(duì)照OD值≤0.02，用0.02計(jì)算，0.02

2.4不確定度來(lái)源 不確定度可以將待測(cè)樣本的OD值和CO植作為主要來(lái)源。

3 討論

丙型肝炎病毒最作為常見(jiàn)的血源性傳播疾病的病原體，一般患者容易轉(zhuǎn)為慢性肝炎。每個(gè)分量不確定度的相對(duì)貢獻(xiàn)率的得出主要是每個(gè)分量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度與檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)不確定度的比率，從這個(gè)式子中可以得出檢測(cè)結(jié)果的不確定度的貢獻(xiàn)與陰性質(zhì)控對(duì)照與待測(cè)樣本不確定度有很大的關(guān)系，也是在檢測(cè)中不能夠被疏忽的。

丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)結(jié)果顯示：當(dāng)NC1分別為0.018/0.016和0.019時(shí)，用0.002計(jì)算，所以NCX1=NC1i=0.02，Sncl=0，CO1=0.18，S1=0.079，可以把重復(fù)性影響忽略掉。當(dāng)P=94.60%時(shí)，將擴(kuò)展因子K取值為2.0，那么U=2U（CA），所以按照式子U1=2×u（CA1），計(jì)算結(jié)果為2×0.0256347=0.047865，按照U2=2×u（CA2）的式子，計(jì)算結(jié)果為2×0.046 523=0.132782，U3的計(jì)算結(jié)果為2×0.43256=0.94582，U4的計(jì)算結(jié)果為2×0.056387=0.145879，U5=的計(jì)算結(jié)果為2×0.0235647=0.0467894，因此這5組丙型肝炎病毒抗體樣本的檢查可信區(qū)間在94.6%，1號(hào)樣本S/CO比值的波動(dòng)范圍在0.87564～1.04678之間，因此CAR1（CA1range）=CA1±U1=0.9462357±0.087596。2號(hào)樣本的波動(dòng)范圍在9.45781～11.54786之間，因此CAR1（CA1range）=CA1±U1=10.25746±1.04765.3號(hào)樣本的波動(dòng)范圍在0.957864～1.97854之間，CAR1（CA1range）=CA1±U1=1.07895±0.107854.4號(hào)樣本的波動(dòng)范圍在1.56724～1.87549之間，CAR1（CA1range）=CA1±U1=1.74576±0.17423.5號(hào)樣本的波動(dòng)范圍在0.45741～0.54763之間，CAR1（CA1range）=CA1±U1=0.45271±0.043571.如果CA的值等于或者超過(guò)1，那么檢測(cè)結(jié)果就判定為陽(yáng)性反應(yīng)，如果CA的值比1小，那么堅(jiān)持而結(jié)果就判定為陰性反應(yīng)。美國(guó)疾病控制中心曾經(jīng)提出丙型肝炎病毒抗體3.0酶聯(lián)免疫法試劑95%陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為S/CO≥3.8，丙型肝炎病毒抗體為陽(yáng)性需要多次重復(fù)檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果S/CO>3.8。較高的假陽(yáng)性率出現(xiàn)時(shí)S/CO

丙型肝炎病毒抗體使用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的結(jié)果的不確定度分量和相對(duì)貢獻(xiàn)率的評(píng)估。在對(duì)本次的80例患者進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，通過(guò)檢測(cè)結(jié)果可以看出COi對(duì)加成呢結(jié)果的不確定度的分量在0.00122±0.000590，相對(duì)貢獻(xiàn)率為（3.1025±2.6787）%。酶標(biāo)儀準(zhǔn)確性（Ri）檢測(cè)出的結(jié)果不確定度分量在（0.005574±0.007958），相對(duì)貢獻(xiàn)率為（4.2657±0.689）%。

綜上所述，測(cè)定丙型肝炎病毒抗體使用酶聯(lián)免疫法的不確定度以及相對(duì)貢獻(xiàn)率是影響該方法過(guò)程能力分析和控制的重要質(zhì)量因素的影響依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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第4篇：病毒樣本范文

【關(guān)鍵詞】 熒光定量PCR；弱反應(yīng)性；HBsAg

乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）是乙型肝炎病毒感染的重要證據(jù)和主要標(biāo)志之一， 同時(shí)也是采供血機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室必檢的項(xiàng)目之一。目前ELISA法是HBsAg的常規(guī)檢測(cè)方法， 具有快速、簡(jiǎn)便及較高的靈敏度， 因而適于無(wú)償獻(xiàn)血人群的大規(guī)模篩查， 但因其方法學(xué)本身的局限性， 對(duì)于部分低水平乙肝感染者不能做到有效的檢出， 給臨床輸血安全帶來(lái)很大的隱患[1]。近年來(lái)， 作者采用FQ-PCR法對(duì)ELISA檢測(cè)HBsAg為弱反應(yīng)性樣本進(jìn)行檢測(cè)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2012年1月～10月本站無(wú)償獻(xiàn)血樣本37400份， 分別用上?？迫A和珠海麗珠兩種試劑盒ELISA法檢測(cè)血清中HBsAg， 以CUT OFF（CO）值作為陰、陽(yáng)性結(jié)果判定的分界， 選擇兩檢測(cè)試劑吸光度A值均介于（0.7～0.99）CO的弱反應(yīng)性樣本120例和吸光度A值

1. 2 檢測(cè)方法 FQ-PCR檢測(cè)試劑由中山達(dá)安基因股份有限公司提供， 對(duì)上?？迫A和珠海麗珠兩種ELISA法檢測(cè)為陰性及弱反應(yīng)性樣本， 采用FQ-PCR定量檢測(cè)， FQ-PCR最低檢測(cè)下限為500 copy/ml。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料率的比較用χ2檢驗(yàn)， 計(jì)量資料比較用t檢驗(yàn)， 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理， 檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2. 1 FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果 100例ELISA吸光度A值

表1 陰性及弱反應(yīng)性樣本FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果

ELISA法A值 FQ-PCR χ2 P

陽(yáng)性數(shù)（%） copy

（0.7～0.99）CO 5（4.17） 4.7×104

2. 2 兩種ELISA試劑盒靈敏度比較 用正常陰性血清對(duì)1IU/ml的質(zhì)控血清作倍比稀釋， 分別用上?？迫A和珠海麗珠兩種試劑盒對(duì)稀釋樣本和原液檢測(cè)10次， 兩種試劑盒相同稀釋倍數(shù)測(cè)定結(jié)果比較差異無(wú)顯著性， 見(jiàn)表2。

表2 兩種ELISA試劑盒靈敏度測(cè)定（ x-±s）

稀釋倍數(shù) 濃度（IU/ml） 上?？迫A 珠海麗珠

原液 1 0.245±0.031 0.236±0.025

1：2 0.5 0.114±0.032 0.121±0.028

1：4 0.25 0.053±0.014 0.062±0.017

3 討論

乙肝是乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的一種常見(jiàn)的傳染性疾病， 流行病學(xué)調(diào)查顯示， 我國(guó)HBV攜帶者約占人口總數(shù)的10%， HBsAg是目前判斷HBV感染最直接的病原標(biāo)志， 對(duì)患者的早期診斷和治療具有重要的意義。ELISA法檢測(cè)HBsAg因具有簡(jiǎn)便、快速及較高的靈敏度， 在采供血系統(tǒng)和臨床患者的診斷中得到廣泛應(yīng)用。近年來(lái)隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷提高， ELISA法檢測(cè)HBsAg的靈敏度也得到很大的提升， 但因其方法學(xué)限制， 臨床常出現(xiàn)一些檢測(cè)呈弱反應(yīng)狀態(tài)、檢測(cè)結(jié)果位于臨界值附近而無(wú)法對(duì)被檢標(biāo)本做出確切的陰、陽(yáng)性判定。目前對(duì)于ELISA法檢測(cè)HBsAg結(jié)果呈弱反應(yīng)性的判斷尚無(wú)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)， 不同血站往往根據(jù)自己的實(shí)際情況設(shè)定“灰區(qū)”的范圍， 但“灰區(qū)”范圍設(shè)置過(guò)寬， 常造成血液資源的不必要浪費(fèi)， 并且血站對(duì)于這部分獻(xiàn)血人員的檢測(cè)結(jié)果也不能給出確切的答復(fù)。

FQ-PCR是一種完全不同于ELISA的檢查方法， 其具有較高的靈敏度， 可檢測(cè)體內(nèi)較低水平HBV感染， 且可對(duì)HBV病毒突變株進(jìn)行檢測(cè)， FQ-PCR通過(guò)直接檢測(cè)血清中乙型肝炎病毒核酸的病毒載量， 檢測(cè)結(jié)果可反映病毒復(fù)制水平和傳染性的強(qiáng)弱[2]。本文結(jié)果顯示， 120例ELISA檢測(cè)為弱反應(yīng)性的樣本經(jīng)FQ-PCR檢測(cè)后， 5例血清檢出HBV病毒DNA， 表明ELISA法對(duì)于一些弱反應(yīng)性的樣本可造成一定的漏檢。理論上FQ-PCR可檢測(cè)出1個(gè)copy的乙肝病毒DNA， 但檢測(cè)結(jié)果由于易受儀器、試劑、核酸提取的方法、標(biāo)本因素、實(shí)驗(yàn)室條件等因素的影響[3]， 目前國(guó)內(nèi)FQ-PCR試劑盒的檢測(cè)下限通常為500copy/ml。ELISA法檢測(cè)HBsAg的基本原理為抗原、抗體特異性反應(yīng)， 檢測(cè)過(guò)程易受一些因素的影響而造成結(jié)果的假陽(yáng)性， 如感染“窗口期”、恢復(fù)期或自限性感染末期的攜帶者及注射乙肝疫苗后等， 均可造成檢測(cè)結(jié)果的弱反應(yīng)性。

綜上所述， 為確保臨床輸血安全， 避免血液資源的浪費(fèi)， 對(duì)初、復(fù)檢結(jié)果為弱反應(yīng)的樣本選擇靈敏度更高的FQ-PCR法檢測(cè)是有必要的。

參考文獻(xiàn)

[1] 徐新蓉，龔國(guó)富，馬萍. ELISA檢測(cè)過(guò)程中影響因素及防空措施分析.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2013，34（10）：112-113.

第5篇：病毒樣本范文

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇我院2013年6月～2015年1月收治的乙型肝炎患者80例作為本次研究研究樣本，均符合《慢性乙型肝炎防治指南》[2]制定的關(guān)于乙型肝炎的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男性樣本49例，女性樣本31例，平均年齡在（43±8.6）歲，平均病程為（3.5±3.8）年。入院后對(duì)研究樣本進(jìn)行臨床治療，包括應(yīng)用抗病毒藥物、干擾素及免疫調(diào)節(jié)類藥物等。

1.2護(hù)理方法 對(duì)照組樣本均進(jìn)行常規(guī)臨床護(hù)理，即每日定時(shí)進(jìn)行病房清潔、常規(guī)監(jiān)測(cè)患者病情、指導(dǎo)患者每日用藥等。觀察組樣本則采取人性化護(hù)理模式行臨床護(hù)理。具體護(hù)理內(nèi)容包括心理護(hù)理、飲食指導(dǎo)、健康教育及用藥指導(dǎo)等，護(hù)理人員進(jìn)行護(hù)理工作時(shí)要求貫徹人性化理念，細(xì)心、體貼的為患者提供護(hù)理。因乙型肝炎為傳染性疾病，多數(shù)患者存在被他人歧視及其他負(fù)面心理，溝通過(guò)程中對(duì)患者主觀心理感受給予相應(yīng)的認(rèn)可并正確疏導(dǎo)。乙型肝炎的患病時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)肝臟損害則會(huì)越發(fā)嚴(yán)重，合理調(diào)節(jié)患者的日常飲食結(jié)構(gòu)，可降低食物對(duì)肝臟產(chǎn)生的損傷，囑患者每日食用清淡飲食，多吃優(yōu)質(zhì)蛋白，少吃含高脂肪的食物，并且忌辛辣、酒及其他刺激性食物，每日多吃新鮮水果補(bǔ)充維生素。對(duì)以上患者根據(jù)其文化程度、理解能力等進(jìn)行不同個(gè)性化健康教育。對(duì)每個(gè)患者還需進(jìn)行個(gè)性化用藥指導(dǎo)，對(duì)每位患者所服藥物由責(zé)任護(hù)士分別保管，其保管條件要求按照說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，要求患者不可采用飲料及濃茶、牛奶等送服藥物，對(duì)患者應(yīng)用藥物需定時(shí)定量，不能未經(jīng)臨床醫(yī)師許可隨意加量或減量用藥。

1.3觀察指標(biāo) 兩組研究樣本護(hù)理效果評(píng)價(jià)采用抑郁自評(píng)量表、焦慮自評(píng)量表及肝臟功能檢測(cè)結(jié)果及護(hù)理滿意度進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[3]，其中抑郁自評(píng)量表中評(píng)分>53分評(píng)價(jià)患者為抑郁，焦慮自評(píng)量表中評(píng)分>50分為抑郁，臨床護(hù)理效果評(píng)價(jià)根據(jù)肝功能中血清丙氨酸轉(zhuǎn)移酶及天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平進(jìn)行評(píng)價(jià)。顯效：樣本經(jīng)臨床護(hù)理后丙氨酸轉(zhuǎn)移酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平均顯著恢復(fù)正常；有效：樣本經(jīng)臨床護(hù)理后丙氨酸轉(zhuǎn)移酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平雖有所下降，但未恢復(fù)至正常水平；無(wú)效：樣本臨床護(hù)理后丙氨酸轉(zhuǎn)移酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平并無(wú)下降。除此之外，還需要對(duì)患者進(jìn)行護(hù)理滿意度評(píng)價(jià)，具體以打分的形式進(jìn)行評(píng)價(jià)，滿分為10分，患者評(píng)分>8分為非常滿意，評(píng)分在5～7分為一般滿意，評(píng)分

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理上述樣本臨床資料和研究結(jié)果，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行表示，研究結(jié)果以P

2 結(jié)果

經(jīng)臨床護(hù)理后發(fā)現(xiàn)，研究組共40例樣本中，抑郁自評(píng)量表評(píng)分平均為（38.4±11.6）分，焦慮自評(píng)量表評(píng)分平均為（36.8±9.7）分，其中護(hù)理顯效樣本16例，護(hù)理有效樣本21例，護(hù)理無(wú)效樣本3例，患者滿意度評(píng)分中，對(duì)臨床護(hù)理非常滿意樣本19例，對(duì)臨床護(hù)理較為滿意患者14例，對(duì)臨床護(hù)理工作不滿意僅有7例；相比較對(duì)照組共40例樣本中，抑郁自評(píng)量表評(píng)分平均為（53.3±9.6）分，焦慮自評(píng)量表評(píng)分平均為（50.4±11.2）分，其中護(hù)理顯效樣本19例，護(hù)理有效樣本12例，護(hù)理無(wú)效樣本9例，患者滿意度評(píng)分中，對(duì)臨床護(hù)理非常滿意樣本13例，對(duì)臨床護(hù)理較為滿意患者15例，對(duì)臨床護(hù)理工作不滿意有12例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理得到組間樣本研究結(jié)果有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P

3 討論

第6篇：病毒樣本范文

【關(guān)鍵詞】病毒；檢測(cè)；方法

在與病毒的對(duì)抗中，及早發(fā)現(xiàn)病毒最重要，及時(shí)處理可以減少損失。檢測(cè)病毒方法有：特征代碼法、校驗(yàn)和法、行為監(jiān)測(cè)法、軟件模擬法。這些方法依據(jù)的原理不同，實(shí)現(xiàn)時(shí)所需開(kāi)銷(xiāo)不同，檢測(cè)范圍不同，各有所長(zhǎng)。

一、特征代碼法

特征代碼法早期被應(yīng)用于SCAN、（PAV等著名病毒檢測(cè)工具中。大部分專家認(rèn)為特征代碼法是檢測(cè)已知病毒的最簡(jiǎn)單、開(kāi)銷(xiāo)最小的方法。特征代碼法的實(shí)現(xiàn)步驟：采集己知病毒樣本，病毒如果既感染COM文件，又感染EXE文件，對(duì)這種病毒要同時(shí)采集COM型病毒樣本和EXE型病毒樣本。

在病毒樣本中，抽取特征代碼。依據(jù)如下原則：抽取的代碼比較特殊，不大可能與普通程序代碼吻合。抽取的代碼要有適當(dāng)長(zhǎng)度，一方面維持特征代碼的唯一性，另一方面又不要有太大的空間與時(shí)間的開(kāi)銷(xiāo)。如果每一種病毒的特征代碼增長(zhǎng)一字節(jié)，要檢測(cè)3000種病毒，增加的空間就是3000字節(jié)。在保持唯一性的前提下，盡量使特征代碼長(zhǎng)度短些，以減少空間與時(shí)間開(kāi)銷(xiāo)。在既感染COM文件又感染EXE文件的病毒樣本中，要抽取兩種樣本共有的代碼。將特征代仍納入病毒數(shù)據(jù)庫(kù)。

采用病毒特征代碼法的檢測(cè)工具，面對(duì)不斷出現(xiàn)的新病毒，必須不斷更新版本，否則檢測(cè)工具便會(huì)老化，逐漸失去實(shí)用價(jià)值。病毒特征代碼法對(duì)從未見(jiàn)過(guò)的新病毒，自然無(wú)法知道其特征代碼，因而無(wú)法去檢測(cè)這些新病毒。

特征代碼法的優(yōu)點(diǎn)是：檢測(cè)準(zhǔn)確快速、可識(shí)別病毒的名稱、誤報(bào)警率低、依據(jù)檢測(cè)結(jié)果，可做解毒處理。其缺點(diǎn)是：不能檢測(cè)未知病毒、搜集已知病毒的特征代碼、費(fèi)用開(kāi)銷(xiāo)大、在網(wǎng)絡(luò)上效率低（在網(wǎng)絡(luò)服務(wù)器上，因長(zhǎng)時(shí)間檢索會(huì)使整個(gè)網(wǎng)絡(luò)性能大大降低）。

其特點(diǎn)：速度慢。隨著病毒種類的增多，檢索時(shí)間變氏。如果檢索5000種病毒，必須對(duì)5000個(gè)病毒特征代碼逐一檢喪。如果病毒種數(shù)再增加，治病毒的時(shí)間開(kāi)銷(xiāo)就變得十分可觀。此類工具檢測(cè)的高速性，將變得日益困難；誤報(bào)警率低；不能檢查多態(tài)性病毒。特征代碼法是小可能檢測(cè)多態(tài)性病毒的；不能對(duì)付隱蔽性病毒。隱蔽性病毒如果先進(jìn)駐內(nèi)存，后運(yùn)行病毒檢測(cè)工具，隱蔽性病毒能光于檢測(cè)工具，將被查文件中的病毒代碼剝?nèi)?，槍測(cè)工具的確是在檢查一個(gè)虛假的“好文件”，而不能報(bào)警，被隱蔽性病毒所蒙騙。

二、校驗(yàn)和法

將正常文件的內(nèi)容，計(jì)算其校驗(yàn)和，將該校驗(yàn)和寫(xiě)入文件中或?qū)懭雱e的文件中保存。在文件使用過(guò)程中，定期地或每次使用文件前，檢查文件現(xiàn)在內(nèi)容算出的校驗(yàn)和與原來(lái)保存的校驗(yàn)和是否一致，因而可以發(fā)現(xiàn)文件是否感染，這種方法叫校驗(yàn)和法，它既可發(fā)現(xiàn)已知病毒又可發(fā)現(xiàn)未知病毒。在SCAN和CPAV工具的后期版本中除了病毒特征代碼法之外，還納入校驗(yàn)和法，以提高其檢測(cè)能力。

這種方法既能發(fā)現(xiàn)已知病毒，也能發(fā)現(xiàn)未知病毒，但是，它不能識(shí)別病毒類，不能報(bào)出病毒名稱。由于病毒感染并非文件內(nèi)容改變的唯一的非他性原因，文件內(nèi)容的改變有可能是正常程序引起的，所以校驗(yàn)和法常常誤報(bào)警。而且此種方法也會(huì)影響文件的運(yùn)行速度。

病毒感染的確會(huì)引起文件內(nèi)容變化，但是校驗(yàn)和法對(duì)文件內(nèi)容的變化太敏感，又不能區(qū)分正常程序引起的變動(dòng)，而頻繁報(bào)警。用監(jiān)視文件的校驗(yàn)和來(lái)檢測(cè)病毒，不是最好的方法。

這種方法遇到下述情況：已有軟件版更新、變更口令、修改運(yùn)行參數(shù)放驗(yàn)和法都會(huì)誤報(bào)管。校驗(yàn)和法對(duì)隱蔽性病毒無(wú)效。隱蔽性病毒進(jìn)駐內(nèi)存后，會(huì)自動(dòng)剝?nèi)ト径境绦蛑械牟《敬a，使校驗(yàn)和法受騙，對(duì)一個(gè)有毒文件算出正常校驗(yàn)和。

運(yùn)用校驗(yàn)和法查病毒采用3種方式：

1.在檢測(cè)病毒工具中納入校驗(yàn)和法，對(duì)被查的對(duì)象文件計(jì)算其正常狀態(tài)的校驗(yàn)和，將校驗(yàn)和值寫(xiě)入被查文件中或檢測(cè)工具中，而后進(jìn)行比較。

2.在應(yīng)用程序中，放人校驗(yàn)和法自我檢查功能，將文件正常狀態(tài)的校驗(yàn)和寫(xiě)入文件本身中，每當(dāng)應(yīng)用程序啟動(dòng)時(shí)，比較現(xiàn)行校驗(yàn)和與原校驗(yàn)和值。實(shí)現(xiàn)應(yīng)用程序的自檢測(cè)。

3.將校驗(yàn)和檢查程序常駐內(nèi)存，每當(dāng)應(yīng)用程序開(kāi)始運(yùn)行時(shí)，自動(dòng)比較檢查應(yīng)用程序內(nèi)部或別的文件中預(yù)先保存的校驗(yàn)和。

校驗(yàn)和法的優(yōu)點(diǎn)是：方法簡(jiǎn)單能發(fā)現(xiàn)未知病毒、被查文件的細(xì)微變化也能發(fā)現(xiàn)。其缺點(diǎn)是：發(fā)朽通行記錄正常態(tài)的校驗(yàn)和、會(huì)誤報(bào)警、不能識(shí)別病毒名稱、不能對(duì)付隱蔽型病毒。

三、行為監(jiān)測(cè)法

利用病毒的持有行為特征性來(lái)監(jiān)測(cè)病毒的方法，稱為行為監(jiān)測(cè)法。通過(guò)對(duì)病毒多年的觀察、研究，有一些行為是病毒的共同行為，而且比較特殊。在正常程序中，這些行為比較罕見(jiàn)。當(dāng)程序運(yùn)行時(shí)，監(jiān)視其行為，如果發(fā)現(xiàn)了病毒行為，立即報(bào)警。

行為監(jiān)測(cè)法的長(zhǎng)處：可發(fā)現(xiàn)未知病毒、可相當(dāng)準(zhǔn)確地預(yù)報(bào)未知的多數(shù)病毒。行為監(jiān)測(cè)法的短處；可能誤報(bào)密、不能識(shí)別病毒名稱、實(shí)現(xiàn)時(shí)有一定難度。

四、軟件模擬法

多態(tài)性病毒每次感染都變化其病毒密碼，對(duì)付這種病毒，特征代碼法失效。因?yàn)槎鄳B(tài)性病毒代碼實(shí)施密碼化，而且每次所用密鑰不同，把染毒的病毒代碼相互比較，也無(wú)法找出相同的可能作為特征的穩(wěn)定代碼。雖然行為檢測(cè)法可以檢測(cè)多態(tài)性病毒，但是在檢測(cè)出病毒后，因?yàn)椴恢《镜姆N類，難于做消毒處理。

五、計(jì)算機(jī)病毒的防治策略

計(jì)算機(jī)病毒的防治要從防毒、查毒、解毒3方面來(lái)進(jìn)行；系統(tǒng)對(duì)于計(jì)算機(jī)病毒的實(shí)際防治能力和效果也要從防毒能力、查毒能力和解毒能力3方面來(lái)評(píng)判。

“防毒”是指根據(jù)系統(tǒng)特性，采取相應(yīng)的系統(tǒng)安全措施預(yù)防病毒侵人計(jì)算機(jī)?！安槎尽笔侵笇?duì)于確定的環(huán)境，能夠準(zhǔn)確地報(bào)出病毒名稱，該環(huán)境包括，內(nèi)存、文件、引導(dǎo)區(qū)（含主引導(dǎo)區(qū)）、網(wǎng)絡(luò)等?！敖舛尽笔侵父鶕?jù)不同類型病毒對(duì)感染對(duì)象的修改，并按照病毒的感染特性所進(jìn)行的恢復(fù)。該恢復(fù)過(guò)程不能破壞未被病毒修改的內(nèi)容。感染對(duì)象包括；內(nèi)存、引導(dǎo)區(qū)（含主引導(dǎo)區(qū)）、可執(zhí)行文件、文檔文件、網(wǎng)絡(luò)等。

查毒能力是指發(fā)現(xiàn)和追蹤病毒來(lái)源的能力。通過(guò)查毒應(yīng)該能準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)是否感染有病毒，并正確查找出病毒的來(lái)源，并能給出統(tǒng)計(jì)報(bào)告；查解病毒的能力應(yīng)由查毒率和誤報(bào)率來(lái)評(píng)判。

解毒能力是指從感染對(duì)象中清除病毒，恢復(fù)被病毒感染前的原始信息的能力；解毒能力應(yīng)用解毒率來(lái)評(píng)判。

第7篇：病毒樣本范文

【關(guān)鍵詞】生殖器皰疹；PCR檢測(cè)；ELISA檢測(cè)

【Abstract】Objectives： To compare the detection effect of polymerase chain reaction and enzyme immunoassay on herpes simplex virus infection. Methods： A total of 140 patients were selected in this study. Polymerase chain reaction （PCR） and enzyme immunoassay （ELISA） were used to detect herpes simplex virus respectively. Another PCR method was applied when the results were different.Results： Among those 140 patients， through PCR， there were 57 positive cases， 6 cases of HSV-1 infection， 46 cases of HSV-2 Infection and 7 cases of mixed infection detected. Through ELISA， there were 59 positive cases. Among 140 cases， 17 cases showed no coherent results. In comparison with PCR detection， the sensitivities， specificities and positive predictive values of ELISA were 96.3%， 98.8%， and 89.8%， PCR were 97.1%， 92.8% and 95.6% respectively. Conclusion： It is indicated that ELISA is simple， rapid， high sensitive and specific for the diagnosis of genital herpes； the method is suitable for the testing of large batches of clinical specimens， which is recommended for clinical application.

【Key words】Genital herpes； Polymerase chain reaction （PCR） detection； Enzyme immunoassay （ELISA） detection

【中圖分類號(hào)】R752.1【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

生殖器皰疹（genital herpes，GH）是臨床上最為常見(jiàn)的性傳播疾病之一，感染患者不僅生理健康受到嚴(yán)重威脅，還會(huì)顯著影響患者生存質(zhì)量[1，2]。精確的診斷是治療生殖器皰疹的基礎(chǔ)，然而目前臨床上多以臨床經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行診斷，錯(cuò)誤率較高且敏感度較低[3，4]。PCR和ELISA是兩種常用的病毒感染臨床檢驗(yàn)方法，分別檢測(cè)病原的DNA和蛋白質(zhì)[5，6]。然而，兩種方法應(yīng)用于生殖器皰疹病毒的檢測(cè)效果卻少有比較。

1材料與方法

1.1病人

選取門(mén)診收治的疑似生殖器皰疹病毒感染患者140例，入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡15～70歲；（2）生殖器部位皮膚或黏膜損傷；（3）近2周內(nèi)未服用抗病毒藥物或抗生素，損害局部未用藥?；颊咧橥夂?，取局部滲出液或水泡液送檢，分別進(jìn)行PCR和ELISA檢測(cè)。

1.2檢測(cè)

PCR檢測(cè)采用單純皰疹病毒Ⅰ和Ⅱ型核酸分型檢測(cè)試劑盒（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司，批號(hào)H20131025）及HSV核酸擴(kuò)增試劑盒（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司，批號(hào)H20140219），先使用分型檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，若檢測(cè)結(jié)果與ELISA檢測(cè)不相同則使用HSV核酸擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行第二次檢測(cè)。ELISA檢測(cè)采用單純皰疹病毒抗原酶聯(lián)免疫試劑盒（丹麥DAKO公司，批號(hào)K20140513）。檢測(cè)步驟均嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 19.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用率表示，計(jì)算ELISA和PCR法測(cè)定的敏感性、特異性、陰性及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值。

2結(jié)果

2.1檢測(cè)情況

入選樣本140例，其中男性97例，女性43例。年齡17～69歲，平均（37.9±7.2）歲。PCR檢測(cè)出陽(yáng)性樣本59例檢出率42.1%，單純HSV-1感染患者6例，單純HSV-2感染患者46例，混合感染患者7例。ELISA檢出陽(yáng)性樣本57例檢出率40.7%。140例樣本中，有12例結(jié)果不符，采用第二種PCR進(jìn)行檢查證實(shí)，具體結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2兩種診斷方法評(píng)價(jià)

利用兩種診斷方法進(jìn)行檢測(cè)，出現(xiàn)9例ELISA檢測(cè)陰性而PCR-HSV陽(yáng)性，經(jīng)第二次PCR后6例陰性，3例陽(yáng)性。而3例ELISA檢測(cè)陽(yáng)性而PCR-HSV陰性樣本中，經(jīng)第二次PCR后1例陰性，2例陽(yáng)性。分型PCR的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)率和陰性預(yù)測(cè)率分別為96.3%、92.8%、89.8%、94.4%。ELISA的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)率和陰性預(yù)測(cè)率分別為97.1%、98.8%、95.6%、94.0%。

3討論

性傳播疾病中生殖器皰疹病毒感染最為常見(jiàn)，且HSV感染常與HIV感染并發(fā)，有研究稱HSV感染會(huì)促進(jìn)HIV的傳播[7]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)的生殖器皰疹發(fā)病率為萬(wàn)分之一至萬(wàn)分之五[8-10]。目前，對(duì)于生殖器皰疹的診斷主要依據(jù)患者的臨床癥狀進(jìn)行判斷，但是部分患者臨床癥狀不典型或合并了其他疾病如梅毒、尖銳濕疣等[11-13]，增加了檢測(cè)難度，因此依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢查增加檢測(cè)靈敏度和特異性有助于改善HSV感染患者的治療。

目前，對(duì)于HSV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的方法包括：血清抗體[14]、PCR[15]、細(xì)胞培養(yǎng)[16]和抗原檢測(cè)等[17]。細(xì)胞培養(yǎng)靈敏度和特異性最佳，但其技術(shù)要求較高，培養(yǎng)周期較長(zhǎng)不適合臨床應(yīng)用。血清抗體檢測(cè)最為方便快捷，但其靈敏度和特異性較差[18]。ELISA和PCR是兩種靈敏度、特異性較高且臨床應(yīng)用較為簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。PCR法敏感性高，在痕量組織中便可以擴(kuò)增到目的條帶，尤其是隨著酶學(xué)的進(jìn)步各種高保真擴(kuò)增酶和抗雜質(zhì)擴(kuò)增酶的出現(xiàn)使得PCR檢測(cè)法可以良好的檢測(cè)樣本。然而由于PCR反應(yīng)過(guò)于靈敏因此其容易出現(xiàn)樣本間的污染導(dǎo)致假陽(yáng)性，特異性較低。ELISA法同樣具有較高的敏感性，且特異性也具有較高的保障，但操作較PCR復(fù)雜[20]。本研究中分型PCR的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)率和陰性預(yù)測(cè)率分別為96.3%、92.8%、89.8%、94.4%，也側(cè)面證實(shí)了這一情況。ELISA法是檢測(cè)HSV的保守蛋白，由于檢測(cè)反應(yīng)不涉及擴(kuò)增操作，因此不容易出現(xiàn)樣本間的污染。本研究證實(shí)，ELISA的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)率和陰性預(yù)測(cè)率分別為97.1%、98.8%、95.6%、94.0%，與分型PCR法相比較具有更高的特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)率。然而，由于本研究中應(yīng)用的ELISA檢測(cè)試劑盒無(wú)法進(jìn)行分型檢測(cè)，因此對(duì)于需要具體鑒別HSV亞型的情況可以聯(lián)合應(yīng)用兩種檢測(cè)方法以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。

綜上所述，相比于PCR法，ELISA法具有更高的敏感度和特異性，避免了樣本間的相互污染，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

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第8篇：病毒樣本范文

【摘要】目的檢測(cè)血清標(biāo)本的乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物，了解本地區(qū)HBV的感染情況。方法用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清標(biāo)本的HBV標(biāo)志物。嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)方法檢測(cè)。結(jié)果廣州市廣東農(nóng)墾集團(tuán)公司管轄單位職工為主的9046份樣本人群中HBV感染率38.28%，HBsAg陽(yáng)性率24.93%，HBeAg陽(yáng)性率11.05%，抗-HBs陽(yáng)性率42.63%，單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性率34.15%。較高的抗-HBs陽(yáng)性率提示實(shí)施乙肝疫苗預(yù)防接種取得效果。本文對(duì)相隔約10年時(shí)間的樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，本世紀(jì)初與上世紀(jì)末比較，人群乙肝的免疫力有所增強(qiáng)，感染率下降。結(jié)論本組9046份血液樣本檢測(cè)HBV兩對(duì)半標(biāo)志物，出現(xiàn)20種反應(yīng)模式。感染期模式組以1.4.5.和1.3.5.模式代碼為主，二者合占全部樣本的1958%；恢復(fù)期模式組以2.和2.4.5.模式代碼為主，二者合占全部樣本的37.65%。若將樣本分前后期(相隔約10年)統(tǒng)計(jì)，前期感染期模式占33.66%，恢復(fù)期模式占34.69%；后期感染期模式占15.35%，恢復(fù)期模式占56.28%。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒；“兩對(duì)半”；反應(yīng)模式；酶聯(lián)免疫法

乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物的檢測(cè)，是乙型肝炎(乙肝)診斷和健康體檢的基本項(xiàng)目。HBV標(biāo)志物很多，最常檢測(cè)的項(xiàng)目有：(1)乙肝表面抗原(HBsAg)，(2)乙肝表面抗體(抗-HBs)，(3)乙肝e抗原(HBeAg)，(4)乙肝e抗體(抗-HBe)，(5)乙肝核心抗體(抗-HBc)，俗稱“兩對(duì)半”。人體感染HBV后，在不同的病期、階段和由于個(gè)體狀況的差異，血液樣本中的HBV有關(guān)標(biāo)志物可出現(xiàn)不同的組合，呈現(xiàn)多種反應(yīng)模式［1～3］。正確認(rèn)識(shí)和評(píng)價(jià)各種反應(yīng)模式，對(duì)乙肝的診斷、治療效果的評(píng)價(jià)、預(yù)后和預(yù)防的估計(jì)有重要的意義。同一人群在不同時(shí)期，檢測(cè)其反應(yīng)模式也會(huì)發(fā)生變化?，F(xiàn)將我科10年前后檢測(cè)的9046份血液樣本的HBV“兩對(duì)半”結(jié)果，分析如下。

1對(duì)象與方法

1.1檢查對(duì)象樣本來(lái)自門(mén)診、住院和健康體檢者，以廣東農(nóng)墾直屬單位職工體檢者居多，故本資料有一定的不同時(shí)期同一人群的可比性。

1.2方法HBV“兩對(duì)半”檢測(cè)用酶聯(lián)免疫法，未定量。試劑盒是上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)公司的立可讀試劑盒，檢測(cè)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。9046份血液樣本，分為兩組，一組是上世紀(jì)末90年代檢測(cè)的4139份樣本(以下簡(jiǎn)稱前期)，另一組是本世紀(jì)初檢測(cè)的4907份樣本(以下簡(jiǎn)稱后期)，相隔時(shí)間約10年。其結(jié)果：HBV“兩對(duì)半”出現(xiàn)20種反應(yīng)模式，為敘述方便，設(shè)定HBV標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目第1～5項(xiàng)的排列順序?yàn)镠BsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc，并以出現(xiàn)陽(yáng)性項(xiàng)目的序號(hào)為該模式的代碼。如：HBsAg陽(yáng)性，抗-HBs陰性，HBeAg陽(yáng)性，抗-HBe陰性，抗-HBe陰性，其代碼稱1.3.模式。對(duì)幾種少見(jiàn)的不規(guī)則反應(yīng)模式，從略不予討論。

2結(jié)果

2.19046份樣本HBV“兩對(duì)半”檢測(cè)結(jié)果有20種反應(yīng)模式，前期4139份樣本、后期4907份樣本的檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表1和表2。

表19046份血液標(biāo)本HBV標(biāo)志物模式頻率（略）

表2上世紀(jì)末(前期)4139份血液標(biāo)本與本世紀(jì)初(后期)4907份標(biāo)本HBV標(biāo)志物模式比較（略）

2.2乙肝是全球性的人類多發(fā)傳染病在我國(guó)，病毒性肝炎在傳染病中發(fā)病率列在首位，其中80%是乙肝［4］。2002年我省乙肝的發(fā)病率是37.26/10萬(wàn)［5］。從表1可以看出，本地區(qū)的HBV感染率很高，9046份樣本中，HBV標(biāo)志物一項(xiàng)陽(yáng)性的有6552份標(biāo)本，若把單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性視為是人工免疫的結(jié)果，不計(jì)該項(xiàng)，則還有3463份標(biāo)本，以此計(jì)算，HBV的感染率是38.28%。從表2看出，前期的感染率是49.33%，后期的感染率是25.68%。統(tǒng)計(jì)對(duì)比，P＜0.01，差異有非常顯著性，說(shuō)明感染率高，但近年已有所下降。

2.3人群對(duì)乙肝的免疫力已具相當(dāng)水平單獨(dú)抗-HBs陽(yáng)性者是3098份標(biāo)本，占檢測(cè)數(shù)的34.24%，這是近年來(lái)實(shí)施乙肝疫苗人工免疫的效果，對(duì)比前期和后期資料，見(jiàn)表2，抗-HBs陽(yáng)性率分別是20.15%和45.96%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理，P＜0.01，差異有非常顯著性。從絕對(duì)數(shù)量看，獲免疫力的人群增加1倍以上。世界衛(wèi)生組織(WHO)把乙肝疫苗人工免疫視為促進(jìn)健康經(jīng)濟(jì)有效方法之一，并規(guī)劃要求列入兒童免疫措施。我國(guó)在城鎮(zhèn)居民中早已實(shí)施此措施。若將人工免疫獲得的抗-HBs陽(yáng)性和自然免疫的抗-HBs陽(yáng)性人群合并統(tǒng)計(jì)，則陽(yáng)性率達(dá)34.96%，如若僅統(tǒng)計(jì)后期近年的資料，則陽(yáng)性率達(dá)56.28%，說(shuō)明在人群中對(duì)乙肝的免疫力已具較高的水平，這個(gè)水平高于國(guó)內(nèi)一些地區(qū)。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎

【摘要】目的檢測(cè)血清標(biāo)本的乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物，了解本地區(qū)HBV的感染情況。方法用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清標(biāo)本的HBV標(biāo)志物。嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)方法檢測(cè)。結(jié)果廣州市廣東農(nóng)墾集團(tuán)公司管轄單位職工為主的9046份樣本人群中HBV感染率38.28%，HBsAg陽(yáng)性率24.93%，HBeAg陽(yáng)性率11.05%，抗-HBs陽(yáng)性率42.63%，單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性率34.15%。較高的抗-HBs陽(yáng)性率提示實(shí)施乙肝疫苗預(yù)防接種取得效果。本文對(duì)相隔約10年時(shí)間的樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，本世紀(jì)初與上世紀(jì)末比較，人群乙肝的免疫力有所增強(qiáng)，感染率下降。結(jié)論本組9046份血液樣本檢測(cè)HBV兩對(duì)半標(biāo)志物，出現(xiàn)20種反應(yīng)模式。感染期模式組以1.4.5.和1.3.5.模式代碼為主，二者合占全部樣本的1958%；恢復(fù)期模式組以2.和2.4.5.模式代碼為主，二者合占全部樣本的37.65%。若將樣本分前后期(相隔約10年)統(tǒng)計(jì)，前期感染期模式占33.66%，恢復(fù)期模式占34.69%；后期感染期模式占15.35%，恢復(fù)期模式占56.28%。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒；“兩對(duì)半”；反應(yīng)模式；酶聯(lián)免疫法

乙型肝炎病毒(HBV)標(biāo)志物的檢測(cè)，是乙型肝炎(乙肝)診斷和健康體檢的基本項(xiàng)目。HBV標(biāo)志物很多，最常檢測(cè)的項(xiàng)目有：(1)乙肝表面抗原(HBsAg)，(2)乙肝表面抗體(抗-HBs)，(3)乙肝e抗原(HBeAg)，(4)乙肝e抗體(抗-HBe)，(5)乙肝核心抗體(抗-HBc)，俗稱“兩對(duì)半”。人體感染HBV后，在不同的病期、階段和由于個(gè)體狀況的差異，血液樣本中的HBV有關(guān)標(biāo)志物可出現(xiàn)不同的組合，呈現(xiàn)多種反應(yīng)模式［1～3］。正確認(rèn)識(shí)和評(píng)價(jià)各種反應(yīng)模式，對(duì)乙肝的診斷、治療效果的評(píng)價(jià)、預(yù)后和預(yù)防的估計(jì)有重要的意義。同一人群在不同時(shí)期，檢測(cè)其反應(yīng)模式也會(huì)發(fā)生變化?，F(xiàn)將我科10年前后檢測(cè)的9046份血液樣本的HBV“兩對(duì)半”結(jié)果，分析如下。

1對(duì)象與方法

1.1檢查對(duì)象樣本來(lái)自門(mén)診、住院和健康體檢者，以廣東農(nóng)墾直屬單位職工體檢者居多，故本資料有一定的不同時(shí)期同一人群的可比性。

1.2方法HBV“兩對(duì)半”檢測(cè)用酶聯(lián)免疫法，未定量。試劑盒是上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)公司的立可讀試劑盒，檢測(cè)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。9046份血液樣本，分為兩組，一組是上世紀(jì)末90年代檢測(cè)的4139份樣本(以下簡(jiǎn)稱前期)，另一組是本世紀(jì)初檢測(cè)的4907份樣本(以下簡(jiǎn)稱后期)，相隔時(shí)間約10年。其結(jié)果：HBV“兩對(duì)半”出現(xiàn)20種反應(yīng)模式，為敘述方便，設(shè)定HBV標(biāo)志物檢測(cè)項(xiàng)目第1～5項(xiàng)的排列順序?yàn)镠BsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc，并以出現(xiàn)陽(yáng)性項(xiàng)目的序號(hào)為該模式的代碼。如：HBsAg陽(yáng)性，抗-HBs陰性，HBeAg陽(yáng)性，抗-HBe陰性，抗-HBe陰性，其代碼稱1.3.模式。對(duì)幾種少見(jiàn)的不規(guī)則反應(yīng)模式，從略不予討論。

2結(jié)果

2.19046份樣本HBV“兩對(duì)半”檢測(cè)結(jié)果有20種反應(yīng)模式，前期4139份樣本、后期4907份樣本的檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表1和表2。

表19046份血液標(biāo)本HBV標(biāo)志物模式頻率（略）

表2上世紀(jì)末(前期)4139份血液標(biāo)本與本世紀(jì)初(后期)4907份標(biāo)本HBV標(biāo)志物模式比較（略）

2.2乙肝是全球性的人類多發(fā)傳染病在我國(guó)，病毒性肝炎在傳染病中發(fā)病率列在首位，其中80%是乙肝［4］。2002年我省乙肝的發(fā)病率是37.26/10萬(wàn)［5］。從表1可以看出，本地區(qū)的HBV感染率很高，9046份樣本中，HBV標(biāo)志物一項(xiàng)陽(yáng)性的有6552份標(biāo)本，若把單項(xiàng)抗-HBs陽(yáng)性視為是人工免疫的結(jié)果，不計(jì)該項(xiàng)，則還有3463份標(biāo)本，以此計(jì)算，HBV的感染率是38.28%。從表2看出，前期的感染率是49.33%，后期的感染率是25.68%。統(tǒng)計(jì)對(duì)比，P＜0.01，差異有非常顯著性，說(shuō)明感染率高，但近年已有所下降。

2.3人群對(duì)乙肝的免疫力已具相當(dāng)水平單獨(dú)抗-HBs陽(yáng)性者是3098份標(biāo)本，占檢測(cè)數(shù)的34.24%，這是近年來(lái)實(shí)施乙肝疫苗人工免疫的效果，對(duì)比前期和后期資料，見(jiàn)表2，抗-HBs陽(yáng)性率分別是20.15%和45.96%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理，P＜0.01，差異有非常顯著性。從絕對(duì)數(shù)量看，獲免疫力的人群增加1倍以上。世界衛(wèi)生組織(WHO)把乙肝疫苗人工免疫視為促進(jìn)健康經(jīng)濟(jì)有效方法之一，并規(guī)劃要求列入兒童免疫措施。我國(guó)在城鎮(zhèn)居民中早已實(shí)施此措施。若將人工免疫獲得的抗-HBs陽(yáng)性和自然免疫的抗-HBs陽(yáng)性人群合并統(tǒng)計(jì)，則陽(yáng)性率達(dá)34.96%，如若僅統(tǒng)計(jì)后期近年的資料，則陽(yáng)性率達(dá)56.28%，說(shuō)明在人群中對(duì)乙肝的免疫力已具較高的水平，這個(gè)水平高于國(guó)內(nèi)一些地區(qū)。

2.4HBsAg陽(yáng)性者共2209份，占24.42%，單項(xiàng)HBsAg陽(yáng)性者32例，僅占0.35%，足以說(shuō)明在體檢時(shí)，只單項(xiàng)檢驗(yàn)是不妥的，誠(chéng)然目前已普遍開(kāi)展“兩對(duì)半”檢測(cè)，有條件的還做更高水平、更準(zhǔn)確的檢測(cè)項(xiàng)目，如HBV-DNA檢測(cè)。

2.5反應(yīng)模式1.3.5.俗稱“大三陽(yáng)”?！按笕?yáng)”是乙肝感染嚴(yán)重、傳染性強(qiáng)的一群HBV感染者，現(xiàn)癥患者或慢性乙肝患者往往是呈現(xiàn)該模式。本資料呈這種反應(yīng)模式的851份標(biāo)本，陽(yáng)性率9.41%。若將前期資料和后期資料(見(jiàn)表2)分別計(jì)算，則陽(yáng)性率分別是14.39%和4.75%。相隔10年左右，下降了近10個(gè)百分點(diǎn)，P＜0.01，差異有非常顯著性。

2.6反應(yīng)模式1.4.5.俗稱“小三陽(yáng)”，這個(gè)反應(yīng)模式的感染人群，也具有傳染性，是機(jī)體免疫力尚好，HBV在體內(nèi)的復(fù)制受到一定的抑制，此人群也是乙肝主要傳染源之一。本資料該反應(yīng)模式占10.17%，前后期資料分別是12.18%和7.97%，經(jīng)檢驗(yàn)，P＜0.01，差異有非常顯著性。

2.7抗-HBc陽(yáng)性提示有過(guò)HBV的感染抗-HBc有兩種抗體IgM和IgG,IgM出現(xiàn)早，效價(jià)高，但消失快。IgG則可維持很長(zhǎng)時(shí)間，甚至終身。從理論上講，凡HBsAg或HBcAg陽(yáng)性者，抗-HBc也應(yīng)陽(yáng)性。本組資料HBsAg陽(yáng)性，抗-HBc也陽(yáng)性的2127份標(biāo)本，陽(yáng)性率23.51%，而抗-HBc陽(yáng)性的(包括有其他標(biāo)志物陽(yáng)性)達(dá)3117份標(biāo)本，陽(yáng)性率34.46%。HBsAg或HBeAg陽(yáng)性而抗-HBc陰性者134份標(biāo)本，陽(yáng)性率1.48%。并不是凡HBsAg和HBeAg陽(yáng)性者，抗-HBc就必陽(yáng)性，其原因是檢測(cè)抗-HBc的方法和試劑問(wèn)題，試驗(yàn)者有感于這個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)穩(wěn)定性和重復(fù)性不甚滿意。

2.8HBV“兩對(duì)半”檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)一些不好理解、不好解釋的反應(yīng)模式如代碼2.3.4.、2.3.4.5.和1.2.3.4.5.等模式。出現(xiàn)這種現(xiàn)象，首先應(yīng)檢查試劑質(zhì)量是否良好和操作是否規(guī)范無(wú)誤。在確定試劑質(zhì)量，操作正確的前提下，復(fù)檢時(shí)也出現(xiàn)同樣的結(jié)果，才可慎重發(fā)出結(jié)果報(bào)告。要積累資料，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，尋找原因。

3小結(jié)

應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)9046份血液樣本的HBV“兩對(duì)半”血清標(biāo)志物，出現(xiàn)20種反應(yīng)模式，統(tǒng)計(jì)各種模式的頻率，并作了前后期的對(duì)比。感染期模式組以1.4.5.和1.3.5.模式代碼為主，二者合占總檢驗(yàn)樣本的19.58%；恢復(fù)期模式組以2.和2.4.5.模式代碼為主，二者合占總樣本的37.65%。前后相間10年4139份樣本(前期)和4907份樣本(后期)檢測(cè)結(jié)果分析，前期的感染期模式占33.66%，恢復(fù)期模式是34.69%；而后期的感染期模式占15.35%，恢復(fù)期模式是56.29%。顯示相隔這10年間，人群感染狀況有很大的變化：HBV感染率下降，免疫力增強(qiáng)。

乙肝是嚴(yán)重危害人群健康的全球性傳染病，全世界估計(jì)有20億人感染HBV，我國(guó)估計(jì)也有一半人口感染，因?yàn)閭魅驹待嫶?、傳染途徑多樣，以往在防治措施和宣傳上又出現(xiàn)一些誤區(qū)。但從本資料看，只要切實(shí)做到預(yù)防工作，尤其是做好人工免疫，情況就有了改變，人們降服乙肝病魔的日子肯定可以達(dá)到。

【參考文獻(xiàn)】

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3孫南雄，黃祖瑚，劉雁雁，等.乙型肝炎患者957例血清學(xué)標(biāo)志分析.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1999，22：296-298.

第9篇：病毒樣本范文

注冊(cè)表控制法

控制寫(xiě)入權(quán)限

為了防止他人隨意修改保存在USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)，我們可以修改系統(tǒng)注冊(cè)表的相關(guān)鍵值，讓普通用戶只能訪問(wèn)USB設(shè)備中的數(shù)據(jù)內(nèi)容，而不能隨意改動(dòng)其中的內(nèi)容。

使用“Win+R”快捷鍵，打開(kāi)系統(tǒng)“運(yùn)行”文本框，輸入“Regedit”命令，單擊“確定”按鈕后，開(kāi)啟注冊(cè)表編輯器的運(yùn)行狀態(tài)。依次展開(kāi)注冊(cè)表編輯界面左側(cè)的“HEKY_LOCAL_MACHINE＼System＼CurrentControlSet＼Control＼StorageDevicePolices”分支（如圖1所示）。

在目標(biāo)分支下手工創(chuàng)建一個(gè)雙字節(jié)鍵值“WriteProtect”，同時(shí)將其數(shù)值調(diào)整為“1”，重新啟動(dòng)Windows系統(tǒng)，這樣用戶日后只能對(duì)接入的USB設(shè)備進(jìn)行讀取操作，而不能進(jìn)行寫(xiě)入操作。當(dāng)有用戶悄悄修改USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)時(shí)，系統(tǒng)會(huì)彈出“磁盤(pán)有寫(xiě)保護(hù)”之類的提示。

控制病毒運(yùn)行

考慮到USB設(shè)備感染病毒、木馬的現(xiàn)象十分普遍，為了防止保存有重要數(shù)據(jù)的USB設(shè)備，在插入計(jì)算機(jī)系統(tǒng)后，自動(dòng)激活運(yùn)行病毒、木馬程序，從而引起泄密事件發(fā)生，我們必須主動(dòng)出擊，想辦法控制USB設(shè)備中的病毒、木馬程序自動(dòng)發(fā)作運(yùn)行，下面就是具體的控制步驟：

首先按照前面的操作，打開(kāi)本地系統(tǒng)的注冊(cè)表編輯窗口，在該窗口左側(cè)顯示區(qū)域，依次展開(kāi)注冊(cè)表分支HKEY_CURRENT_USER＼Software＼Microsoft＼Windows＼CurrentVersion＼Explorer＼MountPoints2，用鼠標(biāo)右鍵單擊該分支選項(xiàng)，執(zhí)行快捷菜單中的“權(quán)限”命令，切換到如圖2所示的權(quán)限編輯對(duì)話框。

其次將這里所有用戶賬號(hào)的訪問(wèn)權(quán)限都調(diào)整為拒絕，再按F5功能鍵，刷新系統(tǒng)注冊(cè)表，這樣USB設(shè)備日后即使不小心感染了病毒、木馬程序，它們?cè)诓迦胗?jì)算機(jī)時(shí)，其中的病毒、木馬程序也會(huì)由于操作權(quán)限不足，而不能激活運(yùn)行，那么保存在USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)，也就不容易被病毒、木馬程序破壞或泄露出去了。

倘若想控制USB設(shè)備中AutoRun病毒的自動(dòng)運(yùn)行時(shí)，只要打開(kāi)系統(tǒng)注冊(cè)表編輯界面，將鼠標(biāo)定位到HKEY_CURRENT_USER＼Software＼Microsoft＼Windows＼CurrentVersion＼Policies＼Explorer節(jié)點(diǎn)上，打開(kāi)NoDriveTypeAutoRun鍵值的設(shè)置對(duì)話框，選中“十六進(jìn)制”選項(xiàng)，并輸入數(shù)值“4”，確認(rèn)后保存設(shè)置操作，再刷新系統(tǒng)注冊(cè)表即可。

隱藏設(shè)備分區(qū)

如果不希望用戶訪問(wèn)USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)時(shí)，可以嘗試將本地硬盤(pán)分區(qū)之外的盤(pán)符全部隱藏起來(lái)，這樣日后有人即使偷偷插入了USB設(shè)備，他們也不能從“我的電腦”或“計(jì)算機(jī)”窗口中，看到USB設(shè)備對(duì)應(yīng)分區(qū)的“身影”。

首先執(zhí)行“Regedit”命令，打開(kāi)注冊(cè)表編輯界面，找到該界面左側(cè)中的HKEY_CURRENT_USER＼Software＼Microsoft＼Windows＼CurrentVersion＼Policies＼Explorer節(jié)點(diǎn)選項(xiàng)，用鼠標(biāo)右鍵單擊目標(biāo)節(jié)點(diǎn)，執(zhí)行快捷菜單中的“新建”|“二進(jìn)制值”命令，將新創(chuàng)建的鍵值取名為“NoDrives”，該鍵值默認(rèn)數(shù)值為“00 00 00 00”（如圖3所示），該數(shù)值表示不隱藏任何磁盤(pán)分區(qū)。

“NoDrives”的數(shù)值包含四個(gè)字節(jié)，每個(gè)字節(jié)的每一位數(shù)值控制著從“A”盤(pán)到“Z”盤(pán)的顯示隱藏狀態(tài)，當(dāng)某個(gè)位數(shù)數(shù)值為“1”時(shí)，對(duì)應(yīng) 磁盤(pán)分區(qū)就會(huì)被禁止顯示。要是本地計(jì)算機(jī)硬盤(pán)包括C、D、E、F、G、H這幾個(gè)分區(qū)，那么我們將“NoDrives”的數(shù)值設(shè)置為“02 ff ff ff”時(shí)，就能將B分區(qū)、I到Z分區(qū)隱藏起來(lái)，重新啟動(dòng)Windows系統(tǒng)，再插入U(xiǎn)SB設(shè)備時(shí)，我們將無(wú)法在“計(jì)算機(jī)”或“我的電腦”窗口中，找到USB設(shè)備所使用的磁盤(pán)分區(qū)，這樣就不能訪問(wèn)到保存在該設(shè)備中的數(shù)據(jù)內(nèi)容了。當(dāng)然，通過(guò)計(jì)算機(jī)窗口的地址欄，輸入U(xiǎn)SB設(shè)備的磁盤(pán)分區(qū)符號(hào)，還是能夠訪問(wèn)到該設(shè)備中的內(nèi)容，為此，我們還應(yīng)該在HKEY_CURRENT_USER＼Software＼Microsoft＼Windows＼CurrentVersion＼Policies＼Explorer節(jié)點(diǎn)選項(xiàng)下面，手工創(chuàng)建一個(gè)“NoViewOnDrive”二進(jìn)制鍵值，同時(shí)將該鍵值數(shù)值也設(shè)置為“02 ff ff ff”，這樣任何方式也不能訪問(wèn)到USB設(shè)備中的內(nèi)容了。

組策略控制法

停用自動(dòng)播放

當(dāng)USB設(shè)備連接到本地計(jì)算機(jī)中時(shí)，Windows系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)打開(kāi)對(duì)應(yīng)設(shè)備窗口，以利于用戶快速訪問(wèn)其中的文件。而USB設(shè)備自動(dòng)打開(kāi)窗口的過(guò)程，很容易被網(wǎng)絡(luò)病毒利用，那么帶毒的USB設(shè)備插入計(jì)算機(jī)時(shí)，既會(huì)將病毒傳染給Windows系統(tǒng)，又容易引起重要數(shù)據(jù)泄密事件。所以，為了保護(hù)系統(tǒng)和重要數(shù)據(jù)的安全，我們可以停用所有磁盤(pán)分區(qū)的自動(dòng)播放功能：

首先逐一點(diǎn)選“開(kāi)始”|“運(yùn)行”選項(xiàng)，切換到系統(tǒng)運(yùn)行對(duì)話框，輸入“gpedit.msc”命令并回車(chē)，彈出系統(tǒng)組策略編輯界面，找到該界面下的“本地計(jì)算機(jī)策略”|“計(jì)算機(jī)配置”|“管理模板”|“系統(tǒng)”節(jié)點(diǎn)，用鼠標(biāo)雙擊目標(biāo)節(jié)點(diǎn)下的“關(guān)閉自動(dòng)播放”選項(xiàng)，展開(kāi)如圖4所示的組策略屬性對(duì)話框。

其次選中這里的“已啟用”選項(xiàng)，打開(kāi)“關(guān)閉自動(dòng)播放”下拉列表，將其中的“所有驅(qū)動(dòng)器”選項(xiàng)選中，單擊“確定”按鈕保存設(shè)置操作，這樣USB設(shè)備日后插入到本地計(jì)算機(jī)后，對(duì)應(yīng)設(shè)備窗口就不會(huì)自動(dòng)打開(kāi)了，那么即使該設(shè)備中隱藏有病毒、木馬程序，它們也沒(méi)機(jī)會(huì)激活運(yùn)行了。

限制樣本病毒

很多病毒在惡意傳播之前，一般都是先激活樣本病毒程序，之后才會(huì)進(jìn)行病毒傳播擴(kuò)散。根據(jù)這種病毒傳播原則，我們可以上網(wǎng)查詢病毒公告，及時(shí)獲取那些利用USB設(shè)備傳播的病毒程序樣本，并下載獲取對(duì)應(yīng)病毒樣本文件，再利用系統(tǒng)組策略設(shè)置，來(lái)限制樣本病毒程序在本地計(jì)算機(jī)中自動(dòng)運(yùn)行，下面就是具體的操作步驟：

首先按照前面的操作步驟，展開(kāi)系統(tǒng)組策略編輯界面，找到該界面左側(cè)的“本地計(jì)算機(jī)策略”|“計(jì)算機(jī)配置”|“Windows設(shè)置”|“安全設(shè)置”|“軟件限制策略”|“其他規(guī)則”節(jié)點(diǎn)，用鼠標(biāo)右鍵單擊目標(biāo)節(jié)點(diǎn)選項(xiàng)，點(diǎn)擊右鍵菜單中的“新散列規(guī)則”命令，彈出如圖5所示的設(shè)置界面。

其次按下設(shè)置界面中的“瀏覽”按鈕，切換到文件選擇對(duì)話框，導(dǎo)入之前獲取得到的樣本病毒程序文件，這樣Windows系統(tǒng)會(huì)智能生成文件散列號(hào)碼，并且還會(huì)自動(dòng)顯示相關(guān)樣本病毒文件的版本信息以及其他方面的狀態(tài)信息，接著將樣本病毒程序文件“安全級(jí)別”選擇為“不允許”，確認(rèn)后本地計(jì)算機(jī)就能自動(dòng)預(yù)防新型的通過(guò)USB設(shè)備傳播的病毒了，日后即使USB設(shè)備感染了樣本病毒，也不會(huì)在本地系統(tǒng)中造成安全威脅，更不會(huì)發(fā)生由樣本病毒引起的數(shù)據(jù)泄密現(xiàn)象。

隱藏訪問(wèn)分區(qū)

USB設(shè)備插入到計(jì)算機(jī)系統(tǒng)后，Windows系統(tǒng)分配給它的分區(qū)符號(hào)往往是固定的，如果能讓特定的磁盤(pán)分區(qū)隱藏起來(lái)，那么普通用戶就不能隨意訪問(wèn)到對(duì)應(yīng)設(shè)備中的數(shù)據(jù)內(nèi)容了。要做到這一點(diǎn)，可以進(jìn)行如下設(shè)置操作：

首先執(zhí)行“gpedit.msc”命令，打開(kāi)系統(tǒng)組策略編輯界面，找到該界面中的“本地計(jì)算機(jī)策略”|“用戶配置”|“管理模板”|“Windows組件”|“Windows資源管理器”節(jié)點(diǎn)，用鼠標(biāo)雙擊目標(biāo)節(jié)點(diǎn)下的“防止從我的電腦訪問(wèn)驅(qū)動(dòng)器”選項(xiàng)，展開(kāi)如圖6所示的組策略屬性對(duì)話框。

其次選中“已啟用”選項(xiàng)，點(diǎn)擊“選擇下列組合中的一個(gè)”位置處的下拉按鈕，從下拉列表中選擇特定磁盤(pán)分區(qū)，那么保存設(shè)置操作后，Windows系統(tǒng)雖然可以正確識(shí)別并安裝USB設(shè)備驅(qū)動(dòng)，但是在計(jì)算機(jī)窗口或我的電腦窗口卻不能訪問(wèn)它們的內(nèi)容。如果希望隱藏USB設(shè)備分區(qū)時(shí)，還要在“本地計(jì)算機(jī)策略”|“用戶配置”|“管理模板”|“Windows組件”|“Windows資源管理器”節(jié)點(diǎn)下，啟用并設(shè)置好“隱藏我的電腦中的這些指定的驅(qū)動(dòng)器”組策略，這樣用戶就不能看到它們的“身影”了。

隱藏文件法

隱藏設(shè)備數(shù)據(jù)

保存在USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)文件，如果被設(shè)置成隱藏屬性，那么日后用戶即使能進(jìn)入U(xiǎn)SB設(shè)備窗口，也不能看到其中的數(shù)據(jù)文件。在隱藏設(shè)備數(shù)據(jù)文件時(shí)，先將USB設(shè)備正確插入到本地計(jì)算機(jī)中，進(jìn)入計(jì)算機(jī)或我的電腦窗口，獲取USB設(shè)備的分區(qū)名稱，假設(shè)該分區(qū)為“F：”。接著依次點(diǎn)擊“開(kāi)始”|“運(yùn)行”命令，彈出系統(tǒng)運(yùn)行對(duì)話框，輸入字符串命令“attrib F： +r +s +h /d /s”，單擊“確定”按鈕后，USB設(shè)備中的所有數(shù)據(jù)文件都會(huì)被設(shè)置成隱藏屬性，普通用戶是不能隨意刪除、更改數(shù)據(jù)文件的。

限制隱藏文件

將重要數(shù)據(jù)文件設(shè)置成隱藏性質(zhì)，還不能保證其安全性，因?yàn)橐恍I(yè)用戶可以進(jìn)入Windows系統(tǒng)的文件夾選項(xiàng)設(shè)置對(duì)話框，切換到查看標(biāo)簽頁(yè)面，選中“顯示所有文件”功能，就能訪問(wèn)到隱藏文件了。為了防止專業(yè)用戶查看隱藏文件，我們還需要控制Windows系統(tǒng)，不讓其顯示隱藏文件，以達(dá)到徹底隱藏重要數(shù)據(jù)的目的。

使用“Win+R”快捷鍵，打開(kāi)系統(tǒng)“運(yùn)行”文本框，輸入“Regedit”命令，單擊“確定”按鈕后，開(kāi)啟注冊(cè)表編輯器的運(yùn)行狀態(tài)。依次展開(kāi)注冊(cè)表編輯界面左側(cè)的“HKEY_LOCAL_MACHINE＼SOFTWARE＼Microsoft＼Windows＼CurrentVersion＼Explorer＼Advanced＼Folder＼Hidden＼SHOWALL”分支（如圖7所示）。

找到目標(biāo)分支下的“CheckedValue”雙字節(jié)鍵值，并用鼠標(biāo)雙擊之，在其后界面中，將默認(rèn)數(shù)值由“1”修改成“0”，刷新系統(tǒng)注冊(cè)表后，即使普通用戶進(jìn)入查看選項(xiàng)設(shè)置頁(yè)面，選中“顯示所有文件”選項(xiàng)，Windows系統(tǒng)也不會(huì)將隱藏文件顯示出來(lái)。

偽裝數(shù)據(jù)文件夾

通過(guò)上面的隱藏方法，隱藏USB設(shè)備中的重要數(shù)據(jù)，會(huì)影響其他隱藏文件的讀取與訪問(wèn)。其實(shí)，我們可以在USB設(shè)備根目錄下面，任意創(chuàng)建一個(gè)文件夾，假設(shè)該文件夾名稱為“aaa”，日后將所有重要數(shù)據(jù)全部保存到這里。之后通過(guò)修改擴(kuò)展名，對(duì)“aaa”文件夾進(jìn)行偽裝操作，讓其變成“我的電腦”之類的特殊文件夾，這樣其他人雙擊該文件夾圖標(biāo)時(shí)，將無(wú)法看到隱藏在其中的重要數(shù)據(jù)內(nèi)容，所以，這在某種程度上能保護(hù)USB設(shè)備中的數(shù)據(jù)內(nèi)容。在進(jìn)行偽裝操作時(shí)，只要在“aaa”文件夾名稱后面，手工添加“.{20D04FE0-3AEA-1069-A2D8-08002B30309D}”這樣的擴(kuò)展名即可。

隱藏分區(qū)符號(hào)

每個(gè)USB設(shè)備插入本地計(jì)算機(jī)后，Windows系統(tǒng)都會(huì)為它自動(dòng)分配一個(gè)分區(qū)符號(hào)，如果隱藏該設(shè)備分區(qū)符號(hào)，那么其他用戶打開(kāi)計(jì)算機(jī)或我的電腦窗口后，就不能訪問(wèn)到USB設(shè)備，這樣該設(shè)備中的數(shù)據(jù)也會(huì)很安全。在隱藏分區(qū)符號(hào)時(shí)，首先將USB設(shè)備插入到本地計(jì)算機(jī)中，當(dāng)該設(shè)備被成功識(shí)別后，用鼠標(biāo)右鍵系統(tǒng)桌面上的“計(jì)算機(jī)”圖標(biāo)，執(zhí)行快捷菜單中的“管理”命令，切換到計(jì)算機(jī)管理窗口，將鼠標(biāo)定位到“存儲(chǔ)”|“磁盤(pán)管理”節(jié)點(diǎn)上，選中該節(jié)點(diǎn)下的USB設(shè)備圖標(biāo)，點(diǎn)擊右鍵菜單中的“更改驅(qū)動(dòng)器號(hào)和路徑”命令，打開(kāi)如圖8所示的設(shè)置對(duì)話框，選中USB設(shè)備使用的分區(qū)符號(hào)，點(diǎn)擊“刪除”按鈕，最后進(jìn)行確認(rèn)操作，這樣就能將USB設(shè)備分區(qū)符號(hào)隱藏起來(lái)了。日后，如果我們自己想訪問(wèn)USB設(shè)備中的內(nèi)容時(shí)，只要重新進(jìn)入“更改驅(qū)動(dòng)器號(hào)和路徑”設(shè)置對(duì)話框，為USB設(shè)備分配好合適分區(qū)符號(hào)即可。

權(quán)限控制法

授權(quán)特定用戶

保護(hù)USB設(shè)備重要數(shù)據(jù)的目的是防止外人訪問(wèn)，而不是防止自己使用，所以我們不妨利用NTFS的權(quán)限管理功能，來(lái)限制他人隨意訪問(wèn)USB設(shè)備。首先檢查系統(tǒng)分區(qū)的格式，倘若發(fā)現(xiàn)是FAT32格式時(shí)，那么可以依次點(diǎn)擊“開(kāi)始”|“運(yùn)行”命令，打開(kāi)系統(tǒng)運(yùn)行對(duì)話框，輸入“Convert c： /FS：NTFS”命令，單擊“確定”按鈕后，將系統(tǒng)分區(qū)C盤(pán)轉(zhuǎn)換成NTFS格式。接著進(jìn)入本地計(jì)算機(jī)的用戶管理界面，在這里為可信任用戶賬戶設(shè)置一個(gè)復(fù)雜的登錄密碼。

完成上面的準(zhǔn)備工作后，打開(kāi)系統(tǒng)資源管理器窗口，逐一展開(kāi)“Windows”|“Inf”文件夾，找到其中的“Usbstor.pnf”文件，用鼠標(biāo)右鍵單擊該文件，執(zhí)行快捷菜單中的“屬性”命令，切換到對(duì)應(yīng)文件屬性界面，選擇“安全”標(biāo)簽，在對(duì)應(yīng)標(biāo)簽頁(yè)面中將可信用戶賬戶添加進(jìn)來(lái)，并授予完全訪問(wèn)權(quán)限。

之后，將其它需要訪問(wèn)本地計(jì)算機(jī)，但是不允許使用USB設(shè)備的用戶賬戶導(dǎo)入進(jìn)來(lái)，同時(shí)將它們的訪問(wèn)權(quán)限都調(diào)整為“拒絕”，確認(rèn)后執(zhí)行設(shè)置保存操作，這樣其他用戶日后在嘗試訪問(wèn)USB設(shè)備時(shí)，由于訪問(wèn)Usbstor.pnf文件時(shí)權(quán)限不足而受拒，從而保證了USB設(shè)備重要數(shù)據(jù)的安全。