動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究全文(5篇)

1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在開展生物醫(yī)學(xué)研究時(shí)，研究者通過正確地運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)知識，可直接影響研究的質(zhì)量。統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì)的任務(wù)在于對研究的部署、實(shí)施，直到研究結(jié)果的解釋進(jìn)行系統(tǒng)的安排，力爭做到以最少的人力、物力獲得可靠的結(jié)論和信息。其目的在于確定某種處理是否會(huì)表現(xiàn)出某種特定的效應(yīng)。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循惟一差異原則，即在進(jìn)行兩組比較時(shí)，兩者之間僅有因處理因素不同而引起的差異，而其他實(shí)驗(yàn)條件相關(guān)的非處理因素都應(yīng)保持等同。然而，處理組與對照組在反應(yīng)上表現(xiàn)出的差別并不一定意味著是處理的結(jié)果。另有兩種引起差別的可能性，即偏倚和偶然性。偏倚是指系統(tǒng)性差別，它不是因組間在處理上的不同所引起。生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中統(tǒng)計(jì)學(xué)設(shè)計(jì)和分析的目標(biāo)就是消除潛在的偏倚，減少偶然性[2]。

1.1實(shí)驗(yàn)的偏倚和控制

偏倚是在研究中從設(shè)計(jì)到實(shí)驗(yàn)實(shí)施和結(jié)果分析的各環(huán)節(jié)存在一些人為的、有系統(tǒng)傾向的非隨機(jī)誤差，它不是由于抽樣造成的，而是某種偏性使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離它的真值。從所選擇的生物醫(yī)學(xué)問題到研究方案的制訂與實(shí)施、實(shí)驗(yàn)的完成過程、實(shí)驗(yàn)的分析與解釋，乃至實(shí)驗(yàn)結(jié)果的發(fā)表，均可能存在各式各樣的偏倚[2]。這種偏倚常常表現(xiàn)為系統(tǒng)誤差。偏倚的大小取決于研究的方法和具體的實(shí)驗(yàn)條件。常見的偏倚主要有選擇性偏倚、觀察性偏倚和混雜性偏倚。必須認(rèn)識實(shí)驗(yàn)過程的偏倚，從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)起直到整個(gè)研究過程結(jié)束均要加以控制。正確的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可控制選擇性的偏倚，事前人為控制和采取相應(yīng)的措施可避免和減少觀察性的偏倚。對于混雜性偏倚，可將重要的混雜因素在設(shè)計(jì)階段進(jìn)行分層隨機(jī)設(shè)計(jì)，使混雜因素在組間分布均衡；在統(tǒng)計(jì)分析階段將混雜因素作為分層因素或采用有協(xié)變量分析方法，以消除混雜因素的影響。只有有效地控制或消除偏倚，方可減少結(jié)果的假陽性或假陰性。

1.2減少偶然性的潛在影響

偶然性因素的作用可以減少，但不能完全排除。因?yàn)榧词故窃诰膶?shí)施的研究中，接受同樣處理的動(dòng)物，其反應(yīng)也不可能完全一樣。適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析可使實(shí)驗(yàn)人員評估出現(xiàn)假陽性的概率，即根本不存在處理效應(yīng)的情況下觀察到差異的概率。這種概率越小，實(shí)驗(yàn)者發(fā)現(xiàn)真實(shí)效應(yīng)的可能性就越大。為了更有把握地檢測出真實(shí)效應(yīng)，有必要減少偶然性的作用，并通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確保能在“噪聲”之上識別真正的“信號”。

1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要素

摘要：防疫工作一直是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全管理的重要環(huán)節(jié)。根據(jù)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)以及清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的具體情況，采取6項(xiàng)有效措施，探索了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全管理模式，建立了安全、健康的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全管理體系，提升了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專業(yè)技術(shù)服務(wù)水平和科研支撐能力，有效地保障了實(shí)驗(yàn)教學(xué)及科學(xué)研究的順利開展。

關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；防疫工作；生物安全；安全管理

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)研究的重要支撐條件[1]，在歐美、日本等世界發(fā)達(dá)國家都有著50年以上長足的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物硬件條件和行業(yè)管理規(guī)范也已經(jīng)非常完善，具備先進(jìn)的微生物檢測和控制水平，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量也越來越高，比如嚙齒類動(dòng)物都已普及到無特定病原體（specificpathogenfree，SPF）級[2]。我國從1988年國家科委《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》以來，也逐漸建立了法制化、規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化的管理體制[3]。尤其是近10年來，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)研究中的重要作用越發(fā)凸顯出來，與國外發(fā)達(dá)國家逐漸飽和并略有降低的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量趨勢不同的是，我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量成倍增長，高校與科研院所、醫(yī)藥企業(yè)都相繼投入大量人力、物力、財(cái)力，建設(shè)了越來越多的大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施，設(shè)施規(guī)模、硬件配備都已經(jīng)與歐美等發(fā)達(dá)國家比肩。隨著設(shè)施規(guī)模的擴(kuò)大和數(shù)量的增多，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員也迅速增加，而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)方式，尤其是嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，大多是以高度密集化的方式進(jìn)行飼養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，如采用獨(dú)立通氣式籠具（individualventilatedcages，IVC）使得單位空間飼養(yǎng)量比常規(guī)飼養(yǎng)方式提高了近兩倍。在我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用的種類、數(shù)量迅速增加的同時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量也在逐漸提高[4]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)供應(yīng)專業(yè)化、規(guī)?；惭杆侔l(fā)展。但與之相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物檢測手段、檢測水平以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物質(zhì)量與西方發(fā)達(dá)國家還有一定距離，具體表現(xiàn)在嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用質(zhì)量還一直停留在清潔級水平，SPF級供應(yīng)量和使用量比例還很低，另外國家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和寄生蟲檢測病原種類和檢測方法還存在一定差距[5]?？梢哉f，我國大規(guī)模的繁育和使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全管理帶來越來越多的風(fēng)險(xiǎn)和挑戰(zhàn)。

1近年來實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全問題的事故案例

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全是指對實(shí)驗(yàn)中使用的動(dòng)物可能存在的風(fēng)險(xiǎn)與危害進(jìn)行相應(yīng)的防范和控制，其中存在的生物安全隱患包括繁育、運(yùn)輸、抓取、麻醉、采血等[6]。此外使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，在風(fēng)險(xiǎn)評估中要充分考慮動(dòng)物源性感染性微生物的傷害特征。有證據(jù)顯示，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物還能通過唾液、尿液和糞便散布動(dòng)物源性、感染性微生物和其他的感染性因子[7]?？傊畬?shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全問題一直伴隨著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的發(fā)展，成為揮之不去的陰影。尤其是最近國際權(quán)威雜志《自然》對我國兩家科研機(jī)構(gòu)近百名的科研人員和研究生同時(shí)被發(fā)現(xiàn)感染了實(shí)驗(yàn)室源性布魯氏細(xì)菌事件發(fā)表評述并提醒業(yè)界關(guān)注。2019年12月7日，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所確認(rèn)96名教職員工和學(xué)生的布魯氏菌感染呈陽性。隨后12月10日黑龍江省衛(wèi)健委官方網(wǎng)站也確認(rèn)在哈爾濱獸醫(yī)研究所的13名學(xué)生也感染了該布魯氏菌，他們是曾經(jīng)去蘭州獸醫(yī)研究所實(shí)習(xí)過的49名學(xué)生中的13名?！蹲匀弧愤€披露早在2011年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名學(xué)生和員工被教學(xué)用山羊布魯氏菌感染的事件[8-9]。有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獲得性病原感染事件在國內(nèi)外引起的實(shí)驗(yàn)室生物安全事件在媒體和雜志上屢見報(bào)道。如何明忠等[10]2004年對實(shí)驗(yàn)室感染流行性出血熱調(diào)查顯示，20世紀(jì)末全國各地實(shí)驗(yàn)大鼠和工作人員進(jìn)行流行性出血熱感染檢測的陽性率都非常高；2003年北京某實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)操作過程中感染SARS病毒并引起一定范圍內(nèi)傳染事件；2004年天津某醫(yī)院收治9位來自同一實(shí)驗(yàn)室工作人員感染流行性出血熱病例[11]；2006年長春某高校中藥系實(shí)驗(yàn)室76名實(shí)驗(yàn)學(xué)生中發(fā)生10名感染流行性出血熱事件[12]；2009年法國食品衛(wèi)生安全署的科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中對動(dòng)物病體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究時(shí)，意外感染致命性炭疽病菌，受感染的5名人員被緊急隔離至醫(yī)院監(jiān)控以及治療[13]；2011年，芝加哥大學(xué)實(shí)驗(yàn)室一研究員因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物而引發(fā)皮膚感染蠟狀芽孢桿菌[14]。以上這些案例的發(fā)生表明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全管理工作必須引起高度重視。本文以清華大學(xué)為例，對高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全管理模式進(jìn)行了探究。

2清華大學(xué)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全管理方面的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)

隨著高校開展一流大學(xué)和一流學(xué)科（雙一流）的建設(shè)，生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等方面的科學(xué)研究也得到了快速發(fā)展[15-16]，從而對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)的服務(wù)和管理提出了新的要求和挑戰(zhàn)。我校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（以下簡稱“動(dòng)物中心”）作為學(xué)校15個(gè)校級平臺之一，始建于2007年，是我?！笆晃濉逼陂g重點(diǎn)建設(shè)的校級平臺。我們在分析總結(jié)國內(nèi)外各單位的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，作出了適用于我國高?？茖W(xué)研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)的探索和嘗試。動(dòng)物中心現(xiàn)有一期動(dòng)物設(shè)施建筑面積2900m2，2009年9月正式投入使用，小鼠IVC籠位2萬個(gè)、大鼠IVC籠位300個(gè)、家兔100籠位；二期動(dòng)物設(shè)施建筑面積4700m2，2019年11月份投入使用，小鼠IVC籠位3.5萬個(gè)。目前為校內(nèi)18個(gè)院系、近300個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究項(xiàng)目提供技術(shù)服務(wù)保障。由于每天進(jìn)出動(dòng)物設(shè)施的工作人員和師生近600人次，因此做好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全防疫工作至關(guān)重要。動(dòng)物中心運(yùn)行10年來，在學(xué)校實(shí)驗(yàn)室管理處、生命科學(xué)學(xué)院、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用與管理委員會(huì)（InstitutionalAnimalCareandUseCommittee，IACUC）和北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦公室的指導(dǎo)下，動(dòng)物中心的生物安全防疫工作管理制度逐步得到完善和落實(shí)，形成了一套嚴(yán)密的防止動(dòng)物疫情發(fā)生和對動(dòng)物進(jìn)行醫(yī)護(hù)的管理制度。動(dòng)物中心在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全管理方面主要實(shí)施了以下6項(xiàng)有效措施。

摘要：中醫(yī)藥治療潰瘍性結(jié)腸炎（UC），在病因病機(jī)，治法治則，實(shí)驗(yàn)研究方面取得了較大進(jìn)展。潰瘍性結(jié)腸炎多以本虛標(biāo)實(shí)為根本，外邪、血瘀、情志等為誘因。中醫(yī)的治療多從分期與分型出發(fā)。目前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中醫(yī)藥能有效抑制炎癥細(xì)胞的浸潤，起到治療UC的作用。

關(guān)鍵詞：潰瘍性結(jié)腸炎；病因病機(jī)；治法；實(shí)驗(yàn)研究

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是消化系統(tǒng)的常見疑難病，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對UC的病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確。近年來在我國此病的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，中醫(yī)對此病的治療積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。根據(jù)其發(fā)病的主要癥狀特點(diǎn)，此病大體上相當(dāng)于中醫(yī)的“下利”“久瀉”“久痢”“腸癖”“痢疾”等范疇?，F(xiàn)通過收集近5年中醫(yī)藥治療UC的文獻(xiàn)，總結(jié)UC的病因病機(jī)、治法及實(shí)驗(yàn)研究，希望能初步構(gòu)建治療UC框架，對提高UC的診治水平有一定的幫助。

1病因病機(jī)

目前，西醫(yī)學(xué)認(rèn)為潰瘍性結(jié)腸炎的病因?qū)W尚不明確。一般與免疫異常有關(guān)，寄生蟲、腸道細(xì)菌、病毒感染、精神創(chuàng)傷、遺傳等可能為誘發(fā)因素。戴寶林[1]認(rèn)為UC多屬本虛標(biāo)實(shí)之象，以脾胃虛弱為發(fā)病之本，濕熱是致病之標(biāo)，血瘀為局部病理損害。危北海等[2]認(rèn)為本病多因初起外邪留滯于大腸，郁熱破血致病。其病變可涉及氣分與血分。初期多屬氣分，久病則在血分。焦君良等[3]認(rèn)為本病是因局部毒邪壅滯，產(chǎn)生包括各種致病因素的毒邪以及病理產(chǎn)物的毒邪，阻礙氣機(jī)，導(dǎo)致經(jīng)絡(luò)阻塞，氣血凝滯。病延日久，必將毒瘀壅滯，進(jìn)而化瘀成癰，損及臟腑，耗傷正氣，而使病情反復(fù)發(fā)作遷延不愈。并提出了“從癰論治”治療觀。俞宜年等[4]認(rèn)為潰瘍性結(jié)腸炎屬于“久瀉、腹痛”范疇，臨床多見氣血同病，多以腎陽虧虛為本，以肝郁、濕熱、血瘀等為標(biāo)。

2治法

2.1分期論治王新月

摘要根據(jù)膿毒癥30的定義，膿毒癥是宿主對感染的反應(yīng)失控導(dǎo)致危及生命的器官功能衰竭。膿毒癥相關(guān)性腦病是由膿毒癥導(dǎo)致的非中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的彌漫性腦功能障礙，其表現(xiàn)形式多樣，主要包括神志異常，激動(dòng)易激惹，譫妄，昏迷等，幸存者恢復(fù)期亦有長期記憶損害等并發(fā)癥。目前該病的發(fā)病機(jī)制、診斷標(biāo)準(zhǔn)尚不明確，亦無特異性的治療方法。中醫(yī)在膿毒癥相關(guān)性腦病的治療中具有辨證施治的優(yōu)勢，可針對本病不同的癥狀和階段處方用藥，然而中醫(yī)藥在這方面的研究尚存不足，需進(jìn)一步深入探討本病的病因病機(jī)，對中醫(yī)藥的治療機(jī)制進(jìn)行深入研究。

關(guān)鍵詞膿毒癥相關(guān)性腦?。话l(fā)病機(jī)制；中醫(yī)；研究思路

1膿毒癥相關(guān)性腦病的發(fā)病機(jī)制

1.1大腦信號傳遞障礙

膿毒癥時(shí)機(jī)體釋放出大量的炎性反應(yīng)因子，從而激發(fā)應(yīng)激反應(yīng)［34］。引發(fā)炎性以及抗炎性反應(yīng)因子，如NO、趨化因子、促炎因子等。這些因子將直接或間接作用于小膠質(zhì)細(xì)胞、星型膠質(zhì)細(xì)胞以及神經(jīng)元，使得神經(jīng)傳遞以及調(diào)節(jié)和神經(jīng)分泌的紊亂［5］。一些炎性反應(yīng)因子還可以作用于其他的大腦結(jié)構(gòu)產(chǎn)生病態(tài)行為如活動(dòng)減少，厭食，沮喪和認(rèn)知缺失等［6］。

1.2微循環(huán)障礙

膿毒癥時(shí)內(nèi)毒素和炎性細(xì)胞因子使內(nèi)皮細(xì)胞選擇素、血管細(xì)胞粘附分子和細(xì)胞間粘附分子的表達(dá)增加。在炎性遞質(zhì)的作用下內(nèi)皮細(xì)胞激活，使血管張力改變，并導(dǎo)致微循環(huán)和凝血功能障礙，這將引起缺血性或出血性損傷［79］。

［摘要］病理生理學(xué)的研究對象涉及到所有臨床疾病，主要討論疾病發(fā)生、發(fā)展過程中功能和代謝改變的規(guī)律及其機(jī)制。理論知識源于實(shí)驗(yàn)研究，病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)是理論課程的延伸，對于聯(lián)系醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程與臨床課程具有重要意義。中醫(yī)藥院校的病生實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中會(huì)遇到一些常見問題，推動(dòng)教學(xué)改革就需要深入探討注意事項(xiàng)，優(yōu)化教學(xué)方法，完善考核機(jī)制。

［關(guān)鍵詞］病理生理學(xué)；整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；教學(xué)方法；考核機(jī)制

病理生理學(xué)是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程，與生理學(xué)、生物化學(xué)、病理學(xué)和內(nèi)科學(xué)等基礎(chǔ)、臨床課程緊密聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是醫(yī)學(xué)教育體系的重要支撐，與理論課相輔相成，病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)是病生課程的有機(jī)組成，通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)合病例討論共12學(xué)時(shí)的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生加深對疾病的發(fā)生機(jī)制、機(jī)體的代謝變化等知識掌握。

一、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，注重?shí)驗(yàn)形式

病理生理學(xué)與疾病密切相關(guān)，因此病生實(shí)驗(yàn)主要從復(fù)制疾病的角度設(shè)計(jì)。學(xué)生通過具體操作、觀察現(xiàn)象、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果等，提高實(shí)踐技能和綜合能力。一般疾病模型包括三種：整體動(dòng)物模型、離體器官模型、離體細(xì)胞模型。中醫(yī)藥院校的病生實(shí)驗(yàn)以家兔和小鼠作為整體動(dòng)物模型設(shè)計(jì)了實(shí)驗(yàn)。整體動(dòng)物模型可以全面體現(xiàn)臨床疾病的特點(diǎn)，最能體現(xiàn)人類疾病特征。但是動(dòng)物與人體仍然存在很大差距，具有個(gè)體差異性，隨機(jī)性，實(shí)驗(yàn)條件難以完全一致，所以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果僅供參考，具體的方法要在臨床實(shí)踐之后再用于人類疾病的治療。學(xué)生以分組的形式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，旨在提高實(shí)踐能力、操作能力、團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力等。由帶教老師講解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，教輔老師維持課堂秩序，巡視各組的操作情況，及時(shí)解決遇到的問題。

二、細(xì)化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，記錄實(shí)驗(yàn)過程

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，指導(dǎo)老師先講授實(shí)驗(yàn)原理及注意事項(xiàng)，回顧課堂知識，與理論結(jié)合，明白實(shí)驗(yàn)?zāi)康模煜?shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)流程。