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動物實驗方案精選(九篇)

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動物實驗方案

第1篇:動物實驗方案范文

一、組織領(lǐng)導(dǎo)1、成立“**區(qū)城區(qū)鍋爐煙塵污染整治環(huán)保專項行動領(lǐng)導(dǎo)小組”,

二、職責(zé)分工各成員單位要切實重視煙塵整治工作,確保工作順利開展。各成員單位職責(zé)和任務(wù),具體分工為:(一)區(qū)環(huán)保局:1、牽頭協(xié)調(diào)煙塵整治聯(lián)合執(zhí)法活動;2、對煙塵污染基本情況調(diào)查摸底;3、負(fù)責(zé)環(huán)境違法問題的查處和整改措施的落實;4、掌握和通報煙塵整治工作進展情況;5、負(fù)責(zé)區(qū)直單位鍋(窯)爐煙塵污染整治工作。(二)區(qū)經(jīng)委:負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查應(yīng)淘汰的落后生產(chǎn)能力、工藝及產(chǎn)品,并依法提請區(qū)政府予以關(guān)閉、取締。(三)區(qū)質(zhì)監(jiān)分局負(fù)責(zé)對鍋(窯)爐安裝、使用、檢驗、改造等監(jiān)督管理,以及鍋(窯)爐操作人員的資格考核。(四)區(qū)安全生產(chǎn)監(jiān)督管理局加強鍋(窯)爐使用單位安全生產(chǎn)監(jiān)管,促使鍋(窯)爐使用單位完善安全生產(chǎn)條件,避免或減輕安全事故。(五)區(qū)工商分局對申辦或年審營業(yè)執(zhí)照的鍋(窯)爐使用單位,嚴(yán)格進行核查。(六)區(qū)公安分局保障煙塵整治專項行動順利開展,制止暴力抗法事件。

三、煙塵污染整治要求1、按照國家經(jīng)貿(mào)委《淘汰落后生產(chǎn)能力、工藝和產(chǎn)品的目錄》規(guī)定,“0.4-0.7噸/時立式水管固定爐排鍋爐”應(yīng)予淘汰,由經(jīng)貿(mào)部門實施;2、經(jīng)檢驗、檢測,達(dá)不到安全要求的鍋(窯)爐禁止使用,沒有合法操作使用證件的司爐工不準(zhǔn)上崗,由質(zhì)監(jiān)部門實施;3、對現(xiàn)有1蒸噸以下的燃煤鍋爐,必須改油、改氣、改燒無煙煤,1蒸噸以上燃煤鍋(窯)爐,還必須配套使用除塵設(shè)施,以確保煙塵和噪聲符合國家排放標(biāo)準(zhǔn);今后,熱電廠供熱范圍外新建或更換的1蒸噸以上燃煤鍋(窯)爐,必須嚴(yán)格執(zhí)行環(huán)境影響評價和“三同時”制度,由環(huán)保部門監(jiān)督實施。4、對辦理營業(yè)執(zhí)照的鍋(窯)爐使用單位,沒有依法進行環(huán)境影響評價、未經(jīng)環(huán)保部門審批同意的,工商部門不予辦理營業(yè)執(zhí)照或營業(yè)執(zhí)照年檢;5、根據(jù)鍋(窯)爐使用單位的具體違法情節(jié),由具有相關(guān)行政處罰權(quán)的單位依法予以處罰;6、各成員單位要組織本單位執(zhí)法人員認(rèn)真開展執(zhí)法檢查,并積極參加聯(lián)合執(zhí)法檢查活動。執(zhí)法人員要文明執(zhí)法、嚴(yán)格執(zhí)法,采取積極穩(wěn)妥的工作方法,以說服教育、引導(dǎo)為主,防止出現(xiàn)過激行為,保持社會穩(wěn)定。各成員單位要加強聯(lián)系,協(xié)調(diào)配合,互通信息,建立健全違法案件移送制度,確保煙塵整治專項行動的順利進行。

四、實施時間專項行動自發(fā)文之日至**年8月31日實施。

第2篇:動物實驗方案范文

幼兒園無煙日方案1一、活動目的:

1.通過活動,讓孩子們了解吸煙有害自己及家人的健康,吸煙更會污染環(huán)境。

2.形式多樣地宣傳無煙日,倡導(dǎo)“美好生活,自由呼吸”。

3.暢談一些綠色環(huán)保的方式方法。

二、活動時間:

20xx年5月28日——5月31日

二、活動安排:

小班:

1. 開展“吸煙有害健康”的教育活動,初步了解吸煙的危害

2.與老師、家長一起多渠道收集相關(guān)“禁止吸煙”的宣傳資料。

中班:

1.開展主題為“暢想無煙的世界”談話活動。

2.幼兒繪畫“禁止吸煙”, 并制作展板,在社區(qū)展出。

大班:

1.幼兒制作禁煙標(biāo)志圖、宣傳標(biāo)語,外出宣傳。

2.回家勸阻爺爺爸爸等吸煙人群加入禁煙的行列中來,并請他們在禁煙標(biāo)準(zhǔn)圖上簽上禁煙口號及姓名。

3.語言活動《煙斗薩克斯》,宣傳禁煙活動。

其他:

1.各班交流暢談一些綠色環(huán)保的方式方法,收集采納有效的,實用的方法,進行實際使用。還要廣泛開展有關(guān)“吸煙有害健康”的課堂,向孩子介紹“禁煙”標(biāo)志的含義。發(fā)動孩子勸阻身邊吸煙的人趕快加入禁煙的行列中來,讓我們周圍的空氣越來越新鮮!

2.幼兒園利用張貼禁煙標(biāo)志等宣傳標(biāo)語時刻提醒每一個進入幼兒園的人都能自覺地遵守禁煙規(guī)定。

幼兒園無煙日方案2活動背景:

5月31日是“世界無煙日(World No-Tobacco Day),”自20世紀(jì)50年代以來,全球范圍內(nèi)已有大量流行病學(xué)研究證實,吸煙是導(dǎo)致肺癌的首要危險因素。為了引起國際社會對煙草危害人類健康的重視,世界衛(wèi)生組織1987年11月建議將每年的4月7日定為“世界無煙日”,并于1988年開始執(zhí)行。自1989年起,世界無煙日改為每年的5月31日。

活動目標(biāo):

1、知道5月31日是世界無煙日,讓幼兒了解吸煙的危害。

2、采用各種形式宣傳無煙日,倡導(dǎo)“美好生活,自由呼吸”。

3、增強幼兒關(guān)心、保護環(huán)境的意識,激發(fā)幼兒爭做環(huán)保小衛(wèi)士,學(xué)習(xí)關(guān)心他人。

活動方案:

1、托小班以老師、家長收集相關(guān)圖片開展“吸煙有害健康”的教育活動,初步了解吸煙的危害。

2、中大班則在主題為“暢想無煙的世界”談話活動基礎(chǔ)上,引導(dǎo)幼兒制作禁煙標(biāo)志圖,并拿回家勸阻爺爺爸爸等吸煙人群趕快加入禁煙的行列中來,讓我們周圍的空氣越來越新鮮。

3、各班交流暢談一些綠色環(huán)保的方式方法,收集采納有效的,實用的方法,進行實際使用。

4、幼兒園利用張貼禁煙標(biāo)志等宣傳標(biāo)語時刻提醒每一個進入幼兒園的人都能自覺地遵守禁煙規(guī)定。

課程參考:

健康:禁煙小衛(wèi)士

目標(biāo):

1、知道新鮮空氣對人們的重要性,了解抽煙對人體健康,社會環(huán)境的危害。

2、增強幼兒關(guān)心、保護環(huán)境的意識,激發(fā)幼兒爭做環(huán)保小衛(wèi)士。

科學(xué):我們需要新鮮的空氣

目標(biāo):

1、了解目前空氣污染的現(xiàn)象。

2、知道使空氣不被污染的方法,樹立環(huán)保意識。

環(huán)境創(chuàng)設(shè):

1、活動室內(nèi)布置一些關(guān)于環(huán)境保護的圖片,布置一些環(huán)保標(biāo)記圖片。

2、設(shè)計一些環(huán)境保護的標(biāo)記,如:禁煙標(biāo)記等。

3、提供吸管、綠色皺紙,讓幼兒制作小樹。

區(qū)域延伸:

益智區(qū):觀察馬路上機動車排放尾氣的情況,記錄車輛尾氣排放統(tǒng)計表。

語言區(qū):討論有關(guān)空氣污染對人和動、植物危害的問題,及使空氣清潔的辦法。

美工區(qū):不同材質(zhì)的紙、筆,讓幼兒繪畫關(guān)于空氣污染的圖片及使空氣清潔的辦法圖片。

表演區(qū):創(chuàng)編《小熊的爸爸不抽煙了》,請幼兒大膽模仿,提高語言表達(dá)能力,培養(yǎng)幼兒的表演才能。

家園共育:

1、利用休息日帶孩子去公園走走,呼吸大自然的清新空氣。

2、請幼兒為家長講述吸煙有害身體健康的小知識。

3、吸煙的家長盡量不要在孩子面前吸煙。

第3篇:動物實驗方案范文

世界無煙日活動方案策劃1

一、提高認(rèn)識,加強領(lǐng)導(dǎo),完善學(xué)校禁煙制度

進一步認(rèn)識學(xué)校禁煙的重要性和必要性,切實加強組織領(lǐng)導(dǎo),我校成立了禁煙小組,并將責(zé)任落實到人,不斷優(yōu)化育人環(huán)境。

城西小學(xué)禁煙工作領(lǐng)導(dǎo)小組:

組長:林波

成員:徐方虎嚴(yán)寶忠賀廷峰王學(xué)豐肖運發(fā)王道兵胡萬勇

曹仁彬林乃喜李松

二、明確職責(zé),大力宣傳,共同推進禁煙工作,確定今后禁煙工作目標(biāo)

做到凡進入我校的任何人,在任何地點、任何時間一律不準(zhǔn)吸煙。學(xué)校要積極倡導(dǎo)和幫助吸煙教師戒煙,教師要做禁煙活動的表率,充分利用“世界無煙日”集中開展宣傳,通過“小手拉大手”等形式,讓學(xué)生勸阻家人不吸煙和避免被動吸煙。

三、營造氛圍,強化監(jiān)督,加強無煙學(xué)校建設(shè)

加強禁煙日常動態(tài)監(jiān)督,引導(dǎo)廣大師生養(yǎng)成良好的行為習(xí)慣,要將禁煙工作作為學(xué)校衛(wèi)生工作的重要組成部分,定期開展對各處室、班級禁煙工作的檢查,鞏固無煙學(xué)校的創(chuàng)建成果,營造教書育人的清新校園環(huán)境通過“無煙校園”的創(chuàng)建活動,營造學(xué)校無煙環(huán)境,全校力爭達(dá)到無煙校園的標(biāo)準(zhǔn)。

四、落實措施

1、在校園內(nèi)懸掛“吸煙危害健康”的橫幅,在教室及公共場所張貼禁煙標(biāo)志。

2、組織學(xué)生開展“吸煙危害健康”專題知識講座,每個班級設(shè)立控?zé)熜麄鳈凇?/p>

3、學(xué)校在教學(xué)區(qū)設(shè)立禁煙舉報箱,及時掌握學(xué)生及教師有無吸煙現(xiàn)象,積極為學(xué)生創(chuàng)造一個安寧、清潔、健康的學(xué)習(xí)、生活環(huán)境,讓學(xué)生遠(yuǎn)離煙害。

4、利用政治學(xué)習(xí)、教研活動等各種途徑,在教職工中開展控?zé)?、戒煙、禁煙教育,使控?zé)煛⒔錈煶蔀榻搪毠さ淖杂X行動,提高教職工的控?zé)熌芰?,充分利用健康教育課、主題班會、板報等各種形式,對學(xué)生開展吸煙有害健康的宣傳教育,培養(yǎng)學(xué)生良好的行為習(xí)慣,增強學(xué)生的自我保健意識與能力。召開有吸煙習(xí)慣同志的座談會,做到思想通、決心大、行動實,最終內(nèi)化為自覺戒煙的良好習(xí)慣,從而不影響其他人工作。

5、為了使這項工作深入開展、持久有效,制定必要的監(jiān)督制度,與教職工簽定“禁煙”協(xié)議,明確獎懲辦法,將活動成果與工作考核掛鉤,與評先樹優(yōu)結(jié)合,使“禁煙”活動成為大家的自覺行動。

6、學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)帶頭不吸煙,全體師生共同參與控?zé)熁顒樱巳藸幾鼋麩熤魅?,努力共?chuàng)“無煙學(xué)?!毙戮置?。

世界無煙日活動方案策劃2

一、活動主題

活動主題為“無煙生活”,推薦宣傳口號:

1.無煙_(地名),健康中國。

2.被吸煙,我不干。

3.無煙中國,我挺你。

4.我要告訴你,因為我愛你。

5.攜手滅煙,擁抱晴天。

二、活動安排

(一)國家級活動。

1.啟動活動。5月31日在北京舉辦“第33個世界無煙日暨健康中國行——無煙生活主題宣傳教育活動”啟動會。

2.開發(fā)控?zé)熤黝}公益廣告和海報。針對公眾的認(rèn)識誤區(qū)和常見問題,開發(fā)“無煙生活”主題公益廣告和海報,整合控?zé)焸鞑ゲ牧系荣Y源,供各地、各機構(gòu)開展相關(guān)活動使用。

3.組織“無煙生活”主題知識競賽。通過報紙、互聯(lián)網(wǎng)、微博、微信等途徑發(fā)動公眾參與答題,學(xué)習(xí)、掌握控?zé)熤R。

4.開展志愿者活動。一是通過快閃歌舞、跑酷、聯(lián)合簽名、文藝表演等形式,開展公共場所勸阻吸煙活動。二是開展“無煙中國,我挺你——我的控?zé)熜浴币环昼妱?chuàng)意微視頻征集展播活動。三是創(chuàng)作控?zé)熤黝}廣場舞,舉辦“無煙生活”廣場舞大賽。四是開展“我要告訴你,因為我愛你——圖形警示上煙包”倡導(dǎo)活動和“攜手滅煙,擁抱晴天”無煙環(huán)境倡導(dǎo)活動。

5.廣泛開展媒體宣傳。在主要媒體制作播放控?zé)煂n}節(jié)目、開辟控?zé)煂?。組織媒體溝通會和培訓(xùn)會,提高媒體控?zé)焸鞑ツ芰?。繼續(xù)開展“中國煙草控制大眾傳播活動”,評選優(yōu)秀控?zé)熋襟w作品。

(二)地方活動。

1.啟動活動。各地參照國家級的活動形式,在5月31日前后,主動策劃,與相關(guān)部門合作,啟動本地區(qū)“無煙生活”主題宣傳教育活動,結(jié)合落實兩辦《通知》、推進地方控?zé)熈⒎ê蛨?zhí)法,開展有地方特色的主題宣傳教育活動。

2.配合國家級活動。利用中央轉(zhuǎn)移支付地方健康素養(yǎng)促進行動項目等資源,在當(dāng)?shù)刂饕襟w播放國家級“無煙生活”主題公益廣告,也可以自行制作播放主題公益廣告。積極組織本地區(qū)公眾參與“無煙生活”主題知識競賽,開展本地區(qū)公共場所勸阻吸煙、微視頻征集展播、廣場舞大賽、煙包警示和無煙環(huán)境倡導(dǎo)等志愿者活動。組織開展以“無煙生活”為主題的健康巡講,動員本地區(qū)媒體參加中國煙草控制大眾傳播活動,設(shè)立控?zé)煂n}或?qū)?,加大媒體宣傳力度。

3.自主策劃其他活動。圍繞控?zé)熃】到逃诵男畔?附件2),開展“無煙生活”為主題的其他形式宣傳教育活動,大力傳播吸煙危害健康知識,倡導(dǎo)無煙生活。

三、活動要求

(一)各地要高度重視控?zé)煿ぷ鳎M一步貫徹落實兩辦《通知》精神,加強部門合作,將“無煙生活”主題宣傳教育納入本部門年度工作重點,選派專人負(fù)責(zé),制定活動方案,對活動開展情況進行考核評估,推進活動廣泛深入開展,力爭形成品牌效應(yīng)和規(guī)模效應(yīng)。

(二)各級衛(wèi)生計生部門、愛衛(wèi)辦要積極創(chuàng)建無煙衛(wèi)生計生系統(tǒng),將無煙生活宣傳教育納入國家基本公共衛(wèi)生服務(wù)健康教育項目、衛(wèi)生城鎮(zhèn)創(chuàng)建、慢病綜合防控示范區(qū)和中央轉(zhuǎn)移支付地方健康素養(yǎng)促進行動等項目,為相關(guān)部門提供技術(shù)支持和協(xié)調(diào)服務(wù)。

各級文明辦要將控?zé)煿ぷ骷{入精神文明創(chuàng)建,作為文明單位創(chuàng)建的重要內(nèi)容。各級團組織要廣泛動員青年志愿者參與無煙生活主題宣傳教育活動,在青少年中倡導(dǎo)健康的生活方式。

各級教育部門要加強學(xué)???zé)煿ぷ?,大力?chuàng)建無煙學(xué)校,組織參加知識競賽和志愿者活動。各級新聞出版廣電部門要加大對控?zé)煿ぷ餍麄髦С至Χ龋瑓f(xié)調(diào)本地各類媒體播出控?zé)煿鎻V告,開設(shè)無煙生活專欄。各級科協(xié)要充分發(fā)揮科普專家和場館等優(yōu)勢,將無煙生活主題宣傳教育活動納入《全民科學(xué)素質(zhì)行動計劃》具體實施工作中,開展控?zé)熤黝}的科普宣傳活動。

(三)要采用群眾喜聞樂見且易于傳播的宣傳教育形式,廣泛征集、發(fā)動青年志愿者參與活動,充分發(fā)揮志愿者的創(chuàng)造性和積極性,結(jié)合世界無煙日等重要時間節(jié)點主動設(shè)置議題,充分利用報刊、廣播、電視、網(wǎng)絡(luò)、移動終端、微博、微信等全媒體方式,增強活動實效。

(四)要及時反饋本地區(qū)工作進展,總結(jié)活動經(jīng)驗和亮點做法。

省級衛(wèi)生計生部門收集整理本省(區(qū)、市)階段性總結(jié)和全年總結(jié),分別于11月底前和4月底前交國家衛(wèi)生計生委宣傳司。

世界無煙日活動方案策劃3

一、活動主題:

以“禁煙”為主題,響應(yīng)全體師生,推廣宣傳,落實行動。

二、活動背景:

近年來,我國大學(xué)生吸煙人數(shù)呈持續(xù)上升的趨勢,據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計,最近幾年我國25歲以下的青少年煙民人數(shù),將激增到2億,而他們中至少有五千萬人最終將死于與吸煙有關(guān)的疾病。大學(xué)生吸煙的情況非常普遍。吸煙已經(jīng)對中國人的健康構(gòu)成重大威脅。對此,活動組織者呼吁我校大學(xué)生遠(yuǎn)離香煙,倡導(dǎo)大家自覺遵守公共場所禁止吸煙的規(guī)定,宣傳吸煙有害健康的常識。

三、活動目的:

杜絕大學(xué)生吸煙現(xiàn)象,讓同學(xué)們了解個人在公共場合抽煙,不僅影響到自己的身體健康,還會毒害他人。呼吁我校大學(xué)生遠(yuǎn)離香煙,倡導(dǎo)大家自覺遵守公共場所禁止吸煙的規(guī)定,宣傳吸煙有害健康的常識

四、活動宗旨:

通過此次主題禁煙活動的舉行,進一步的呼吁我校廣大學(xué)生注意身心健康,關(guān)愛他人生命健康。有利于身邊環(huán)境的凈化,促進社會更加文明與和諧。

五、參加人員:

藝術(shù)學(xué)院志愿者

六、活動時間:5月

七、活動地點:待定

八、活動準(zhǔn)備:

1.搜集關(guān)于吸煙的圖片,以實物圖片為主。

2.進行展板的制作,展板上要有手繪,圖片,以及文章等,以供展覽。

3.條幅與宣傳單的制作。(條幅和宣傳單已做,還有剩余)

4.需要和某醫(yī)院或者社區(qū)衛(wèi)生站進行聯(lián)合,請專業(yè)人士進行講座,配有實物的照片或者標(biāo)本。

九、活動實施:

(一)向各分院倡議書、海報等,在醒目處張貼禁煙宣傳標(biāo)語,讓大家充分認(rèn)識吸煙的危害性,以同學(xué)們易于接受的方式開展禁煙宣傳;

學(xué)校在宣傳欄開辟“禁煙活動”宣傳專欄,宣傳吸煙的危害性。從我做起,從現(xiàn)在做起,不在公共場合吸煙并提醒和監(jiān)督同學(xué)們的吸煙行為。

(二)進行實物的展示,需要和某醫(yī)院進行合作,將吸煙者的人體器官標(biāo)本和正常人體器官標(biāo)本進行對比,向廣大同學(xué)展示,教育意義會更加深刻。

(這項有些困難,需要協(xié)商)

(三)進行講座,可以和某醫(yī)院或者某社區(qū)衛(wèi)生站進行合作,請專業(yè)人士為廣大同學(xué)進行講座,講述吸煙的危害性,很有說服力。

世界無煙日活動方案策劃4

一、活動背景:煙草危害是人類健康最大的殺手。

中國的煙民數(shù)量在以每年300萬以上的速度增長,55%的15歲以上女性每天都遭受被動吸煙的危害,兒童被動吸煙情況更為嚴(yán)重。

為了提高公眾對致命煙草的認(rèn)識,幫助人們做出健康的選擇,控制青少年的吸煙率,同時調(diào)動廣大吸煙者的積極性,使他們告別香煙,保持健康。5月31日世界無煙日陽光義工徒步環(huán)保行活動通知。

二、活動內(nèi)容:

1、在風(fēng)箏廣場宣傳煙草的危害,發(fā)放有關(guān)材料,進行千人簽名戒煙活動。

2、組織義工沿著濰坊繁華地段徒步行宣傳煙草的危害。

3、徒步路線,分兩個隊:一隊沿從風(fēng)箏廣場5月31日世界無煙日陽光義工徒步環(huán)保行活動通知出發(fā)--走勝利街下面---穿過橋洞---往東風(fēng)街方向走---穿過東風(fēng)街---向北---到達(dá)四平路電子街見到橋,然后左拐到白浪河對岸---然后沿著河一直走到勝利街,上去走一段勝利街---最后-到出發(fā)點風(fēng)箏廣場。

第二隊:風(fēng)箏廣場向南走,沿著河穿過民生街然后到達(dá)健康街---右拐--到人民公園。沿著河穿過人民公園,再穿過民生街向勝利街方向走--然后到達(dá)勝利街--右拐--到風(fēng)箏廣場集合。

4、行程大約5公里,需義工大約200人。

集合時間地點:5月31號(周日)早上7:50四平路風(fēng)箏廣場。

世界無煙日活動方案策劃5

各位居民:

你們好!

每年的5月31日是“世界無煙日”。為了向廣大居民朋友宣揚吸煙有害健康的理念,拱墅區(qū)組織聯(lián)合多家單位將于本周開展系列宣傳活動。具體事項如下:

一、時間:

5月29日(本周日)

下午14:30-16:00

二、地點:

水晶城四樓.

三、內(nèi)容:

1.文藝表演.

2.專家訪談.

3.配樂煙包圖導(dǎo)讀.

4.控?zé)煆V場舞教學(xué)表演.

5.易拉寶展示、視頻播放.

第4篇:動物實驗方案范文

1 動物的選擇

1.1 動物來源確定 動物來源要選擇國家、省相關(guān)部門確定的醫(yī)學(xué)動物實驗室,其中包括《實驗動物管理條件》、《醫(yī)學(xué)實驗動物管理實施細(xì)則》的規(guī)定并取得醫(yī)學(xué)動物實驗條件的合格證明書。 其要求實驗動物的同種屬、同品系、同月齡、性別雌雄比例。

1.2 熟悉并了解實驗動物 在實驗前,準(zhǔn)備階段要到相應(yīng)動物實驗室對參加實驗的動物進行初步的觀察、了解,主要觀察其生活習(xí)性、了解飼養(yǎng)要求等,重點掌握實驗的組織、器官等生理解剖部位、特點、并作初步評估。

2 預(yù)實驗

預(yù)實驗是對研究技術(shù)、方法的訓(xùn)練,對設(shè)計方案的實踐評估,同時可以了解實驗動物對各種處理因素的反應(yīng)情況,以及在試驗過程中,動物在生理、精神狀態(tài)、飼養(yǎng)等方面可能出現(xiàn)的一些問題作以了解,以便在正式實驗過程中作好提前的預(yù)防、分析,保證實驗過程的順利實施。

3 實驗方法

3.1 保證動物或預(yù)行實驗靜脈的隨機分組 采用抽簽法,在正式實驗前1周對動編號、打印分組,并保證實驗靜脈的完好。

3.2 設(shè)置對照組 實驗組、對照組應(yīng)具有可比性,包括對象、飼養(yǎng)環(huán)境與方法,操作、處理因素等。

3.3 設(shè)計方案 要根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇設(shè)計方案。

3.4 做好觀察指標(biāo)的管理 選擇必要的觀察指標(biāo),如實驗室檢查、X線、病理、細(xì)菌 培養(yǎng)等,記錄結(jié)果要擬訂專用表格,必要時建立實驗動物病 歷與檔案,具體項目包括日期、時間、實驗者、取標(biāo)本者以及樣本的編號排序等要逐一詳實記錄并簽字。

4 實驗效果

動物實驗要消耗一定的人力、物力、財力,所以對整個實驗過程必須周密布置,諸如以上各項做法,盡最大限度地保 障動物實驗的質(zhì)量。以達(dá)到預(yù)期的目的。

5 討論與分析

動物實驗盡管有一定的不足,但在人體實驗之前,動物實驗是很重要的醫(yī)學(xué)研究方法,因此,從事醫(yī)療科研人員應(yīng)該更多熟悉、了解和掌握有關(guān)動物實驗的基本知識和技巧,為臨床科研工作做好基礎(chǔ)。

第5篇:動物實驗方案范文

一 什么是3R

實驗動物作為人類的替身為人類的科學(xué)發(fā)展起到了不可替代的作用,隨著科技的發(fā)展,生命科學(xué)研究領(lǐng)域?qū)嶒瀯游锸褂脭?shù)量猛增,實驗動物的痛苦及其權(quán)利引起了社會公眾的極大關(guān)注,特別是在西方動物保護運動的推動下。1959年拉舍爾和微生物學(xué)家伯可(Burch)在其著作《人道實驗技術(shù)原理》(Principles of HumaneExperimental Technique)一書中第一次系統(tǒng)提出了3R(reduce,refine,replace)理論。之后,歐美各國成立了許多科學(xué)研究用動物福利的保護組織,如成立于1969年的英國醫(yī)學(xué)試驗用動物中替代法基金會(FRAME)和國際動物福利基金會(IFAW),1980年成立的人道對待動物協(xié)會(PETA),1981年約翰霍普金斯大學(xué)動物試驗替代中心(CAAT)成立,這些基金會或研究機構(gòu)的成立,推動了實驗動物福利立法的進程,也促進新的科學(xué)研究方法的快速發(fā)展。

3R理論自形成以來一直影響著西方發(fā)達(dá)國家有關(guān)實驗動物的法規(guī),如美國的動物福利法案(1966年),瑞士的動物福利法(1979年)。進入20世紀(jì)80年代后,歐美等發(fā)達(dá)國家動物福利法的發(fā)展進入快速發(fā)展的軌道,如英國的動物科學(xué)實驗程序法案(1986年),瑞典1988年公布實施了《動物福利法》(2002年修訂),丹麥1991年實施了《動物福利法》,1993年德國實施了《動物福利法》(1998年修訂),葡萄牙1995年公布實施了《保護動物法》,日本《人道對待和管理動物法》(2005年)??偟膩碚f,歐洲大多數(shù)國家的動物福利保護立法是比較完備的,在世界上具有重要的影響。我國1988年了《實驗動物管理條例》,科技部2006年了《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》,在規(guī)范我國實驗動物管理的同時,也順應(yīng)了國際對動物福利的要求,但我國還沒有制定專門的動物福利法。

二 3R的含義

3R中減少的含義是指在科學(xué)研究中,使用較少的動物獲取同樣多的試驗數(shù)據(jù)或使用一定數(shù)量的動物能獲得更多試驗數(shù)據(jù)的方法。如果某一研究方案中必須使用實驗動物,同時又沒有可靠替代方法選擇,則應(yīng)考慮把使用動物的數(shù)量降低到實現(xiàn)科研目的所必需的最小量。優(yōu)化是指通過改善動物設(shè)施、飼養(yǎng)管理和實驗條件,精心設(shè)計技術(shù)路線和實驗手段,精煉實驗操作技術(shù),盡量減少實驗過程對動物機體的損傷、減輕動物遭受的痛苦和應(yīng)激反應(yīng),使動物實驗得出科學(xué)的結(jié)果。優(yōu)化的內(nèi)容是比較廣泛的,簡單概括就是實驗設(shè)計科學(xué)化、動物試驗規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化的過程。替代是指一項試驗方法能減少動物使用數(shù)量,或能優(yōu)化試驗程序以減輕動物痛苦或增加動物福利;或者能用非動物系統(tǒng)或者系統(tǒng)發(fā)生學(xué)上比較低等的動物種類代替高等級動物進行實驗,如用無脊椎動物代替哺乳類動物。根據(jù)是否使用動物或動物組織,替代可分為“相對替代”和“絕對替代”,前者指使用脊椎動物細(xì)胞、組織及器官進行體外試驗,或用低等動物替代高等動物的試驗,而后者則是完全不使用動物,如采用培養(yǎng)的細(xì)胞或組織、計算機模型等。根據(jù)替代的程度,替代可分為“部分替代”和“完全替代”,前者指利用其他實驗手段代替動物實驗中的某一部分,后者指用新的非動物實驗方法取代原來的動物實驗方法。

對于化妝品安全評價中替代方法,可以選擇體外培養(yǎng)物(細(xì)胞、組織或器官的培養(yǎng)物)代替實驗動物、低等動物代替高等動物、人群研究資料、數(shù)學(xué)和計算機模型的應(yīng)用,以及物理和化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用(如皮膚功能的測定)。可以說開發(fā)新的體外試驗方法,減少、優(yōu)化和替代動物實驗既是保護動物權(quán)益的需要,也是科技進步和社會經(jīng)濟發(fā)展的需要。

三 歐盟化妝品安全性評價動物福利的背景

歐盟有關(guān)動物實驗的法規(guī)體系由區(qū)域?qū)哟魏蛧鴥?nèi)層次兩個體系組成,既有歐盟及其大多數(shù)成員國參加的歐洲條約,又有歐盟各國各自動物保護的法律規(guī)定,還有由政府部門和行業(yè)協(xié)會的管理規(guī)定和標(biāo)準(zhǔn)。

1986年3月18日,在法國的斯特拉斯堡通過了《用于實驗和其他科學(xué)目的的脊椎動物保護歐洲公約》(European Conventionfor the Protection of VertebrateAnimals used for Experimental andother Scientific Purposes,CETSno.123),該公約于1991年1月1日生效。公約旨在減少各成員國實驗的次數(shù)以及使用動物的數(shù)量,鼓勵成員國積極開展動物替代方法的研究,并僅在沒有動物替代方法的情況下才用動物做實驗。實驗動物的選取應(yīng)遵從明確的定量準(zhǔn)則,并應(yīng)得到良好的照顧,盡可能免受可避免的痛苦。

為了落實歐洲公約的要求,協(xié)調(diào)各成員國的國內(nèi)立法,消除貿(mào)易壁壘,防止競爭出現(xiàn)扭曲,避免影響共同市場的建立和功能,歐洲共同體于1986年11月24日在布魯塞爾頒布了《關(guān)于使各成員國有關(guān)用于實驗和其他科學(xué)目的動物的保護法律、法規(guī)和行政規(guī)章接近的理事會指令》(即指令86/609/EEC)。指令正文和附件的規(guī)定與公約的規(guī)定基本一致。指令實施24年來,已成為歐盟范圍內(nèi)從事科學(xué)研究、檢驗用動物普遍遵守的準(zhǔn)則。最新的報道指出,為了適應(yīng)歐盟范圍擴大和新的形勢發(fā)展,如何使歐盟新成員國在實驗動物福利方面協(xié)調(diào)一致成為立法者考慮的問題,2008年,歐洲委員會決定重新修訂86/609/EEC指令。2010年9月8日,歐洲議會表決通過了新指令2010/63/EU,取代已實施25年了舊指令,成為保護實驗用動物共同遵守的法律在歐盟27個成員國中得到實施,以規(guī)范每年在歐洲實驗室超過1200萬只動物的使用。BBC認(rèn)為,隨著2009年12月歐盟里斯本條約的推出,動物福利與反歧視、推動性別平等、保護人類健康和維護人類福利,共同成為歐盟的4個核心價值。新法規(guī)修訂體現(xiàn)了以“3R”為中心的原則,具體涉及動物試驗的倫理評估和建立持續(xù)的倫理審核制度,非人靈長類動物的使用,加強法規(guī)的透明度和執(zhí)行力,加

強成員國之間動物倫理的合作等內(nèi)容。新條款中也提到了相關(guān)的宗教規(guī)則,傳統(tǒng)習(xí)俗和民族傳統(tǒng)應(yīng)該受到尊重。根據(jù)程序,各成員國轉(zhuǎn)換為國內(nèi)法的立法限期為2012年11月,各成員國法律條款的實施期限為2013年1月1日。

四 歐重化妝品安全性評價動物福利的要求

歐洲是唯一有法規(guī)禁止使用動物實驗進行化妝品安全性評價的地區(qū)。眾所周知,歐洲化妝品管理的法規(guī)是76/768/EC。1986年歐洲保護試驗用動物的歐洲公約和理事會指令后,迫使藥品、生物制品、化學(xué)品等與安全評價相關(guān)的行業(yè)執(zhí)行這一共同的法律規(guī)定,化妝品行業(yè)也不例外,研發(fā)新的體外試驗方法成為化妝品行業(yè)的一項重要任務(wù)。歐盟成員國先后成立了專門的研究機構(gòu),1989年,德國成為首個建立國家替代方法研究驗證中心的國家。1990年歐盟在意大利成立了歐洲替代方法驗證中心(ECVAM),專門從事替代方法的驗證和法規(guī)認(rèn)可工作。歐洲化妝品、盟洗用品和香水協(xié)會(COLIPA)建立了動物實驗替代方法委員會(SCAAT),以執(zhí)行法律的規(guī)定和保障化妝品工業(yè)的發(fā)展,接受應(yīng)用非動物的替代方法進行化妝品安全性評價。各大公司投入巨額經(jīng)費從事替代方法的研究。歐洲框架計劃也投入巨額研發(fā)經(jīng)費資助非動物試驗方法的研發(fā),一大批新的化妝品毒理學(xué)安全性評價的體外試驗方法被提出,進入科學(xué)驗證程序和被法規(guī)接受??茖W(xué)家和管理者逐步認(rèn)同不再信賴于動物實驗的新的毒理學(xué)試驗體系。

在技術(shù)進步的推動下,2003年,歐委會通過了關(guān)于76/768/EEC的第七次修訂,即2003/15/EC指令,該指令明確了取消動物實驗的時間表。指令明確規(guī)定自2009年3月11日起,禁止使用動物進行化妝品急性毒性、眼刺激和過敏試驗,2013年將全面禁止在動物身上進行化妝品和原料的安全性測試,也不允許成員國從外國進口和銷售違反上述禁令的化妝品。該規(guī)定對歐盟內(nèi)部成員國和非歐盟國家進口的產(chǎn)品的要求是一致的。

這一指令的出臺,可以說是在歐洲范圍內(nèi),將動物福利和3R的原則從最初的理念(1959年),到立法約束(1986年)、再到技術(shù)進步(2003年),再到最后形成法律禁令(2009年),穩(wěn)步推進分步實施。客觀上形成了技術(shù)壁壘,影響到化妝品的進出口貿(mào)易。為了進一步明確2003/15/EC指令的要求和提高可操作性,2006年6月7日歐盟委員會頒布了《依照76/768/EEC沒有使用動物實驗的聲明指引》(即2006/406/EC)。指引規(guī)定,對不使用動物試驗的化妝品,其產(chǎn)品制造商或負(fù)責(zé)產(chǎn)品投放市場信息的個人(商),可以聲明其產(chǎn)品沒有經(jīng)過動物試驗。這一聲明不是強制性的。對于“非動物試驗”的標(biāo)簽聲明的使用不能誤導(dǎo)消費者,消費者能從知情的選擇中獲得真實的利益。該聲明的使用不應(yīng)導(dǎo)致以該類聲明作為市場手段的生產(chǎn)商和(或)供應(yīng)商之間不公平的市場競爭。

2009年12月,歐盟了新的化妝品法規(guī)1223/2009/EC,在過度期后將取代指令76/768/EC成為歐洲的化妝品統(tǒng)一法律。該法律保留了原指令對動物試驗禁令的規(guī)定,進一步明確3R的原則,列為第五章第18條,同時對禁止動物試驗的情形和豁免條件作出了規(guī)定。

五 美國化妝品法規(guī)對動物福利的要求

1976年和1980年,在美國動物福利協(xié)會(AWI)、動物聯(lián)合行動組織(UAA)和動物保護協(xié)會的共同努力下,《動物福利法》(制定于1966年)和《人道主義飼養(yǎng)和使用實驗動物的公共衛(wèi)生方針》重新修訂。通過這兩個法規(guī)性文件,使3R在動物實驗方面的應(yīng)用得以落實。另外,修訂的《動物福利法》還規(guī)定了減少動物痛苦的標(biāo)準(zhǔn),并要求研究者在可能引起實驗動物痛苦時考慮替代方法。1981年,CAAT成立,1986年美國國會提出了關(guān)于在研究、檢驗和教育中動物應(yīng)用替代物的技術(shù)評估報告。1993年CAAT作為東道主舉辦了第一屆生命科學(xué)中替代物和動物應(yīng)用世界大會。在美國,許多國家部門的工作中滲透了動物替代實驗的原則。1993年,一個由多部門參與的組織,替代方法驗證跨部門協(xié)調(diào)委員會(ICCVAM)成立。ICCVAM由15個聯(lián)邦管理和科研機構(gòu)組成,包括消費者產(chǎn)品安全委員會、農(nóng)業(yè)部、國防部、能源部、內(nèi)政部、交通部、環(huán)保局、食品藥品管理局、國立癌癥研究所、國立環(huán)境衛(wèi)生科學(xué)研究所等聯(lián)邦機構(gòu)。其主要職責(zé)是技術(shù)協(xié)調(diào)和評估新的和修訂的實驗方法。到目前為止,經(jīng)ICCVAM評估驗證的體外方法涉及許多安全評價終點,包括急性經(jīng)口毒性、發(fā)育毒性、內(nèi)分泌紊亂、眼腐蝕/刺激、遺傳毒性、熱原試驗、皮膚腐蝕和皮膚敏感性。

在化妝品行業(yè),20世紀(jì)70年代美國動物保護主義者抗議使用動物進行試驗,強烈抨擊化妝品毒性鑒定中的眼刺激試驗和急性毒性試驗使動物遭受痛苦、損傷甚至不正常死亡。世界知名的Revion化妝品公司被迫與動物保護者談判,同意提供250萬美元資助洛克菲大學(xué)研究Draize眼刺激試驗的替代方法。1980年,美國化妝品、盟洗用品和香水協(xié)會(CTFA)共同贊助成立了CAAT專門致力于替代方法的研究。1993年,美國的“動物權(quán)利法”強制研究單位建立“倫理考察委員會”,鼓勵化妝品公司和研究單位開展動物替代方法和優(yōu)化試驗程序的研究,同年美國國會成立了ICCVAM和機構(gòu)間替代方法管理小組(IRAG),后者由美國FDA、環(huán)境保護局(EPA)和消費品安全委員會(CPSC)為代表,早期開展了一個三年研究計劃(1991-1994),從41個實驗室29個不同試驗方法得到的60個實驗數(shù)據(jù)評價眼刺激替代試驗方法的有效性。進入21世紀(jì),美國替代方法的研究、驗證以及認(rèn)可進程明顯加快。

六 國際社會對動物試驗替代技術(shù)的認(rèn)可

2002年,OECD正式成立了動物保護國際委員會(ICAPO),許多非政府組織、企業(yè)界和環(huán)保界的代表共同參與。歐洲、美國和日本等主要國家統(tǒng)一在OECD的框架內(nèi)發(fā)揮各自作用,在化學(xué)測試指南中倡導(dǎo)有關(guān)實驗動物保護的建議。ICAPO成立以來,替代方法的驗證和認(rèn)可明顯加快,從2002年起已有10多項替代方法被認(rèn)可,2009年新的健康和環(huán)境評估的替代/優(yōu)化方法多達(dá)9項,2010年重新和修訂的方法超過6項。在方法驗證和認(rèn)可方面,上世紀(jì)90年代初,國際社會對于替代方法的驗證還存在爭論,雖然當(dāng)時OECD內(nèi)部沒有成立專門的替代驗證機構(gòu),但在積極協(xié)調(diào)成員國的立場和推動全球范圍內(nèi)的替代方法認(rèn)可方面做了大量工作。2005年,OECD制訂了替代的驗證和認(rèn)可指南,2004年和2007年,OECD還分別提出了(Q)SAR模型的驗證指南。2007年在加拿大召開了由歐洲、美國和日本參加的化妝品法規(guī)國際協(xié)調(diào)會議(International Cooperationon Cosmetic Regulation,ICCR),推動替代方法的國際合作和促進3R的發(fā)展。

第6篇:動物實驗方案范文

關(guān)鍵詞:獸醫(yī);實驗動物;主要作用

中圖分類號:S858.91 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B 文章編號:1007-273X(2016)11-0034-01

獸醫(yī)在動物成長過程中起著重要作用,實驗動物是特殊的動物[1],其在實際工作過程中離不開獸醫(yī),其實驗的每個環(huán)節(jié)、每個應(yīng)用過程中,都有獸醫(yī)的職責(zé),獸醫(yī)在實驗動物工作過程中起到重要作用,對實驗動物科學(xué)發(fā)展提升及實驗動物質(zhì)量提升都有一定的推動作用。

1 獸醫(yī)在實驗動物設(shè)施建設(shè)、運行與管理中的作用

實驗動物飼養(yǎng)需要一定設(shè)施,設(shè)施是基本保障。動物在飼養(yǎng)過程中,需要獸醫(yī)的觀察與指導(dǎo),用來提高實驗動物飼養(yǎng)的質(zhì)量,保障實驗動物的成活率等。獸醫(yī)需要國際認(rèn)證,認(rèn)證都是科學(xué)公正的,能對實驗動物的發(fā)展起到促進作用,獸醫(yī)在實驗動物工作過程中起著指導(dǎo)與保護作用,可促進實驗動物健康可持續(xù)發(fā)展,符合現(xiàn)代實驗動物發(fā)展需要,也是社會發(fā)展的需要。

2 獸醫(yī)在動物實驗的設(shè)計與實施中的作用

獸醫(yī)都是了解動物機能的,在動物實驗過程中,獸醫(yī)能科學(xué)地進行實驗的設(shè)計。實驗設(shè)計是一門藝術(shù),合理地進行動物實驗設(shè)計,可以提高實驗的效率[2],對保障實驗數(shù)據(jù)、實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性起著重要作用。在動物實驗的過程中,獸醫(yī)可以起到重要指導(dǎo)作用,獸醫(yī)了解實驗動物的成長過程,在實驗動物使用的過程中獸醫(yī)起到重要的保護作用。

3 獸醫(yī)在實驗動物運輸管理中的作用

實驗動物的運輸管理是一項復(fù)雜的過程,在運輸過程中受到環(huán)境、氣候等因素影響,動物易受到刺激,對其心理、生理都會產(chǎn)生一定影響,這需要獸醫(yī)加強運輸過程中的管理。實驗動物在運輸?shù)侥康牡睾?,一般情況下不能立即進行實驗,需要獸醫(yī)對實驗動物進行全面檢查,看其各項指標(biāo)是否符合做實驗的標(biāo)準(zhǔn),如不適合做實驗,獸醫(yī)必須給實驗動物進行科學(xué)調(diào)節(jié),讓其恢復(fù)相應(yīng)的指標(biāo),符合實驗動物的標(biāo)準(zhǔn),讓實驗數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確,合理。

4 獸醫(yī)在實驗動物福利監(jiān)督與管理中的作用

當(dāng)前經(jīng)濟水平不斷發(fā)展,科技水平不斷提高,國民生產(chǎn)總值持續(xù)增加,實驗室對實驗動物的要求越來越高,必須為實驗動物提供必要的福利,獸醫(yī)在此過程中起著重要的監(jiān)督與管理作用。首先,隨著經(jīng)濟的增長,社會輿論與民眾要求對實驗動物增加福利與待遇[3];其次,獸醫(yī)本身在動物實驗中也有著相關(guān)的管理職能,既是實驗動物的整個管理者,又是實踐者。因此,要不斷提高獸醫(yī)的職業(yè)素養(yǎng),除了專業(yè)領(lǐng)域的衛(wèi)生監(jiān)督、實驗方案審查、實驗操作復(fù)核、提供咨詢與建議外,還需要仁愛之心,要培養(yǎng)獸醫(yī)的高尚道德情操,完善其實際應(yīng)用能力,提高獸醫(yī)的實踐技能,這樣才能在實驗動物工作過程中起到合理的指導(dǎo)與保護作用。

5 獸醫(yī)在生物安全評價與管理中的作用

生物安全評價與管理在實驗動物發(fā)展過程中起著重要作用。安全是重要的因素,評價必須建立科學(xué)的發(fā)展基礎(chǔ)上,公平、公正、公開地進行評價,符合現(xiàn)代生物發(fā)展過程。在生物安全方面,獸醫(yī)承擔(dān)著很重要的職責(zé),要求其站在人類的角度,從生物整體發(fā)展、延續(xù)與增殖的角度綜合考慮問題;另外,獸醫(yī)需要對每個實驗動物的死亡原因等進行評估,并給出相關(guān)的報告,尤其是在動物實驗中發(fā)現(xiàn)的新問題應(yīng)及時通報給相關(guān)部門,告知大眾,防止疫情的傳播和流行。

6 獸醫(yī)在實驗動物藥品和廢棄物管理中的作用

藥品一般都具有一定的毒性,藥品在使用過程中必須進行科學(xué)合理的管理,特別是廢棄物的管理,這些工作都需要在獸醫(yī)的指導(dǎo)下完成,獸醫(yī)具有一定的專業(yè)性,尤其對獸藥有一定認(rèn)R,能起到專業(yè)指導(dǎo)作用,符合實驗動物藥品的相應(yīng)管理要求。

參考文獻(xiàn):

[1] 李維國,趙 勇,師長宏.高等院校實驗動物教學(xué)中動物實驗體系的改革和構(gòu)建[J].山西農(nóng)經(jīng),2015(5):7-8.

第7篇:動物實驗方案范文

在開展生物醫(yī)學(xué)研究時,研究者通過正確地運用統(tǒng)計學(xué)知識,可直接影響研究的質(zhì)量。統(tǒng)計學(xué)設(shè)計的任務(wù)在于對研究的部署、實施,直到研究結(jié)果的解釋進行系統(tǒng)的安排,力爭做到以最少的人力、物力獲得可靠的結(jié)論和信息。其目的在于確定某種處理是否會表現(xiàn)出某種特定的效應(yīng)。在實驗設(shè)計時應(yīng)遵循惟一差異原則,即在進行兩組比較時,兩者之間僅有因處理因素不同而引起的差異,而其他實驗條件相關(guān)的非處理因素都應(yīng)保持等同。然而,處理組與對照組在反應(yīng)上表現(xiàn)出的差別并不一定意味著是處理的結(jié)果。另有兩種引起差別的可能性,即偏倚和偶然性。偏倚是指系統(tǒng)性差別,它不是因組間在處理上的不同所引起。生物醫(yī)學(xué)實驗中統(tǒng)計學(xué)設(shè)計和分析的目標(biāo)就是消除潛在的偏倚,減少偶然性[2]。

1.1實驗的偏倚和控制

偏倚是在研究中從設(shè)計到實驗實施和結(jié)果分析的各環(huán)節(jié)存在一些人為的、有系統(tǒng)傾向的非隨機誤差,它不是由于抽樣造成的,而是某種偏性使得實驗結(jié)果偏離它的真值。從所選擇的生物醫(yī)學(xué)問題到研究方案的制訂與實施、實驗的完成過程、實驗的分析與解釋,乃至實驗結(jié)果的發(fā)表,均可能存在各式各樣的偏倚[2]。這種偏倚常常表現(xiàn)為系統(tǒng)誤差。偏倚的大小取決于研究的方法和具體的實驗條件。常見的偏倚主要有選擇性偏倚、觀察性偏倚和混雜性偏倚。必須認(rèn)識實驗過程的偏倚,從實驗設(shè)計起直到整個研究過程結(jié)束均要加以控制。正確的實驗設(shè)計可控制選擇性的偏倚,事前人為控制和采取相應(yīng)的措施可避免和減少觀察性的偏倚。對于混雜性偏倚,可將重要的混雜因素在設(shè)計階段進行分層隨機設(shè)計,使混雜因素在組間分布均衡;在統(tǒng)計分析階段將混雜因素作為分層因素或采用有協(xié)變量分析方法,以消除混雜因素的影響。只有有效地控制或消除偏倚,方可減少結(jié)果的假陽性或假陰性。

1.2減少偶然性的潛在影響

偶然性因素的作用可以減少,但不能完全排除。因為即使是在精心實施的研究中,接受同樣處理的動物,其反應(yīng)也不可能完全一樣。適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計分析可使實驗人員評估出現(xiàn)假陽性的概率,即根本不存在處理效應(yīng)的情況下觀察到差異的概率。這種概率越小,實驗者發(fā)現(xiàn)真實效應(yīng)的可能性就越大。為了更有把握地檢測出真實效應(yīng),有必要減少偶然性的作用,并通過實驗設(shè)計確保能在“噪聲”之上識別真正的“信號”。

1.3實驗設(shè)計的要素

要消除生物醫(yī)學(xué)實驗中潛在的偏倚,減少偶然性,就應(yīng)對實驗對象、處理因素和實驗效應(yīng)這三個實驗設(shè)計要素,按照對照、重復(fù)、隨機化和均衡四項原則進行周到的設(shè)計與控制[3]。1.3.1實驗對象實驗中處理因素所作用的對象稱為實驗對象。不同性質(zhì)的實驗研究需要選取不同種類的實驗對象,一個完整的實驗設(shè)計中所需實驗對象的總數(shù)稱為樣本含量。生物醫(yī)學(xué)試驗中考慮動物實驗對象時應(yīng)關(guān)注以下幾個方面:①動物種屬的選擇:選擇實驗動物的種屬與品系時,尤其需要注意其背景反應(yīng)的水平。為了將反應(yīng)“信號”水平最大化,常常意味著應(yīng)避免選擇那些背景反應(yīng)水平極低的動物種屬或品系,但如果采用過度反應(yīng)的動物種屬或品系也同樣會出現(xiàn)問題。動物物種選擇中的其他問題,無論是實際問題(壽命、體型、易得性、對動物學(xué)特征的了解情況)或是理論問題(生化、生理或解剖結(jié)構(gòu)與人的相似性),都需要從專業(yè)的角度認(rèn)真加以考慮和權(quán)衡。②動物的數(shù)量:雖然從統(tǒng)計設(shè)計角度考慮可得出某項實驗所需的動物數(shù)(樣本含量),但所得出的數(shù)值往往很大。因此,雖然樣本含量估計是保證結(jié)論可靠性(精度和檢驗效能)的前提,但基于實驗的可操作性及經(jīng)濟原則方面的考慮,應(yīng)結(jié)合統(tǒng)計學(xué)的計算結(jié)果與以往的生物醫(yī)學(xué)研究經(jīng)驗予以確定。③動物的體重與年齡:為確保實驗對象的同質(zhì)性,實驗中所使用的動物體重與年齡應(yīng)盡可能相近;動物體重的標(biāo)準(zhǔn)差不應(yīng)超出平均值的10%;嚙齒類等小動物年齡相差不應(yīng)超出1周,大動物年齡相差不應(yīng)超出1個月。④動物的分層:為了準(zhǔn)確檢測一種處理因素引起的差別,各處理組在可能影響實驗結(jié)果的其他非處理因素方面應(yīng)盡可能具有同質(zhì)性。當(dāng)存在動物亞系間的差別時,有兩種方法可得到更為準(zhǔn)確的結(jié)論。一是在結(jié)果分析階段將亞系作為一個“分層變量”處理,包括對兩個亞系的結(jié)果進行單獨分析,然后將結(jié)果綜合,得出處理效應(yīng)的總結(jié)論;二是將亞系作為實驗設(shè)計的“區(qū)組因素”,這種情況下可使對照組與處理組中每個亞系動物數(shù)量相等。除以上所討論的“亞系”之外,其他的非處理因素,如性別、窩別、體重段等也可作為分層變量進行局部控制,并據(jù)此進行分層隨機化分組。1.3.2處理因素設(shè)計實驗研究時,要明確研究中的處理因素和影響實驗效應(yīng)的非處理因素。研究者希望通過對研究設(shè)計進行有計劃的安排,從而能科學(xué)地考察其效應(yīng)大小的因素稱為處理因素或?qū)嶒炓蛩?;研究者往往忽略對評價實驗因素作用大小有一定干擾的重要的非處理因素或非實驗因素(如動物的窩別、體重等);其他未加控制的許多因素的綜合作用統(tǒng)稱為實驗誤差。實驗結(jié)果是處理因素和非處理因素共同作用而產(chǎn)生的實驗效應(yīng),因此如何控制和排除非處理因素的干擾,正確顯示處理的效應(yīng),是實驗設(shè)計的基本任務(wù)。1.3.3實驗效應(yīng)實驗效應(yīng)是處理因素作用于受試對象的反應(yīng)和結(jié)果,是反映實驗因素作用強弱的標(biāo)志,它通過觀察指標(biāo)(統(tǒng)計學(xué)常將指標(biāo)稱為變量)來體現(xiàn)。如果指標(biāo)選擇不當(dāng),未能準(zhǔn)確反映處理因素的作用,獲得的研究結(jié)果就缺乏科學(xué)性,因此選擇好觀察指標(biāo)是關(guān)系整個研究成敗的重要環(huán)節(jié)。指標(biāo)的觀察應(yīng)避免帶有偏性或偏倚,要結(jié)合專業(yè)知識,盡可能多地選用客觀性強的指標(biāo),在儀器和試劑允許的條件下,應(yīng)盡可能多選用特異性強、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的客觀指標(biāo)。對一些半客觀(如尿液pH試紙讀數(shù)值)或主觀指標(biāo)(行為測量、病理觀察),一定要事先規(guī)定讀取數(shù)值的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn),只有這樣才能準(zhǔn)確地分析實驗結(jié)果,從而提高實驗結(jié)果的可信度。

1.4實驗設(shè)計的原則

為了防止結(jié)果的偏倚,保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和最大化的表達(dá),在進行生物醫(yī)學(xué)實驗設(shè)計時必須遵循統(tǒng)計學(xué)設(shè)計的對照、重復(fù)、隨機化和均衡四個基本原則。生物醫(yī)學(xué)實驗中對照組的設(shè)置必須具備三個條件:①對等原則,即惟一差別原則,除處理因素外,對照組具備與實驗組對等的非處理因素。在相互比較的各組間,除了給予的處理因素不同外,其他方面應(yīng)與實驗組具有一致性,如相同的實驗單位來源(動物種屬、體重等)和相同的實驗條件、操作方式和喂養(yǎng)環(huán)境等。②同步原則,對照組與實驗組設(shè)立之后,在整個研究進程中始終處于同一空間和同一時間。③專設(shè)原則,任何一個對照組都是為相應(yīng)的實驗組專門設(shè)立的。不得借用文獻(xiàn)上的記載或以往結(jié)果或其他研究資料作為本研究之對照。

1.5生物醫(yī)學(xué)中常用的實驗設(shè)計類型

如果需要在同一實驗中同時評價幾種不同的效應(yīng),實驗者應(yīng)該安排能區(qū)別各自效應(yīng)差別的實驗設(shè)計方法。生物醫(yī)學(xué)中常用的實驗設(shè)計有以下幾項。1.5.1完全隨機設(shè)計完全隨機設(shè)計是生物醫(yī)學(xué)動物實驗中最為常用的一種實驗設(shè)計方法,它是一種單因素有k個水平(k≥2)組的實驗設(shè)計。即實驗設(shè)計可設(shè)置一個對照或多個劑量組的實驗方案。本設(shè)計保證每個實驗動物都有相同機會接受任何一種處理,而不受實驗人員主觀傾向的影響。本設(shè)計應(yīng)用了重復(fù)和隨機化兩個原則,因此能使實驗結(jié)果受非處理因素的影響基本一致,真實反映出實驗的處理效應(yīng)。1.5.2隨機區(qū)組設(shè)計隨機化完全區(qū)組設(shè)計,簡稱隨機區(qū)組設(shè)計,又稱配伍組設(shè)計,是配對設(shè)計的擴展,它將幾個條件相同的受試者劃分在同一個區(qū)組或配伍組,然后再按隨機的原則,將同一配伍組的受試者隨機分配到各實驗組。該設(shè)計方法的優(yōu)點是每個區(qū)組內(nèi)的k個實驗單位有較好的同質(zhì)性,比完全隨機設(shè)計更容易察覺處理間的差別。這種方法須特別注意的是要求區(qū)組內(nèi)實驗單位數(shù)與處理數(shù)相同,實驗結(jié)果中若有缺失值,統(tǒng)計分析將損失部分信息。1.5.3拉丁方設(shè)計拉丁方設(shè)計從橫行和直列兩個方向進行雙重局部控制,使得橫行和直列兩向皆成區(qū)組,是比隨機區(qū)組設(shè)計多一個區(qū)組因素的設(shè)計。在拉丁方設(shè)計中,每一行或每一列都成為一個完全區(qū)組,而每一處理在每一行或每一列都只出現(xiàn)一次,也就是說,在拉丁方設(shè)計中,實驗處理數(shù)=橫行區(qū)組數(shù)=直列區(qū)組數(shù)=實驗處理的重復(fù)數(shù)。1.5.4析因設(shè)計析因?qū)嶒炘O(shè)計又稱全因子實驗設(shè)計,屬于多因素、多水平單效應(yīng)的設(shè)計。它不僅可以檢驗每一因素各水平之間的效應(yīng)差異,而且可以檢驗各因素之間的交互作用。交互作用是指一個因素不同水平間的效應(yīng)差受另一因素的影響,包括協(xié)同交互作用和拮抗交互作用。析因?qū)嶒炛饕糜诜治鼋换プ饔?,?dāng)因素及水平數(shù)過多時,所需的實驗對象數(shù)、處理組數(shù)和實驗次數(shù)大幅度增加,故一般采用較簡單的析因?qū)嶒?。含有較多因素和水平的實驗一般采用正交實驗設(shè)計[5]。

2生物醫(yī)學(xué)動物實驗的描述統(tǒng)計學(xué)

2.1生物醫(yī)學(xué)實驗資料的類型

生物醫(yī)學(xué)實驗對實驗對象(動物)進行干預(yù)后測定的觀測指標(biāo)通常有以下類型:①連續(xù)性數(shù)據(jù):測定結(jié)果表現(xiàn)為有數(shù)字大小和單位的數(shù)據(jù),統(tǒng)計上稱定量資料,如生理、生化指標(biāo),體重值,器官重量等。②分類數(shù)據(jù):測定結(jié)果表現(xiàn)為按某屬性劃分的定性類別,統(tǒng)計上稱為定性資料,具體又可以分為二值資料、多值名義資料和多值有序資料。如某反應(yīng)為出現(xiàn)或不出現(xiàn),死亡或未死亡,有畸形或無畸形;病理損害的嚴(yán)重程度(無、輕度、中度、重度)等。

2.2統(tǒng)計描述指標(biāo)

描述性統(tǒng)計學(xué)(或歸納統(tǒng)計學(xué))是對樣本觀察/測量數(shù)據(jù)頻率分布的定量研究,描述性統(tǒng)計的目的在于:①對測量值或觀察值進行歸納濃縮,用統(tǒng)計量、統(tǒng)計圖或統(tǒng)計表的形式表現(xiàn);②估計總體分布的參數(shù)。2.2.1資料的整理與探索對于某一測量指標(biāo),一般應(yīng)從文獻(xiàn)資料中了解其分布類型。如果沒有判斷概率分布的理論基礎(chǔ),應(yīng)重復(fù)以大樣本測定,繪制樣本的頻數(shù)分布圖(理論上樣本量要大于100),并經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗擬合其分布。2.2.2數(shù)據(jù)的描述統(tǒng)計量①連續(xù)性數(shù)據(jù)的頻數(shù)分布:通過對樣本資料編制頻數(shù)分布表或做莖葉圖,以確定資料分布的類型、頻數(shù)分布的集中趨勢和離散趨勢、估計總體參數(shù),也便于發(fā)現(xiàn)離群值。②中心位置的描述統(tǒng)計量:描述數(shù)據(jù)分布的集中趨勢,常用指標(biāo)為算術(shù)均數(shù)、中位數(shù)、眾數(shù)、幾何均數(shù)等。③離散程度的描述統(tǒng)計量:描述數(shù)據(jù)分布的離散趨勢,常用指標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)差和方差、極差和四分位數(shù)間距、變異系數(shù)和離散系數(shù)等。④統(tǒng)計學(xué)圖表:統(tǒng)計圖包括連續(xù)性數(shù)據(jù)分布的直方圖、莖葉圖,表示數(shù)據(jù)中心位置和離散程度的點桿圖(做圖時表示均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差)和盒須圖(做圖時表示中位數(shù)、極差、四分位數(shù)間距),描述構(gòu)成比數(shù)據(jù)資料的百分條圖、餅圖,描述經(jīng)時變化趨勢的線圖,以及預(yù)測和檢驗分布類型的概率-概率圖(P-P圖)等[6]。統(tǒng)計表具有簡單、明了、易于理解、便于比較的優(yōu)點。編制統(tǒng)計表時原則上應(yīng)當(dāng)重點突出、層次分明、避免層次過多或結(jié)構(gòu)混亂。一般的統(tǒng)計表應(yīng)為三線表,表中只有橫線,無豎線和斜線。統(tǒng)計表的標(biāo)目應(yīng)層次清楚,不宜過于復(fù)雜。

3生物醫(yī)學(xué)動物實驗的假設(shè)檢驗

生物醫(yī)學(xué)動物實驗中最常見的情況是給予不同受試物后進行組間比較,通過統(tǒng)計學(xué)中的假設(shè)檢驗,說明受試物的作用。假設(shè)檢驗時應(yīng)注意以下問題。

3.1檢驗方法的選用依據(jù)

3.1.1資料的類型和變量的數(shù)目不同類型的資料(定量、定性)的組間比較應(yīng)采用不同的統(tǒng)計檢驗方法。單變量、多變量的統(tǒng)計檢驗方法也各不相同。3.1.2實驗設(shè)計類型應(yīng)該根據(jù)實驗設(shè)計的具體類型選擇對應(yīng)的統(tǒng)計檢驗方法,以便得到處理組效應(yīng)的真實結(jié)論。3.1.3檢驗方法的前提條件選用假設(shè)檢驗方法前,應(yīng)了解所分析的數(shù)據(jù)資料是否滿足相應(yīng)檢驗方法的前提條件,如t檢驗和方差分析等參數(shù)檢驗方法要求數(shù)據(jù)滿足正態(tài)性和方差齊性,χ2檢驗要求樣本含量大于40且理論頻數(shù)大于5。

3.2正態(tài)性檢驗及擬合優(yōu)度檢驗

統(tǒng)計學(xué)假設(shè)檢驗須判定樣本的頻數(shù)分布是否符合某一理論分布,如符合要求就可按此理論分布來進行統(tǒng)計學(xué)處理。對正態(tài)分布可采用正態(tài)性檢驗,其他分布可用擬合優(yōu)度檢驗。通??赏ㄟ^查閱文獻(xiàn),了解實驗參數(shù)符合何種理論分布。

3.3方差齊性檢驗

連續(xù)性數(shù)據(jù)未達(dá)到參數(shù)法統(tǒng)計分析前提的第二種原因即為方差不齊。一般而言,數(shù)值愈大,其固有的變異性也愈大。例如,若某組動物的平均反應(yīng)值為100,其數(shù)值范圍可能為80~120;而另一組動物的平均反應(yīng)值為300,其數(shù)值范圍可能會擴大至240~360。解決方差不齊的措施是進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換。若數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)差與平均值成正比,在統(tǒng)計分析前宜將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為對數(shù)值之后再進行分析,據(jù)此,不僅數(shù)據(jù)的變異度與平均值大小無關(guān),同時還可確保其更符合正態(tài)分布。若數(shù)據(jù)變異度增加幅度與平均值的關(guān)系不太明顯,采用平方根轉(zhuǎn)換則更易使數(shù)據(jù)的變異度與平均值大小無關(guān)。某些數(shù)據(jù)經(jīng)對數(shù)或平方根轉(zhuǎn)換后可能仍存在方差不齊,此時宜采用非參數(shù)檢驗。

3.4單側(cè)檢驗與雙側(cè)檢驗

檢驗假設(shè)選擇單側(cè)檢驗或雙側(cè)檢驗,應(yīng)事先根據(jù)專業(yè)知識做出選擇。一般而言,若研究目的僅須了解是否存在組間差異、實驗者無法預(yù)測組間變化的方向以及實驗者希望獲得正負(fù)兩方面的結(jié)果時,應(yīng)采用雙側(cè)檢驗。若事先可預(yù)測組間差異的變化方向,實驗者僅對某一方面的重要性感興趣,實驗者僅希望了解與對照組差異或正或負(fù)一個方向,則應(yīng)采用單側(cè)檢驗。此外,劑量設(shè)計預(yù)試驗中應(yīng)采用雙側(cè)檢驗,正式試驗在了解相關(guān)信息后可采用單側(cè)檢驗。

3.5多重比較及多重性問題

生物醫(yī)學(xué)實驗經(jīng)常在處理組和對照組之間做多個變量的比較。即使不存在真正的實驗效應(yīng),也有可能純粹由于偶然性而有一個或多個變量在5%檢驗水平出現(xiàn)顯著性差別。除了上述均數(shù)多重比較導(dǎo)致Ⅰ類錯誤概率增加的多重性問題之外,其他的多重性問題還包括多次的中期分析、關(guān)注多個結(jié)局、亞組間的多重比較。處理多重性問題的原則包括:①預(yù)先計劃進行多重比較;②限制比較的次數(shù);③多重比較時采用更嚴(yán)格的界值標(biāo)準(zhǔn);④多重比較具有生物學(xué)方面的依據(jù)。

3.6觀察值或?qū)嶒瀸ο蟮莫毩⑿?/p>

許多統(tǒng)計檢驗方法要求比較的觀察值或?qū)嶒瀸ο笙嗷オ毩?,如二項分布的率檢驗、t檢驗和方差分析等。但是,有的生物醫(yī)學(xué)實驗中觀察單位并不獨立。例如,生殖和發(fā)育研究中就存在窩效應(yīng):由于遺傳因素、宮內(nèi)的發(fā)育環(huán)境和藥物的代謝環(huán)境相似,與異窩胎仔相比,同窩胎仔之間對毒性效應(yīng)的反應(yīng)概率趨于系統(tǒng),即同窩內(nèi)數(shù)據(jù)為聚集性數(shù)據(jù),這就是一種常見的非獨立數(shù)據(jù)。在統(tǒng)計學(xué)分析時,忽略數(shù)據(jù)的窩內(nèi)相關(guān)性具有潛在的風(fēng)險;因同窩母鼠所產(chǎn)k個胎仔的觀察值存在共性,其所提供的信息不及k個獨立的來自不同母鼠所產(chǎn)胎仔所提供的信息;窩內(nèi)相關(guān)性愈大,其信息量愈少。聚集性數(shù)據(jù)的均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤小于獨立的數(shù)據(jù),因此,若基于觀察值獨立的統(tǒng)計分析方法,就會增加犯Ⅰ類錯誤的概率,即假陽性的風(fēng)險增加,降低實驗的有效性。

3.7歷史對照數(shù)據(jù)的應(yīng)用

某些情況下,尤其是在發(fā)生率較低的情況下,單項研究可能提示處理可影響腫瘤發(fā)生率,但無法得出明確的結(jié)論??赡芟氲降姆治鲛k法之一是將處理組的數(shù)據(jù)與來自其他研究的對照組動物相比較。雖然歷史對照數(shù)據(jù)具有重要意義,但值得強調(diào)的是,眾多原因可導(dǎo)致不同研究之間的變異度大于研究之內(nèi)的變異度。動物來源、飼料及飼養(yǎng)條件,研究期限,研究中的動物死亡率、讀片的病理學(xué)家等均可能影響最終的腫瘤發(fā)生率。故此,忽視這些差異,將處理組的腫瘤發(fā)生率與合并的對照組發(fā)生率相比較,可能得出嚴(yán)重錯誤的結(jié)果,并進而明顯夸大統(tǒng)計顯著性水平。Tarone[4]曾對歷史對照組的比率數(shù)據(jù)分析進行過綜述。

3.8假設(shè)檢驗的局限性

第8篇:動物實驗方案范文

關(guān)鍵詞:大鼠; 小鼠; 疾病; 證候; 四診客觀化; 辨證; 辨證論治; 藥性

中醫(yī)藥及辨證論治的研究和發(fā)展,需要開展大量的動物實驗,其中大鼠和小鼠是最為常用的實驗動物。因此,建立大鼠和小鼠辨證論治的方法和標(biāo)準(zhǔn),成為中醫(yī)藥行業(yè)的關(guān)鍵學(xué)術(shù)問題、基本方法學(xué)問題。

1  大鼠和小鼠辨證論治標(biāo)準(zhǔn)的建立

   

大鼠和小鼠辨證論治標(biāo)準(zhǔn)的建立,涉及到一系列相互關(guān)聯(lián)的學(xué)術(shù)問題。(1)能否模擬中醫(yī)臨床,用于開展大鼠和小鼠的診法和辨證研究?大鼠、小鼠能夠采集到多少四診信息,與人類異同如何?能否滿足辨證論治需要?(2)能否實現(xiàn)其四診和辨證的標(biāo)準(zhǔn)化、計量化,如何便于操作與普及?(3)正常大鼠和小鼠是否存在體質(zhì)的差異和證候表現(xiàn);疾病大鼠和小鼠是否會自發(fā)形成證候,是否會發(fā)生證候的演變和兼夾?是否與人類近似?(4)證候形成的物質(zhì)基礎(chǔ)是什么?如何觀察?(5)能否開展大鼠、小鼠個體化的辨證論治?能否計量化地比較與評價其療效?為回答以上系列學(xué)術(shù)問題,我們開展了長達(dá)十年的研究,建立了系列標(biāo)準(zhǔn)。有關(guān)研究仍在繼續(xù),部分進展介紹如下。

1.1  大鼠和小鼠可以用來模擬中醫(yī)臨床實施四診和辨證  基于在長期動物實驗中觀察到的動物個體差異,以及中醫(yī)辨證論治理論,我們提出了大鼠和小鼠基于四診的辨證論治假說。研究證明,大鼠和小鼠是可以開展“四診”及辨證論治的[14]。比較大鼠和小鼠與人類所能采集到的所有四診信息的異同后發(fā)現(xiàn),所采集到的大鼠和小鼠四診信息,是可以滿足辨證論治需要的,具體內(nèi)容可參見《大鼠和小鼠辨證論治實驗方法學(xué)》(科學(xué)出版社)。

1.2  利用大鼠、小鼠可以實現(xiàn)四診和辨證的標(biāo)準(zhǔn)化、計量化,所建立的方法便于實驗操作與普及  我們提出大鼠和小鼠四診工作站的假說及設(shè)計原則,創(chuàng)建了四診工作站,并不斷有所調(diào)整和發(fā)展。同步開展了大量正常及荷瘤小鼠證候研究和常見不同虛證造模方法的比較研究。期間不斷檢驗、發(fā)展和完善四診工作站及其標(biāo)準(zhǔn),實現(xiàn)了基于大鼠和小鼠四診的辨證。發(fā)現(xiàn)常見虛證模型動物間存在復(fù)雜的證候差異或表現(xiàn)為復(fù)合證,證明其證候?qū)傩杂写俦孀C、再評價。在早期建立小鼠四診采集項目標(biāo)準(zhǔn)、小鼠四診工作站及其操作標(biāo)準(zhǔn)、小鼠常見證候辨證標(biāo)準(zhǔn)等的基礎(chǔ)上,進而發(fā)展出大鼠、小鼠系列診法和辨證標(biāo)準(zhǔn)。大量的實驗證明,所建立的四診工作站,有助于大鼠或小鼠的四診檢測,可以開展大樣本的動物實驗[514];有助于發(fā)展和建立標(biāo)準(zhǔn)化、計量化的四診檢測與辨證方法,實現(xiàn)計量化的辨證及療效評價。以上研究,被授權(quán)專利一項,我們出版了方法學(xué)專著《辨證論治實驗方法學(xué)——實驗小鼠診法與辨證》(上海科學(xué)技術(shù)出版社),獲得1項部級成果三等獎。

1.3  正常大鼠和小鼠存在體質(zhì)和證候的差異,常見疾病大鼠或小鼠會自發(fā)形成證候,發(fā)生證候的演變和兼夾,與人類近似  為了進一步觀察常見疾病動物是否存在“同病異證”和“異病同證”的現(xiàn)象,我們開展了大量的疾病動物實驗[1521],涉及肝癌、肺癌、胃癌等荷瘤小鼠(包括裸鼠、C57近交系小鼠、昆明種小鼠),糖耐量異常、2型和1型糖尿病及自發(fā)性糖尿病大鼠,肥胖模型大鼠,高血脂模型大鼠,不同方法造模的高血壓大鼠和自發(fā)性高血壓大鼠,以及不同方法造模的胃潰瘍大鼠、小鼠等疾病模型。發(fā)現(xiàn)與人類近似,正常大鼠或小鼠普遍存在體質(zhì)和證候的差異;不同常見疾病大鼠和小鼠普遍存在證候的自然發(fā)生、演變和兼夾,沒有必要疊加證候造模;不同疾病大鼠、小鼠既普遍存在“有是病便有是證”及程度差異,又普遍存在同病異證和異病同證。充分證明,疾病模型大鼠、小鼠的證候是可以標(biāo)準(zhǔn)化、計量化采集的,并可準(zhǔn)確地評價其證候及其嚴(yán)重程度。荷瘤小鼠早期的邪毒壅盛證預(yù)后差,這對于治未病是有意義的。

1.4  證候存在復(fù)雜的物質(zhì)基礎(chǔ),涉及神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)各組織基因表達(dá)與剪接的差異  為準(zhǔn)確和客觀揭示證候復(fù)雜的物質(zhì)基礎(chǔ),我們采用了多病種、多證候同步研究的方法。

1.4.1  疾病和證候的選擇  第一階段實驗,觀察了H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛證、氣虛證,中期陽氣虛證和中晚期氣陰陽虛證等4個常見證候(淘汰不典型或復(fù)雜兼證小鼠),與正常無證候小鼠對照。其中邪毒壅盛證、氣虛證是典型的同病異證。第二階段實驗,觀察正常、氣虛大鼠,氣盛、氣虛證自發(fā)性高血壓大鼠和自發(fā)性糖尿病大鼠(非典型證候大鼠留作它用),以及早期邪毒壅盛證、氣虛證,中期陽氣虛證、氣虛證,中晚期氣陰陽虛證、氣虛證荷瘤小鼠等(淘汰非典型證候小鼠)多病種、多階段的同病異證和異病同證。

1.4.2  檢測的目標(biāo)組織  檢測下丘腦、垂體、腎上腺、甲狀腺和組織,其中荷瘤小鼠增檢胸腺、脾臟、腫瘤,高血壓大鼠增檢腎臟,糖尿病大鼠增檢胰腺。

1.4.3  主要檢測技術(shù)  主要采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array和Rat Exon 1.0 ST Array。初步研究發(fā)現(xiàn),以上不同疾病或證候在神經(jīng)內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)及相關(guān)組織普遍存在基因表達(dá)和外顯子剪接的差異,表明同病異證和異病同證有其復(fù)雜的物質(zhì)基礎(chǔ),而外顯子表達(dá)譜芯片提供了高效可靠的檢測技術(shù)[2227]。這在多層次組織分子層面證明了證候是客觀存在的,該研究仍在進行之中。

第9篇:動物實驗方案范文

【關(guān)鍵詞】

醫(yī)學(xué)生;實驗動物福利;教育

作者單位:510515南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心

通訊作者:顧為望 E-mail:

1 實驗動物福利的提出與發(fā)展

19世紀(jì)末,隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展和社會文明的進步,動物越來越多地用于生物醫(yī)學(xué)研究的實驗中,實驗動物的福利成了人們關(guān)注的焦點。實驗動物的福利就是在以科學(xué)研究為目的的實驗動物的生產(chǎn)和使用中最大限度地保證動物健康、安樂、舒適,從而獲得客觀、科學(xué)、準(zhǔn)確的科研數(shù)據(jù)[1]。

近幾年實驗動物福利問題受到了國際關(guān)注,2008年11月,歐洲實驗動物科學(xué)協(xié)會聯(lián)盟稱,它希望更新法規(guī)以更好地保護整個歐洲的實驗動物;2010年4月,新聞報道稱,歐盟將實施動物實驗新法規(guī),新的歐盟條約中有條款提到,“聯(lián)盟國應(yīng)該給足動物應(yīng)有的福利,因為動物是有感知的生物[2]?!?/p>

落實和貫徹實驗動物福利已成為國際趨勢,是社會文明和經(jīng)濟發(fā)展到一定階段的必然產(chǎn)物,在未來建立一個國際通用的實驗動物福利標(biāo)準(zhǔn)已成為共識。

2 我國實驗動物福利的現(xiàn)狀

中國實驗動物科學(xué)的起步很晚,基礎(chǔ)很差,但自80年代以來發(fā)展迅速,前國際實驗動物科學(xué)委員會主席羅塞爾曾感慨道:“我親眼看到中國的實驗動物科技事業(yè)在不到十年的時間里,走完了西方國家半個世紀(jì)的路程?!北M管我國的實驗動物科學(xué)突飛猛進,有關(guān)政策及標(biāo)準(zhǔn)不斷完善,實驗動物福利問題引起越來越多的重視,但在維護實驗動物福利方面,我國與國外相比有很大的差距。

我國的實驗動物福利只有相關(guān)的管理辦法和部分條款,可操作性不強,缺乏明確具體的處罰規(guī)定,導(dǎo)致人們普遍漠視實驗動物福利;在教學(xué)中,由于施教者動物福利意識的淡漠,并不會在涉及到動物實驗的實際操作和演示中向?qū)W生傳達(dá)有關(guān)維護動物福利的信息,而給學(xué)生造成實驗動物只是一種資源和工具的印象:動物在清醒的狀態(tài)下或未麻醉徹底就進行操作、實驗結(jié)束后不給予人道處死使動物在巨大的痛苦中逐漸死亡、在垃圾堆中也時常會看到奄奄一息的實驗動物,這些場面令人極為難受;只有少數(shù)實驗性專業(yè)和研究生教學(xué)中開設(shè)實驗動物學(xué)課程,導(dǎo)致醫(yī)學(xué)生對實驗動物福利缺乏認(rèn)識,甚至毫無概念,在實際操作中不能切實維護實驗動物福利,其中有些人甚至無視實驗動物的痛苦,戲弄甚至傷害它們。目前情況,因為沒有受到正規(guī)的實驗動物福利教育,大部分醫(yī)學(xué)生在設(shè)計實驗和實際操作時根本不會顧及到實驗動物的感受。

3 重視醫(yī)學(xué)生實驗動物福利教育的意義

3.1 培養(yǎng)術(shù)德兼?zhèn)涞暮细袢瞬诺男枰?/p>

“大醫(yī)精誠”,“精”指專業(yè)熟練,“誠”指品德高尚。所謂“大醫(yī)”,除了高超精湛的醫(yī)術(shù),還要仁慈博愛,悲天憫人。仁慈博愛方能做到“以天地之心為己心,視人之子猶己之子,勿以勢利之心易之”,悲天憫人方能做到深切同情,感同身受,以人為本,尊重生命。醫(yī)學(xué)生在學(xué)習(xí)階段,生理、病理、毒理、解剖、外科手術(shù)等多門課程都要涉及實驗動物,畢業(yè)后無論從事科研還是臨床,依然離不開實驗動物,如果對動物的痛苦和福利漠視,縱使可以“精術(shù)”,卻很難“立德”,更難以確保對病患“一視同仁,貴義賤利”、“一心赴救,視病猶親”、“廉潔淳良,不唯名利”、“寬厚仁和,傾誠無忌”,有“術(shù)”無“德”是教育的失敗,更是社會的損失。

3.2 有助于醫(yī)學(xué)生道德上的自我完善

殘忍的對待實驗動物會使人墮落。同情和憐憫是人性的組成部分,人類如果對動物殘忍,就會鈍化和減弱他們對動物的痛苦的惻隱之情,進而在與別人交往的過程中,弱化甚至泯滅自身可以助人的本性。對動物殘忍實際上是“恃強凌弱”,長期如此,這種心理和行為會投射到人類內(nèi)部,演變成強勢個體虐待弱勢個體,喪失良知、愛心和同情心。

3.3 提高醫(yī)學(xué)生的思辨能力

加強醫(yī)學(xué)生的實驗動物福利教育,還有助于他們學(xué)會辯證地、科學(xué)地思考問題。動物福利和動物利用是對立統(tǒng)一的兩個方面。提倡動物福利,不等于人類不能利用動物,不能做任何的動物實驗,重要的是應(yīng)該怎么合理、人道地利用動物,怎樣科學(xué)地設(shè)計實驗使實現(xiàn)研究目的所使用的實驗動物數(shù)量降低到最少,怎樣改善條件使飼養(yǎng)和使用過程中實驗動物受到的損傷和痛苦最小,著名的“3R”原則就是在平衡科研欲求與動物痛苦的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的。

3.4 獲得準(zhǔn)確、真實、可靠的實驗結(jié)果的需要

動物實驗?zāi)軌蛟卺t(yī)學(xué)科學(xué)研究中發(fā)揮重要作用,前提是必須選擇符合標(biāo)準(zhǔn)的、健康的、遺傳背景清楚的實驗動物,同時還要排除各種干擾因素,消除不利影響。受污染、受虐待以及發(fā)育不良、營養(yǎng)欠佳的實驗動物用于實驗,其結(jié)果必然失去準(zhǔn)確性、真實性和可靠性,甚至得出錯誤的結(jié)論。此外,實驗實施之前,如果對動物進行溫柔地?fù)嵛?,動物會顯得比較平和、溫順,有的甚至能配合操作者進行實驗;反之,如果操作者態(tài)度惡劣、動作野蠻粗暴,動物也會產(chǎn)生反抗情緒,有時動物會有意與人作對,拒不配合,實驗很難繼續(xù)進行,即使勉強進行下去,也得不到真實、準(zhǔn)確的實驗結(jié)果[3]。

3.5 發(fā)表學(xué)術(shù)文章的角度

為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,以及符合一定的社會倫理原則,嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)刊物在接受和發(fā)表涉及實驗動物的文章時,都要求動物的來源、飼養(yǎng)和操作等遵循相應(yīng)的法律、法規(guī)或條例[3],比如《CELL》的投稿規(guī)定,當(dāng)實驗動物是脊椎動物或更高級的動物時,在實驗操作部分中要有明確的實驗方案得到專門委員會認(rèn)可的陳述;《NATURE》雜志對作者的要求與《CELL》的基本一致;《Biology of Reproduction》的投稿須知更詳細(xì),其中提及了美國三個部門對受試動物管理和愛護等方面的規(guī)章。因此,從發(fā)表學(xué)術(shù)文章的角度也應(yīng)該加強醫(yī)學(xué)院校學(xué)生的實驗動物福利教育。

3.6 打破貿(mào)易壁壘的制約

目前中國的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)蓬勃發(fā)展,中國成為新藥研發(fā)中心的必備因素都已具備[4],需要大量的醫(yī)學(xué)生從事生物技術(shù)研究和承接生物醫(yī)藥合同外包服務(wù),而藥品的檢定中實驗動物的質(zhì)量以及福利狀況都會影響對外貿(mào)易。因此,我國加入WTO后,必須重視實驗動物福利,加強醫(yī)學(xué)生的實驗動物福利教育,否則這將成為制約我國對外貿(mào)易的技術(shù)壁壘[5]。

3.7 人類有善待實驗動物的責(zé)任

實驗動物作為特殊的動物群體是生物醫(yī)學(xué)研究不可缺少的基礎(chǔ)和支撐條件,實驗動物以及較早的普通動物對生命科學(xué)特別是醫(yī)學(xué)的發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn),從1901年到2006年總共106年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎中,70年的獲獎直接涉及25種動物,其中常規(guī)實驗動物如小鼠、大鼠、兔、犬、豚鼠、地鼠、貓、豬、猴、雞、蛙的使用頻率是91次,非常規(guī)實驗動物如鳥類、馬、魚、蛇、果蠅、蜜蜂、線蟲等是27次。過去半個世紀(jì)的醫(yī)學(xué)與獸醫(yī)學(xué)的進步大于人類歷史上的任何時期,假如沒有進行涉及動物的實驗工作,這種進步是不可能的[3]。

3.8 體現(xiàn)社會文明的進步

一個國家的國民對待動物的態(tài)度如何,是衡量一個社會文明程度的重要標(biāo)志。人類是地球上最具智慧和潛能的生命,但人類也歸屬于動物大家庭,與其他動物共享這個星球,而沒有“主宰”其他動物的權(quán)利。隨著社會文明的進步,人類應(yīng)當(dāng)擴大關(guān)懷的范圍,設(shè)身處地考慮動物的處境,善待動物,尤其應(yīng)善待對人類有著巨大貢獻(xiàn)的實驗動物,尊重生命,盡量減少動物不必要的痛苦。愛因斯坦說:“我們的任務(wù)是一定要解放我們自己,這需要擴大我們同情的圈子,包容所有的生靈,擁抱美妙的大自然?!奔訌娽t(yī)學(xué)生的實驗動物福利教育,是社會文明進步的需求。

4 如何加強醫(yī)學(xué)生的實驗動物福利教育

4.1 普遍開設(shè)實驗動物學(xué)課程,加大實驗動物福利教學(xué)比例

實驗動物福利的內(nèi)容作為實驗動物學(xué)這門課程的重要組成部分,可以貫穿實驗動物學(xué)的各個方面予以強調(diào)突出,生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、護理學(xué)專業(yè)以及其他有關(guān)生命科學(xué)的在校生,包括??粕?、本科生、研究生,都應(yīng)把實驗動物學(xué)和實驗動物福利的內(nèi)容作為必修的課程;各門學(xué)科的教學(xué)中凡涉及到動物實驗部分,始終貫徹“3R”原則:即替代、減少、優(yōu)化,將科學(xué)發(fā)展的需要與實驗動物福利相結(jié)合,闡明如何科學(xué)合理地使用實驗動物。

4.2 發(fā)揮教師的主導(dǎo)作用,加強實驗動物福利教學(xué)

切實保障實驗動物福利,要做到知行合一。這要求培訓(xùn)教師本身具有較高的素質(zhì),師資隊伍比較穩(wěn)定,身教勝于言教,首先教師要加強自身對動物福利內(nèi)涵的認(rèn)識,定期接受以實驗動物福利規(guī)章制度、相關(guān)技術(shù)為主的培訓(xùn),在實際的教學(xué)工作中以身作則,通過言傳身教對學(xué)生產(chǎn)生影響,潛移默化中使動物福利的觀念和意識深入人心;涉及到動物實驗時,在實驗的設(shè)計和實驗動物的使用上做到最大程度的科學(xué)、合理并兼顧仁愛,同時依據(jù)自身條件并參照相關(guān)法規(guī)建立符合實際情況的、切實可行的實驗動物福利制度,遵照執(zhí)行。

4.3 定期開展講座,廣泛宣傳教育

醫(yī)學(xué)院校成立實驗動物保護協(xié)會,定期宣講實驗動物福利理念,對本校教師和學(xué)生以及社會民眾普及實驗動物福利知識,舉行祭奠實驗動物的儀式等,以促進培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生、科研工作者和全體教職員工善待動物、尊重生命的觀念,同時近一步敦促全社會推動實驗動物福利事業(yè)的發(fā)展[6]。

綜上,重視并保障實驗動物福利是科學(xué)文明社會發(fā)展的必然結(jié)果,對醫(yī)學(xué)生進行實驗動物福利教育意義重大,無論是從高校培養(yǎng)高素質(zhì)合格人才的角度,還是為了醫(yī)學(xué)生自身的完善和發(fā)展,加強實驗動物福利教育都勢在必行,刻不容緩。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 賀爭鳴,李根平,李冠民,等.實驗動物福利與動物實驗科學(xué).北京:科學(xué)出版社,2011:13.

[2] 王寧,王蕭,王金林.基于動物福利的實驗動物管理.第九屆中國實驗動物科學(xué)年會論文集,2010:522.

[3] 秦川.醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:152-153,13,8.

[4] 盧勝明,趙德明.中國實驗動物產(chǎn)業(yè)化發(fā)展現(xiàn)狀及方向研究. 實驗動物科學(xué),2008,25(4):33-44.