微生物采樣方案精選(九篇)

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第1篇：微生物采樣方案范文

隨著人民生活水平的提高，社會的進(jìn)步，食品中微生物污染造成的食品安全問題也越來越受到廣大消費(fèi)者、食品企業(yè)、政府監(jiān)管部門的關(guān)注。在此大環(huán)境下，食品加工企業(yè)要不斷提高企業(yè)管理水平，保證所生產(chǎn)出的產(chǎn)品安全合格，而此次主題就由訾雅靜老師對食品中的致病菌和如何控制微生物進(jìn)行講解。

微生物的種類、特點(diǎn)和危害

微生物是一切微小生物的統(tǒng)稱，包括細(xì)菌、霉菌、酵母菌、真菌、病毒和少數(shù)澡類等。其主要特點(diǎn)有以下五個方面：一、個體微小，結(jié)構(gòu)簡單；二、生存環(huán)境可塑性大，在-10℃～80℃、酸性、堿性，高鹽等條件下都有適合生長的微生物；三、分布廣、品類多、數(shù)量巨大、無處不在；四、繁殖快，例如大腸桿菌在20min以內(nèi)繁殖一代，一晝夜最少也可繁殖出72代，數(shù)量非常巨大五、易變異、易培養(yǎng)、適應(yīng)性強(qiáng)。

微生物是食品加工中最主要的危害之一，其中尤以致病菌為甚。條件致病菌污染食物或食品微生物超標(biāo)會造成食品的腐敗、變質(zhì)，而人們食用被污染、腐敗、變質(zhì)的食物后，會出現(xiàn)發(fā)燒、腹瀉、中毒等癥狀，更有甚者會危及生命。GB 29921食品中致病菌的介紹及限量

為了控制食品中致病菌的污染，預(yù)防食源性疾病的發(fā)生，國家衛(wèi)計(jì)委委托國家食品安全風(fēng)險評估中心起草了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中致病菌限量》GB 29921-2013標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)于2014年7月1日由國家衛(wèi)計(jì)委正式頒布實(shí)施。

該標(biāo)準(zhǔn)用以監(jiān)督管理生產(chǎn)加工企業(yè)的產(chǎn)品中微生物的情況，其中對主要致病菌進(jìn)行了簡介并對肉制品中的致病菌指標(biāo)做出限量。

沙門氏菌：據(jù)統(tǒng)計(jì)，由沙門氏菌引起的食物中毒在世界各國的細(xì)菌性食物中毒中常列榜首，沙門氏菌引發(fā)常引發(fā)細(xì)菌性食物中毒，其中以鼠傷寒，腸炎和豬霍亂桿菌為常見菌種。其感染過程主要是大量活的沙門氏菌進(jìn)入消化道后在腸道繁殖，釋放出毒素，導(dǎo)致人體或動物出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、發(fā)燒等癥狀；污染源主要是帶菌的人或家畜的糞便、血液等。沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，而且其生命力頑強(qiáng)，在糞便中可存活1～2月，在冰箱中可生存3～4個月，在土壤中可過冬。GB 29921中沙門氏菌為二級采樣方案，限量指標(biāo)為：n=5，c=0，m=0。

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌：人畜共患病原菌，最適生長條件為35～37℃。該菌是一種細(xì)胞內(nèi)的寄生菌，主要通過眼及破損皮膚、粘膜、腸道進(jìn)入體內(nèi)，從而入侵細(xì)胞免疫系統(tǒng)，可能造成呼吸急促、嘔吐、發(fā)燒、抽搐、昏迷等情況，還可能引發(fā)腦膜炎、化性結(jié)膜炎，敗血癥，甚至造成死亡。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌廣泛存在于自然界中，生存環(huán)境適應(yīng)范圍大。其對營養(yǎng)要求不高，在酸性、堿性，低溫條件都可生存，在4℃的環(huán)境中仍可生長繁殖，故而在食品中檢出比例大。GB 29921中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌為二級采樣方案，限量指標(biāo)為：n=5，c=0，m=0。

金黃色葡萄球菌：人類的一種重要病原菌，有嗜肉菌之稱，可引起許多嚴(yán)重感染，如肺炎、偽膜性腸炎、心包炎、敗血癥、膿毒癥等全身性感染。金黃色葡萄球菌分布廣，空氣、水、灰塵、人或動物的排泄物等為常見污染源，其最適生長溫度為37℃，干燥環(huán)境下可存活數(shù)周。在中性環(huán)境下金黃色葡萄球菌生長最快（20min，2的n次方，幾何基數(shù)遞增），且具有高度耐鹽性（10～15%），可以產(chǎn)生腸毒素（50%～70%）耐100℃煮沸30m不被破壞。在GB 29921中金黃色葡萄球菌為三級采樣方案，限量指標(biāo)為：n=5，c=1，m=100CFU/g，M=1000CFU/g。

大腸埃希氏菌O157：H7：大腸桿菌的一個類型。該病菌常見于牛等溫血動物腸內(nèi)，會釋放一種強(qiáng)烈毒素，并可導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重出血性腹瀉，更有甚者會伴發(fā)溶血尿毒綜合癥，危及生命。一旦感染，將造成嚴(yán)重疫情。大腸埃希氏菌O157：H7可經(jīng)食物和水在人群中廣泛傳播，具有較強(qiáng)的耐酸性、耐低溫，最適生長溫度為33～42℃，廣泛分布于水和土壤中，甚至可以在一小部分養(yǎng)牛場的健康肉牛腸道內(nèi)檢出，易增加屠宰過程中牛肉受到污染的可能。因此，在牛肉制品中的風(fēng)險最高。大腸埃希氏菌O157：H7在GB 29921中為二級采樣方案，限量指標(biāo)為：n=5，c=0，m=0；（僅適用牛肉制品）

通過對幾類致病菌特點(diǎn)、習(xí)性、危害的簡單了解，可以發(fā)現(xiàn)帶菌的人、動物糞便、血液雜物和被污染的水、土壤、空氣、接觸面等因素是大腸、沙門氏菌和單增李斯特氏菌的主要污染源；而膿包是金黃色葡萄球菌最主要的污染源。生產(chǎn)過程中如何控制減少微生物

國家衛(wèi)計(jì)委于2014年6月實(shí)施了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品生產(chǎn)通用衛(wèi)生規(guī)范》GB14881-2013，以規(guī)范企業(yè)的生產(chǎn)行為，防止食品生產(chǎn)過程中的各種污染，控制潛在危害。希望通過該規(guī)范提高從業(yè)人員的衛(wèi)生意識，促進(jìn)食品行業(yè)管理方式的進(jìn)步，提高監(jiān)管效率，保障消費(fèi)者健康。

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品生產(chǎn)通用衛(wèi)生規(guī)范》從廠房布局、設(shè)備設(shè)施、人員衛(wèi)生等各個方面做出了非常全面的規(guī)定。但是，在實(shí)際生產(chǎn)過程中仍有幾方面容易被忽略。

第一、環(huán)境衛(wèi)生，廠房功能布局。廠房選址要求對食品無顯著污染，其功能布局、流程需符合食品衛(wèi)生操作要求。企業(yè)的生產(chǎn)條件不盡相同，需根據(jù)自身情況設(shè)置布局，從而降低環(huán)境中微生物對食品的危害。

第二、水和空氣在生產(chǎn)過程中的控制。水包括市政供水和自建井。如企業(yè)使用自建井，需將水凈化消毒，特別是產(chǎn)成品區(qū)生產(chǎn)用水。若使用市政供水，企業(yè)也可加消毒設(shè)施，進(jìn)一步保障生產(chǎn)用水符合要求。此外，污水不可對生產(chǎn)用水造成二次污染，也不得污染生產(chǎn)環(huán)境。就空氣方面而言，車間的進(jìn)出風(fēng)口處要有防蟲，防塵設(shè)施，同時，要保證空氣從高清潔區(qū)流向低清潔區(qū)。從滅菌角度看，空氣可采用臭氧、紫外燈、二氧化氯噴霧或熏蒸等措施。

第三、人員和培訓(xùn)在生產(chǎn)過程的要求。從事生產(chǎn)的人員必須有健康證，并且每天需要進(jìn)行健康檢查，患有局部化膿性感染（手部傷口等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等）的操作人員必須暫時停止其工作或調(diào)換崗位。當(dāng)前，食品監(jiān)管部門和生產(chǎn)企業(yè)越來越重視從業(yè)人員的培訓(xùn)和檢查。人員的素質(zhì)、熟練程序、風(fēng)險意識、危機(jī)現(xiàn)場的處理等，有助于提升產(chǎn)品的品質(zhì)，優(yōu)秀企業(yè)會通過各種培訓(xùn)來提高從業(yè)人員的安全意識和責(zé)任，提高相應(yīng)的知識水平。

第四、進(jìn)貨索證。為減少微生物污染，企業(yè)進(jìn)貨前需索要相關(guān)證件，審察廠家是否合規(guī)。證件包括原料、輔料、包裝材料、洗滌劑、消毒劑等。只有企業(yè)使用合格合規(guī)的生產(chǎn)原材料，產(chǎn)品性能才會更有保證。

第五、生產(chǎn)過程中的制度與管理。在生產(chǎn)過程中，企業(yè)的衛(wèi)生管理制度，以及相關(guān)的檢查、考核是控制減少微生物污染的重要保證。在此過程中，須嚴(yán)格執(zhí)行進(jìn)出車間操作規(guī)程，清洗消毒操作規(guī)程；生、熟避免交叉污染；定期、定時消毒操作。操作人員離崗后重新回到崗位，需重新洗手消毒，并且在工作中一定要規(guī)范帶口罩防護(hù)，以減少微生物的污染。

第六、滅菌對減少微生物危害有所幫助。為減少微生物污染，降低產(chǎn)品的安全風(fēng)險，滅菌工序是很重要的一個步驟。通過徹底加熱，包括致病菌在內(nèi)的大部分微生物可以被很快殺滅?，F(xiàn)在的滅菌方式很多，如沸水煮、巴氏消毒、高壓蒸汽、干燥滅菌、輻射滅菌、化學(xué)殺菌劑和消毒劑等等，企業(yè)需選擇適合自己產(chǎn)品的滅菌方式，減少有害微生物的危害。

第七、溫度與時間的控制。生產(chǎn)過程需在合理溫度下使操作工序盡量緊湊，從而降低食品中已有的微生物生長繁殖的速度，降低菌落總數(shù)。每類微生物都有自己的最適生長溫度，在最適生長溫度下，細(xì)菌會呈幾何級繁殖增長。因此為降低終產(chǎn)品的菌落總數(shù)量，就需控制生產(chǎn)過程中產(chǎn)品的溫度，使其盡可能遠(yuǎn)離致病菌和腐生菌的最適生長溫度。

第八、監(jiān)控與檢驗(yàn)對控制微生物有重要作用。微生物無處不在，可造成食品污染的環(huán)節(jié)眾多，在2014年更新的GB 14881里面單獨(dú)增加了附錄A――食品加工過程的微生物監(jiān)控程序指南，提出了加工過程環(huán)境微生物和過程產(chǎn)品微生物的監(jiān)控要點(diǎn)。附錄A涵蓋了加工過程各個環(huán)節(jié)的微生物學(xué)評估，清潔消毒效果以及微生物控制效果的評價。從實(shí)際質(zhì)量監(jiān)控需求著手，對監(jiān)控指標(biāo)、取樣點(diǎn)、監(jiān)控頻率、取樣和檢測方法、評判原則，以及不符合情況的處理等進(jìn)行了詳細(xì)說明和解釋，并通過示例說明，指導(dǎo)企業(yè)在實(shí)際生產(chǎn)過程中對微生物進(jìn)行全方位的監(jiān)控，以減少食品生產(chǎn)過程中的各種污染，控制潛在危害，保證產(chǎn)品合格。

微生物的應(yīng)用

雖然，致病微生物會對食品造成污染，但事實(shí)上，很多微生物是對人體有益的。微生物在食品中的應(yīng)用歷史悠久，很早人們就會在適宜條件下利用微生物將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為所需產(chǎn)物，例如發(fā)酵。常見的發(fā)酵產(chǎn)品有：酸奶、奶酪、l酵肉制品、饅頭、面包、泡菜、酒、腐乳、醬油、醋等等，發(fā)酵豐富了人類的生活。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵過程在增加或提高營養(yǎng)成分的含量以及改善食品的風(fēng)味方面正日益扮演重要的角色，顯示出廣闊的應(yīng)用前景。

第2篇：微生物采樣方案范文

為了解上海鐵路管區(qū)內(nèi)食品衛(wèi)生狀況，及時改進(jìn)工作中存在的問題，我們對2005―2012年上海鐵路管區(qū)食品衛(wèi)生監(jiān)測結(jié)果進(jìn)行分析。

1對象與方法

1.1對象

上海鐵路局管區(qū)內(nèi)日常監(jiān)測單位有客站內(nèi)餐飲店、超市、副食品經(jīng)營單位、零售網(wǎng)點(diǎn)、動車組列車專供食品、鐵路單位職工食堂等。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，2005―2012年日常監(jiān)測單位數(shù)分別為51個、50個、47個、55個、48個、38個、38個、36個。2005―2012年采樣總件數(shù)分別為196件、196件、196件、254件、281件、198件、265件、181件。日常監(jiān)測6大類食品種類為盒飯、面包糕點(diǎn)、熟肉制品、豆制品、飲料冷凍飲品（碳酸飲料、果汁飲料、茶飲料、飲用水等）、其他類別（餅干、方便面、蜜餞、調(diào)料、油炸小食品、膨化食品、糖果、堅(jiān)果、炒貨等）。其他類別的食品種類較多，數(shù)量少，因此，將其進(jìn)行合并為其他類別進(jìn)行分析。

1.2方法

對6大類食品按照GB/T 4789.1《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則》最新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行采樣，送上海鐵路局疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科檢驗(yàn)。檢測項(xiàng)目為菌落總數(shù)、大腸菌群。按照中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 4789.2 《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》、GB/T 4789.3《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群測定》最新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行菌落總數(shù)和大腸菌群測定。結(jié)果按照《食品衛(wèi)生國家標(biāo)準(zhǔn)匯編》進(jìn)行判定，凡出現(xiàn)1項(xiàng)指標(biāo)不合格則判定該食品為不合格。

2結(jié)果

2.1概況

3討論

上海鐵路地區(qū)食品采樣量、種類、結(jié)構(gòu)等每年差別較大，有的食品甚至1年只有1個季度采樣。建議監(jiān)督采樣部門對每年采樣做完整計(jì)劃，合理分配每月/每季度采樣單位、采樣頻率、采樣食品種類數(shù)量，保證不同食品間構(gòu)成比基本一致，保證采樣有依據(jù)。

王東黎等[1]提出了鐵路站車食品抽檢結(jié)果分析及食品安全分級辦法。① 高風(fēng)險食品：常溫下短時間內(nèi)易腐敗變質(zhì)，食品微生物抽檢合格率小于60.00%的食品。如站車自制熟肉制品、豆制品、糕點(diǎn)面包等。② 中風(fēng)險食品：常溫下短時間內(nèi)較易變質(zhì)，食品微生物抽檢合格率在60.00%～90.00%的食品，如糧食加工品、醬腌菜、糖果蜜餞等。③ 低風(fēng)險食品：常溫下不易變質(zhì)，食品微生物抽檢合格率大于90.00%的食品。如飲料、方便面、酒水等。建議有針對性地分級、分頻率制定監(jiān)測方案，加強(qiáng)對高中風(fēng)險食品監(jiān)管力度，也要關(guān)注其他類別食品中潛在的高風(fēng)險食品。

8年間，2010年食品衛(wèi)生總體質(zhì)量最好，可能與世博會召開、監(jiān)管力度加大、各部門對食品要求提高、2009年《中華人民共和國食品安全法》、2010年《鐵路運(yùn)營食品安全管理辦法》等實(shí)施效果顯現(xiàn)有關(guān)。2007年和2008年食品衛(wèi)生總體質(zhì)量也不錯，可能與2007年8月起，鐵道部啟動為期四個月的食品安全專項(xiàng)整治工作及其持續(xù)效果有關(guān)。而2006年食品總體質(zhì)量最差，可能因?yàn)榇?，鐵道部著手食品整治工作。但2010年之后各項(xiàng)合格率開始下滑，雖然2011年后相繼出臺《鐵路餐飲服務(wù)和食品流通許可管理辦法》、《動車組列車食品安全管理辦法》、《鐵路食品安全指導(dǎo)意見》，但食品總體質(zhì)量都不如2010年，之前良好的持續(xù)效果也未延續(xù)。

大腸菌群多存在于溫血動物糞便、人類活動場所等糞便污染處，是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量重要指標(biāo)之一，表明食品在其生產(chǎn)銷售過程中受糞便污染程度。菌落總數(shù)是判定食品被細(xì)菌污染程度、衛(wèi)生質(zhì)量、保質(zhì)期、生產(chǎn)過程是否符合衛(wèi)生要求。菌落總數(shù)嚴(yán)重超標(biāo)，會破壞食品營養(yǎng)成分，加速腐敗變質(zhì)。增加食品污染致病菌的機(jī)會，形成食品安全風(fēng)險。上海鐵路管區(qū)8年中食品大腸菌群平均合格率比菌落總數(shù)平均合格率高。建議有關(guān)部門加強(qiáng)監(jiān)管頻次，對食品生產(chǎn)、運(yùn)輸、存儲、銷售等環(huán)節(jié)同等重視，注意保質(zhì)期，對不合格產(chǎn)品嚴(yán)格處理。

大腸菌群8年中平均合格率95.36%，盒飯、面包糕點(diǎn)、飲料冷凍飲品的大腸菌群平均合格率低于該值。菌落總數(shù)平均合格率89.13%，除豆制品外，其他5大類食品菌落總數(shù)平均合格率均高于該值，豆制品蛋白質(zhì)含量較高，營養(yǎng)豐富，是微生物的良好培養(yǎng)基，在溫濕度、水分適宜情況下，污染后微生物繁殖快，菌落總數(shù)易超標(biāo)，食品易變質(zhì)，因此，保質(zhì)期較短，相關(guān)文獻(xiàn)和報道也都表明豆制品菌落總數(shù)不合格率較高。建議取締個體分散及不合格供貨方式，加強(qiáng)冷食加工單位自身衛(wèi)生管理，從消毒保潔、防止二次污染等環(huán)節(jié)保證食品衛(wèi)生質(zhì)量，加強(qiáng)各方監(jiān)管力度。

季節(jié)對食品合格率有影響。一般夏季溫度較高，在營養(yǎng)、溫濕度等方面為細(xì)菌繁殖提供了有利條件，易造成食物腐敗變質(zhì)，感官上變味，發(fā)生食源性疾病和細(xì)菌性食物中毒[2]。一般1、4季度合格率高于2、3季度，而上海鐵路地區(qū)面包糕點(diǎn)、熟肉制品、豆制品未體現(xiàn)該季節(jié)性規(guī)律。四季度食品不合格率高的原因排除溫度因素，豆制品、面包糕點(diǎn)、熟肉制品均保質(zhì)期較短，可能銷售了過期食品，或生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題。8年總合格率87.55%，低于此合格率的食品種類和季度有：盒飯（3季度）、面包糕點(diǎn)（2～4季度）、熟肉制品（3季度）、豆制品（1～4季度）、飲料冷凍飲品（2季度）、其他類別（2季度）。近年來，高溫天逐漸增多，2季度末、3季度、4季度初都將是監(jiān)管重點(diǎn)。同時，對面包糕點(diǎn)、豆制品、熟肉制品這類保質(zhì)期較短的食品要全年加強(qiáng)監(jiān)測頻率。需要注意的是，盒飯保質(zhì)期也短，但其流通較快，因此合格率并不低，但需注意食用前加熱溫度達(dá)標(biāo)。其他類別食品種類多，采樣數(shù)量少，前幾年合格率較高，但近年菌落總數(shù)和大腸菌群合格率呈下滑趨勢，是食品衛(wèi)生質(zhì)量的安全隱患。

4參考文獻(xiàn)

[1]王東黎，趙宇.鐵路站車食品抽檢結(jié)果分析及食品安全分級[J].鐵道勞動安全衛(wèi)生與環(huán)保，2010（6）：303-305.

第3篇：微生物采樣方案范文

【關(guān)鍵詞】食品安全；微生物；監(jiān)測

【文章編號】1004-7484（2014）06-3880-01

The analysis results of food safety risk monitoring in Ziyang city in 2013

Jia Yong Yan wen wen kang xiao yan zhang hong

Ziyang Center for Disease Control and Prevention 641300

【Abstract】Objective：To understand the microbial and pathogenic factor in food in Ziyang， and provide scientific data for the monitoring of food safety risks.Methods： According to the "2013 national food pollutants and harmful factors， risk Handbook" and the relevant national standards， in 2013 February -12 months in the city's 4 counties （city， district） within the scope of a commercially available， some food is microbial monitoring..Results：The monitor cover 11 categories of 160 pieces of food， the fully qualified Class 3， 8 class 42 pieces of unqualified， unqualified samples accounted for 26.2%. Detection of 8 strains of Staphylococcus aureus， 1 strains of Enterobacter sakazakii， food borne pathogen detection rate of 5.6%.Conclusion：Foods sold in Ziyang city are subject to different degrees of microbial contamination， the potential risks always exist in foodborne disease.

【Key word】Food Safety Microorganism Monitor

為了解資陽市食品安全現(xiàn)狀，特別是為了解資陽市食源微生物污染食品的情況，根據(jù)《2013年四川省食品安全風(fēng)險監(jiān)測實(shí)施方案》中《2013年食品微生物及其致病因子監(jiān)測方案》要求，結(jié)合資陽市具體情況，我們于2013.1―2013.12月開展并完成了11類160件食品中9個微生物指標(biāo)的監(jiān)測任務(wù)，結(jié)果分析報告如下：

1 材料和方法

1.1樣品來源：按照監(jiān)測方案要求類別在資陽市所屬4個縣、市（區(qū)）內(nèi)，在大型超市、農(nóng)貿(mào)市場、學(xué)校周邊攤點(diǎn)、餐飲店、食品加工房等采集11類160件食品。采樣方法按照中國標(biāo)準(zhǔn)出版社《食源微生物檢驗(yàn)用樣品的抽取和制備手冊》[1]進(jìn)行。

1.2檢測方法：依據(jù)《2013年國家食品污染和有害因素風(fēng)險工作手冊》[2]、《食品微生物檢測工作指南》[3]和《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》（GB 4789-2010）[4]進(jìn)行微生物檢測。依據(jù)《食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法規(guī)匯編》[5]進(jìn)行評價。

2 結(jié)果

檢測食品樣品11大類，不合格8類，占73%；檢測食品樣品160件，不合格42件，不合格率26.2%，檢測細(xì)菌總數(shù)及大腸埃希氏菌污染指標(biāo)的樣品120件，超標(biāo)33件，占27.5%；食源性病原微生物檢出9株，占5.6%。乳制品、皮蛋和熟肉制品40件微生物指標(biāo)全部合格。

檢測桶裝水10件中，50%細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)。學(xué)校周邊攤點(diǎn)食品的微生物指標(biāo)超標(biāo)嚴(yán)重， 50件面包糕點(diǎn)和膨化小食品有20件細(xì)菌總數(shù)和大腸埃希氏菌超標(biāo)，4件食品檢出金黃色葡糖球菌，不合格率達(dá)到48%。嬰兒配方食品中1件檢出阪崎桿菌，不合格率10%。冷凍飲品2件細(xì)菌總是超標(biāo)，不合格率20%。檢測流動早晨中即食食品10件，檢測到細(xì)菌總數(shù)在10萬cfu/g以上的6件，占60%。燒烤食品20件中2件大腸埃希氏菌大于10萬cfu/g，且同時在該兩件食品中分離到金黃色葡萄球菌。燒烤和流動早晨未查到相關(guān)限值，暫將細(xì)菌總數(shù)十萬以上或分離到致病菌作為不合格食品。

3討論

食品安全是人民群眾十分關(guān)心的問題，也是世界共同面臨的一個難題，它關(guān)系著人民群眾的身體健康和生命安全，關(guān)系在經(jīng)濟(jì)的健康運(yùn)行，關(guān)系著政府的形象，近年來食品安全問題日益成為社會關(guān)注的焦點(diǎn)問題之一。食源性病原微生物是通過被污染食品而引發(fā)人類疾病的一類生物，食品安全的一項(xiàng)重要工作就是和這類病原微生物作斗爭。

本市2013年食品風(fēng)險監(jiān)測結(jié)果顯示被監(jiān)測的食品種類中微生物指標(biāo)超標(biāo)嚴(yán)重，整體不合格率高達(dá)26.2%，部分食品不合格率更是高達(dá)60%。食源性病原微生物檢出9株，占5.6%。明顯低于其他地區(qū)報道結(jié)果，應(yīng)該與所監(jiān)測樣品類別不同有關(guān)，特別是本監(jiān)測樣品中沒有生食肉類制品有直接關(guān)系。

11類食品中細(xì)菌總數(shù)和大腸埃希氏菌污染嚴(yán)重的是學(xué)校周邊攤點(diǎn)的采集的面包、糕點(diǎn)和膨化小食品等，共檢測50件竟有20件微生物超標(biāo)，不合格率達(dá)高到40%，與其國內(nèi)他地區(qū)報道一致【6】，足以說明學(xué)校周邊食品衛(wèi)生環(huán)境之惡劣，提示學(xué)校周邊食品攤點(diǎn)存在重大食品安全風(fēng)險問題，有關(guān)部門應(yīng)該高度重視，持續(xù)整治學(xué)校周邊攤點(diǎn)食品衛(wèi)生。

桶裝水10件細(xì)菌總是超標(biāo)5件，不合格率50%，桶裝水飲用安全堪憂，建議有關(guān)部門加強(qiáng)監(jiān)督執(zhí)法力度，加強(qiáng)對桶裝水生產(chǎn)及流通流域等各個環(huán)節(jié)的衛(wèi)生質(zhì)量管理。

食源性病原微生物檢出9株，其中8株金黃色葡萄球菌，1株坂崎桿菌。金黃色葡萄球菌分別在膨化食品、速凍面食、面包糕點(diǎn)和燒烤中檢出，它在自然界廣泛存在，當(dāng)其毒力強(qiáng)污染量大時會引起食源性疾病，潛在風(fēng)險較大。阪崎桿菌在嬰兒食品中檢出，與其他地區(qū)結(jié)果一致 [7]。

近年，我市細(xì)菌性食物中毒發(fā)生有所減少，但零星的食源性疾病案例時有發(fā)生，有關(guān)部門要保持風(fēng)險意識，加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理，繼續(xù)加強(qiáng)食源性疾病監(jiān)測力度，擴(kuò)大監(jiān)測范圍。在今后的工作中，我們將進(jìn)一步擴(kuò)大食品風(fēng)險監(jiān)測范圍，增加監(jiān)測樣品種類和數(shù)量，讓所得數(shù)據(jù)更具有科學(xué)性和代表性。

參考文獻(xiàn)：

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[5] 衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督中心衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)處編.食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法規(guī)匯編[M]. 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005：上--下.

第4篇：微生物采樣方案范文

[關(guān)鍵詞] 控制；改進(jìn)；臨床微生物檢驗(yàn)；質(zhì)量；策略

【中圖分類號】 R44 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A 【文章編號】 1007-4244（2014）07-327-2

作為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室科學(xué)技術(shù)和臨床醫(yī)學(xué)的高等級結(jié)合，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)近年來發(fā)展迅速，并形成了集合多種技術(shù)與多種學(xué)術(shù)門類的綜合性前沿學(xué)科。由于涉及到大量的化學(xué)實(shí)驗(yàn)，因此，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)在應(yīng)用的過程中具有極強(qiáng)的臨床實(shí)踐性。尤其在當(dāng)前情況下，臨床微生物檢驗(yàn)的實(shí)踐意義越來越明顯，在抗生素合理使用、醫(yī)院感染控制等方面都具有十分重要的應(yīng)用價值。尤其在感染性疾病的診治領(lǐng)域，臨床微生物檢驗(yàn)?zāi)軌驗(yàn)橛行У目刂聘腥舅教峁┯辛Φ闹С趾椭匾罁?jù)。但是，由于多種因素的影響，病原學(xué)檢查遇到了層層阻力，不但病原微生物體積微小，難以培養(yǎng)，在取材與檢查等方面也會使臨床微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量難以得到良好的把握，對感染性疾病的治療會產(chǎn)生消極的影響。更為重要的是，在人類生存的環(huán)境中，微生物的種類繁多，一些多重耐藥菌和泛耐藥菌株能夠?qū)Ω腥拘约膊〉挠行г\治產(chǎn)生明顯的阻礙作用，切實(shí)加強(qiáng)對臨床微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制，提出并實(shí)踐改進(jìn)策略，能顧對臨床醫(yī)學(xué)產(chǎn)生積極的推動作用。文章以此為視角，首先對臨床微生物檢驗(yàn)中存在的問題進(jìn)行了分析，討論了質(zhì)量控制的方式方法，最后從多個角度給出了臨床微生物檢驗(yàn)的若干改進(jìn)策略。旨在通過本文的工作，為指導(dǎo)臨床疾病的診斷與治療提供可供借鑒的信息，發(fā)現(xiàn)影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素，最大限度的提提升微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量，使微生物檢測的結(jié)果更加可靠和準(zhǔn)確。

一、臨床微生物檢驗(yàn)中存在的質(zhì)量問題

（一）檢驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)問題

在臨床微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)方案設(shè)計(jì)的合理性對檢出率和有效率會產(chǎn)生重要的影響。比如，在痰樣本的檢驗(yàn)過程中，不同的檢驗(yàn)方案在陽性率方面存在著較大的差異。比如，通過熒光法檢驗(yàn)多次齊-尼二氏染色的痰標(biāo)本時，陽性率往往能夠達(dá)到 14%左右，但是，采用集菌檢查法進(jìn)行檢驗(yàn)時，檢出率會提高到 18% 左右，后者明顯高于前者。后者的檢出率明顯高于前者?？墒?，在目前情況下，大多數(shù)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室還在繼續(xù)選擇直接涂片檢查法，檢驗(yàn)結(jié)果往往達(dá)不到要求。

（二）檢驗(yàn)操作規(guī)范性問題

在臨床微生物檢驗(yàn)過程中，任何一步都需要通過較強(qiáng)的判斷能力才能有效的實(shí)施，這與臨床檢驗(yàn)和生化檢驗(yàn)不同，前者對檢驗(yàn)人員的知識儲備和個人經(jīng)驗(yàn)具有更高的要求，甚至在某種程度上，檢驗(yàn)人員的操作有效性和規(guī)范性能夠?qū)z驗(yàn)的準(zhǔn)確度產(chǎn)生直接的影響。從這個角度講，臨床微生物檢驗(yàn)工作需要檢驗(yàn)人員不但的提高自身的素質(zhì)，對操作規(guī)程有更為深入的了解，通過閱讀有關(guān)資料，不斷提升自身的專業(yè)知識與技術(shù)水平，以便在更高的理論基礎(chǔ)之上改進(jìn)微生物檢驗(yàn)的效果。當(dāng)然，不可否認(rèn)的是，在實(shí)際操作中，一些檢驗(yàn)人員并未對繼續(xù)教育基于高度的重視，在學(xué)習(xí)新的專業(yè)理論與專業(yè)技術(shù)方面積極性欠缺，對檢驗(yàn)質(zhì)量重視不夠。

（三）標(biāo)本采集與處理問題

在臨床微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)質(zhì)量的缺位表現(xiàn)在多個方面，在標(biāo)本采集和處理方面也存在某種程度的欠缺。樣本的采集需要在恰當(dāng)?shù)臅r間進(jìn)行，樣本的處理方法應(yīng)該正確――這些都是臨床微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵所在。比如，在尿液采集的過程中一般要采用“中段尿采集法”，而對于尿標(biāo)本的采集也要取中段尿（通常為 10～20mL范圍內(nèi)），并進(jìn)一步的將其排入到無菌容器中?？墒牵趯?shí)際操作中，有些醫(yī)生或者操作人員會在工作的過程中，對無菌操作的重視程度不夠，甚至不會收集中段尿，致使外尿道有常居菌進(jìn)入，使尿液標(biāo)本受到污染，嚴(yán)重的影響到檢驗(yàn)的效果。在有關(guān)的研究中，那些未經(jīng)嚴(yán)格無菌操作收集的尿液在檢驗(yàn)準(zhǔn)確率方面存在較大差異，甚至?xí)a(chǎn)生更為嚴(yán)重的后果。

二、臨床微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制層面

（一）注重培養(yǎng)基的選擇

臨床微生物檢驗(yàn)是一項(xiàng)復(fù)雜的工作，除了要完成大量的基礎(chǔ)性工作外，還要在培養(yǎng)基的選擇方面付諸更多的精力。比如，需要注重培養(yǎng)基成分對目的菌的抑制作用。其中的原因在于，常規(guī)培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基只有簡單的幾種，可是與此相對應(yīng)的是，能夠引發(fā)感染的病原菌卻種類繁多，但是其中的大部分在所用培養(yǎng)基中難以生長。對這些種類的細(xì)菌而言，如果繼續(xù)采用常規(guī)培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，勢必會造成檢驗(yàn)結(jié)果的疏漏。此外，在臨床中，為了最大限度的提高檢出率，通常會在選擇培養(yǎng)基中加入抗生素，目的在于抑制非目的菌，可是因?yàn)榧?xì)菌對藥物的敏感性有時會產(chǎn)生變異的情況，目的菌對加入的藥物也會“過度”敏感。因此，為了解決這一問題，需要在培養(yǎng)前需要對培養(yǎng)基進(jìn)行相關(guān)的性能試驗(yàn)，以此來控制培養(yǎng)基的質(zhì)量。

（二）檢驗(yàn)人員需和臨床醫(yī)生配合工作

在臨床微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)人員的綜合素質(zhì)對檢驗(yàn)結(jié)果會產(chǎn)生直接的影響。因此，在質(zhì)量控制方面，要求檢驗(yàn)人員不但要閱讀和學(xué)習(xí)相關(guān)的生物學(xué)和檢驗(yàn)學(xué)的資料，還應(yīng)在實(shí)際操作中不斷地提高自身的水平和技能，提高檢驗(yàn)的精度和效度。當(dāng)然，實(shí)際情況是，一些檢驗(yàn)人員對標(biāo)本的傳染性有懼怕的心理，對從事這項(xiàng)工作的排斥性較強(qiáng)，在思想上難以真正進(jìn)入到這一行業(yè)?？墒?，責(zé)任心的缺乏對檢驗(yàn)人員科技素質(zhì)的提高會起到相反的作用。從這個角度講，相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)要對臨床微生物檢驗(yàn)工作高度重視，通過巡視或者現(xiàn)場管理的方式，使檢驗(yàn)人員意識到臨床檢驗(yàn)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和臨床工作中的地位和作用。甚至可以選派一些專業(yè)性強(qiáng)、思想穩(wěn)定、具有較高技術(shù)職稱的工作人員從事這一工作，在內(nèi)部培訓(xùn)和外部學(xué)習(xí)相結(jié)合的模式下，不斷的提高檢驗(yàn)人員的素質(zhì)。如此一來，檢驗(yàn)人員便能夠?qū)颊叩牟∏楹陀盟幹委熐闆r產(chǎn)生直接和深入的了解，這對綜合分析、設(shè)計(jì)合理的檢驗(yàn)方案，具有明顯的幫助。

（三）控制標(biāo)本的質(zhì)量

對臨床微生物檢驗(yàn)工作來說，控制標(biāo)本的質(zhì)量是至關(guān)重要的，它直接關(guān)系到檢驗(yàn)的精度。因此，在實(shí)際操作中，需要對樣本進(jìn)行正確的采集、運(yùn)送與處理。在進(jìn)行培養(yǎng)之前，要號召檢驗(yàn)室對標(biāo)本質(zhì)量進(jìn)行評估，仔細(xì)區(qū)分和分離致病菌與常居菌，一面造成誤檢，影響對患者進(jìn)行的準(zhǔn)確治療。因此，為了更好的提高檢驗(yàn)的效果，往往要采集厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本，當(dāng)然，在這一過程中，對采集人員的素質(zhì)和能力的要求是較高的，他們不但知曉標(biāo)本作厭氧培養(yǎng)的必要性，還要對標(biāo)本在正確的時間（用藥之前）進(jìn)行采集與運(yùn)送，提高標(biāo)本質(zhì)量。此外，檢驗(yàn)人員還應(yīng)與臨床醫(yī)生互通信息，彼此配合，共同對標(biāo)本的采集等工作付出努力。

三、臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量改進(jìn)策略

（一）加強(qiáng)標(biāo)本的采集與預(yù)處理

在臨床微生物檢驗(yàn)中，標(biāo)本的采集和預(yù)處理對檢驗(yàn)結(jié)果會產(chǎn)生直接的影響。尤其在前期工作時期，要對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)時控制，監(jiān)控質(zhì)量，使之能夠達(dá)到理想的狀態(tài)。此外，還應(yīng)通過有效的途徑提升檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性。比如，可以在有條件的醫(yī)院或者實(shí)驗(yàn)室建立專業(yè)的采樣間，其中的專業(yè)人員要進(jìn)行集中的培訓(xùn)，把標(biāo)本正確采集納入到檢驗(yàn)人員的日常工作之中，最大限度的提高病菌檢出率。

（二）強(qiáng)化微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量評價

正如前文所述，臨床微生物檢驗(yàn)是一項(xiàng)復(fù)雜的工程，因此檢驗(yàn)過程就需從系統(tǒng)化的角度進(jìn)行，強(qiáng)化微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量評價就是其中重要的一項(xiàng)。當(dāng)然，在對室間質(zhì)量進(jìn)行評價時，那種簡單、粗糙的考核是不可取的，需要借助最新的知識和技能才能實(shí)現(xiàn)，才能最大限度的提高各細(xì)菌室整體水平。但是，在目前情況下，我國一些實(shí)驗(yàn)室的水平還較為落后，需要積極的參加到室間質(zhì)量的評價體系之中，并積極、主動的借鑒衛(wèi)生部、香港、澳大利亞等部門、地區(qū)和國家的經(jīng)驗(yàn)，這對掌握苛養(yǎng)菌、不常見菌、疑難菌的鑒定思路與方法具有明顯的促進(jìn)作用。

（三）對微生物檢驗(yàn)進(jìn)行全過程質(zhì)量管理

將全過程質(zhì)量管理應(yīng)用于臨床微生物檢驗(yàn)?zāi)軌蛴行У慕档驼`檢率，提高檢驗(yàn)質(zhì)量。而為了實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)，改進(jìn)檢驗(yàn)結(jié)果，需要強(qiáng)化檢驗(yàn)工作和臨床工作之間的聯(lián)系。比如，對于部分可疑的陰性結(jié)果，尤其是和臨床相沖突的結(jié)果，檢驗(yàn)人員要和臨床醫(yī)師進(jìn)行信息交換，查找原因，提升診斷的準(zhǔn)確率；再如，對于分離出來的特殊菌株，要設(shè)法保存，這對后續(xù)的科研工作以及拉近患者和醫(yī)護(hù)人員之間的關(guān)系具有十分重要的積極作用。

在目前情況下，臨床微生物檢驗(yàn)工作正面臨著諸多問題，檢驗(yàn)環(huán)境越來越復(fù)雜，檢驗(yàn)結(jié)果對臨床醫(yī)學(xué)的作用越來越明顯，患者對檢驗(yàn)工作的要求越來越高。從這個角度講，醫(yī)院或者醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室只有重視臨床微生物檢驗(yàn)的地位和作用，通過多種方式提高檢驗(yàn)的精度和準(zhǔn)確度，才能為臨床工作提供更多、更有價值的指導(dǎo)信息。當(dāng)然，臨床微生物檢驗(yàn)是一項(xiàng)精度極高、操作極為復(fù)雜的工作，需要在實(shí)踐和理論研究的過程中不斷的加以完善和改進(jìn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]楊春艷.談臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量問題[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011（4）：122-123.

第5篇：微生物采樣方案范文

關(guān)鍵詞：洗衣廢水；陰離子表面活性劑（LAS）；中水回用

隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、人民生活水平的提高，洗衣行業(yè)應(yīng)運(yùn)而生，而且規(guī)模日漸擴(kuò)大。經(jīng)對某公司350t/d洗衣用的原材料進(jìn)行調(diào)查，并對它的排水進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測，擬定了一套治理及回用方案，對回用廢水的經(jīng)濟(jì)價值進(jìn)行了分析。

1洗衣廢水的特點(diǎn)

洗衣廠的生產(chǎn)流程一般分為潤濕、洗滌、清洗、彩漂、殺菌、脫水、烘干等，在洗衣過程中使用的原料主要有洗滌劑、增白劑、殺菌劑等。洗衣廢水的主要特點(diǎn)是含有大量洗滌劑、殺菌劑、懸浮物等，污染因子為LAS、SS、TP、COD、NH3-N等。根據(jù)對某洗衣公司的洗衣廢水連續(xù)采樣分析，其中主要污染因子的濃度變化范圍為LAS30～60mg/L、SS200～350mg/L、TP3～8mg/L、COD100～400mg/L，溫度30℃～50℃，廢水有殺菌劑的氯味。LAS及殺菌劑對微生物均具有抑制作用。

2治理及回用方案分析

2.1治理方案

該工程采用的處理流程為：廢水格柵調(diào)節(jié)池物化預(yù)處理水解酸化+接觸氧化消毒石英砂過濾活性炭吸附離子交換中水回用。各單元的作用是：通過格柵去除廢水中大的懸浮物（衣物中的毛、纖維等），物化預(yù)處理主要去除部分COD、TP、LAS、SS等，生物處理段進(jìn)一步去除COD、TP、LAS、SS等，經(jīng)消毒后通過石英砂過濾去除殘留懸浮物，然后進(jìn)入活性炭吸附器，對殘留難除解污染物進(jìn)一步吸附，最后通過離子交換系統(tǒng)去除廢水的硬度（Ca2+、Mg2+）。

2.2物化預(yù)處理段各污染物去除率分析

根據(jù)該公司的洗衣廢水特點(diǎn)，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行小試。首先通過物化預(yù)處理方式分析加藥后對COD、TP、LAS的去除率與其它廢水在實(shí)際工程中的去除率進(jìn)行比較，確定物化預(yù)處理方案的可行性。根據(jù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該廢水通過物化預(yù)處理后COD、LAS的去除率與其它廢水相似，可保持在60%～70%的范圍，TP可達(dá)到90%，SS可達(dá)到70%～90%。因此通過物化預(yù)處理后的LAS、SS、COD等可得到有效去除。加藥沉淀后各污染物可降至LAS12～24mg/L，SS60～105mg/L，TP≤0.5mg/L，COD24～160mg/L。

2.3生物處理法分析和控制及去除效果

在運(yùn)行情況良好的活性污泥系統(tǒng)中取污泥濃度3500mg/L左右的活性污泥50mL，分別加入100mL、200mL等不同劑量的洗滌廢水，充分?jǐn)嚢璺胖?小時以上，對加廢水前后的微生物進(jìn)行鏡檢分析發(fā)現(xiàn)，經(jīng)物化預(yù)處理后的廢水中，殺菌劑和LAS對微生物有一定影響，菌膠團(tuán)的性狀稍有變化，但對大多數(shù)微生物未造成沖擊。因此后續(xù)處理用生物法是可行的。在實(shí)際工程中，將物化預(yù)處理后的廢水經(jīng)過水解酸化后，進(jìn)入接觸氧化池，在運(yùn)行初期加入活性污泥及適當(dāng)營養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng)及馴化，并掛膜。運(yùn)行過程中維持一定的活性污泥濃度?；钚晕勰嗟闹饕饔迷谟趯AS的吸附，在MLSS濃度適中的情況下運(yùn)行，可有效吸附LAS并對其進(jìn)行降解，并有效減少接觸氧化池曝氣時的泡沫量。生物段的有效運(yùn)行二沉池出水污染物的去除率：LAS可達(dá)90%以上，COD可達(dá)85%～90%，TP可達(dá)10%～20%；廢水通過二沉池沉淀后可達(dá)LAS≤3.0mg/L，SS≤20mg/L，TP≤0.4mg/L，COD≤24mg/L。

2.4中水回用處理方案分析

二沉池出水經(jīng)消毒殺菌后去除廢水中的的細(xì)菌和病毒，再進(jìn)入石英砂過濾器去除殘留懸浮物，懸浮物的有效去除率可達(dá)90%以上，然后經(jīng)過活性炭吸附進(jìn)一步去除殘留的LAS、剩余有機(jī)污染物等，該段有效的去除率可達(dá)90%以上，最后經(jīng)離子交換樹脂去除硬度（Ca2+、Mg2+），使用硬度為0。經(jīng)處理后的洗衣廢水最終可達(dá)到如下效果：LAS≈0，SS≈0，COD≤2mg/L，Ca2+、Mg2+≈0。洗衣廢水經(jīng)過上述系統(tǒng)處理后可重新進(jìn)行回用，去除硬度后，還有利于減少洗滌劑的用量，而且衣物更易清洗干凈。整個系統(tǒng)也維持著良性循環(huán)的狀態(tài)。

3經(jīng)濟(jì)效益分析

3.1運(yùn)行成本組成及單價

1）電費(fèi)按裝機(jī)估計(jì)為0.63元/噸；2）藥劑費(fèi)為0.25元/噸；3）人工費(fèi)0.57元/噸；4）設(shè)備維修費(fèi)0.1元/噸；5）污泥處置費(fèi)0.03元/噸；6）中水回用系統(tǒng)維護(hù)費(fèi)用0.56元/噸。該系統(tǒng)的運(yùn)行成本合計(jì)為2.14元/噸。

3.2經(jīng)濟(jì)效益分析

該洗衣公司目前的洗衣用水取自自來水，用水單價為4元/噸，如果將洗衣后的廢水處理后作為中水回用，每噸水可節(jié)約成本約1.86元/噸，以每天回用300噸水計(jì)，全年共計(jì)節(jié)約成本約20萬元。

4結(jié)論

洗衣行業(yè)的用水量較大，洗衣廢水經(jīng)適當(dāng)處理后進(jìn)行回收利用，不僅可將廢水進(jìn)行有效凈化，減輕對環(huán)境的污染，而且可為企業(yè)節(jié)約成本，減輕負(fù)擔(dān)，形成良性循環(huán)，帶來明顯的經(jīng)濟(jì)效益，達(dá)到環(huán)境和經(jīng)濟(jì)的協(xié)調(diào)發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]廢水處理原理[M].長沙：湖南大學(xué)出版社.

第6篇：微生物采樣方案范文

由于微生物在各種食品劃分（蛋白質(zhì)、乳制品、水果/蔬菜、加工食品）和地理區(qū)域的要求不同，所以食品工廠的微生物檢測標(biāo)準(zhǔn)也隨之不同。本文將更詳細(xì)地介紹世界各國關(guān)于微生物檢測的差別，包括檢查樣品采集地點(diǎn)和用于分析的檢測方法。

本文中的數(shù)據(jù)和圖表來自包括中國和印度在內(nèi)的19個國家450多個食品工廠的 QA/QC經(jīng)理初步研究訪談中得到的全球食品行業(yè)的微生物檢測最新市場報告。

在過去15年中，世界上針對微生物的檢測數(shù)量上升了128%。其中，病原體檢測的增長速度更快，在所有食品微生物檢測中所占的百分比與日俱增。15年前，病原體檢測占總微生物檢測的13.7%，2013年，它占總檢測的23.2%（圖1）。

各國之間的食物交易快速增長使食物鏈變得日趨復(fù)雜。例如，在美國，目前進(jìn)口食品占總消費(fèi)食品總量的15%～20%。根據(jù)美國農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì)，自1999年起，食品的進(jìn)口量每年增長7%。在過去10年里，動物源性食品的進(jìn)口增長了5%，而植物性食品增長了8%以上。

從表面上看，這兩種趨勢似乎是一致的――全球食物鏈的不斷復(fù)雜增加了微生物檢測的數(shù)量。但是，各國對微生物的檢測是大不相同的。

地理差別

在北美洲（NA）、歐洲（EU）、亞洲和世界其他地區(qū)，食品中微生物檢測的普遍增長和病原體檢測的增長是不一致的。在北美洲，過去幾年里，病原體檢測量增長了10%以上，而在歐洲，增長率僅為其一半?？傊鶕?jù)美國科學(xué)信息研究所的研究表明，各地理區(qū)域均有不同的增長趨勢，而影響增長的因素與公眾對食品安全的認(rèn)知有很大關(guān)系，是這種認(rèn)知影響著區(qū)域內(nèi)的檢測量及種類。所以，在進(jìn)口食品時，考慮食品的來源地區(qū)和食品劃分，對檢測非常重要。

食品（蛋白質(zhì)，乳制品，水果/蔬菜，加工食品）中微生物的檢測量存在區(qū)別。蛋白質(zhì)部分，包括牛肉、豬肉、雞肉、魚和蛋占等食品產(chǎn)業(yè)中微生物檢測量占總檢測量的27%，占總病原體檢測的40%以上。乳制品部分，包括液態(tài)奶、奶酪和其他基于乳制品中微生物檢測量占總檢測量的23%，而僅占病原體檢測的10%。在過去20年里，蛋白質(zhì)部分得到了重視，法規(guī)和病原體檢測水平也體現(xiàn)了這點(diǎn)。但在過去幾年，食源性疾病一直增長，一些食品中規(guī)定的低檢測水平也就沒有了意義。

在采集食物樣品時也是存在地理差異，在世界各國所有的食品微生物樣品中，26%是從原材料中采集的，25%是在加工過程中和工廠內(nèi)或周圍采集的，其余49%是從進(jìn)入市場前的成品中采集的。只做病原體檢測時，地理區(qū)域內(nèi)的樣品采集顯示了主要差異（圖2）。但在北美洲，只有8%的病原體樣品從原材料中進(jìn)行采集，而加工過程中或周圍的采樣比例達(dá)到44%以上。相比之下，亞洲的病原體檢測中，只有8%是從加工過程中或周圍采集的，這表明各國使用的檢測理念非常不同。然而，在過去20年里，危害分析和關(guān)鍵控制點(diǎn)計(jì)劃（和其他項(xiàng)目）一直處于北美洲食品安全項(xiàng)目的中心。由此可見，這種情況不只在中國、印度和其它的亞洲國家出現(xiàn)。

以彎曲菌屬為例

以病原體之一的彎曲菌屬為例，將更為清晰的看到食品檢測在各國的不同。美國疾病控制和預(yù)防中心根據(jù)全球的發(fā)病率和死亡率總結(jié)了1996～2012年間通過食物傳播的病原體導(dǎo)致的疾病趨勢。報告顯示，經(jīng)過多年的大幅度增長后，彎曲菌屬傳染病在2000年起達(dá)到了最高水平成為細(xì)菌食源性疾病的主要起因之一。但2013年，全球彎曲菌屬的檢測量大概為4600萬次，占世界總病原體檢測的2%。另外，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在食品工廠中，只有14%的工廠檢測彎曲菌屬，可見，只有很少的工廠檢測該病原體，并且當(dāng)他們檢測時，所占比例遠(yuǎn)低于其他微生物。

檢測彎曲菌屬在食品工廠的存在情況可以看到，由食品種類和地理區(qū)域帶來的差異，其檢測仍有區(qū)別。在北美洲，25%的蛋白質(zhì)作物檢測彎曲菌屬，但其他食品劃分沒有檢測此病原體。但是，在亞洲，除了水果/蔬菜外，每個食品劃分都檢測了此微生物（圖3）。

在這些工廠的彎曲菌屬檢測中，檢測方法隨區(qū)域而不同。全世界總共有76%的彎曲菌屬檢測使用了傳統(tǒng)方法，而位列其后的分析方法，基于抗體的檢測僅占檢測量的12%。

在地理區(qū)域上，亞洲工廠使用了傳統(tǒng)方法進(jìn)行彎曲菌屬分析，在歐洲工廠使用了傳統(tǒng)方法和基于抗體的方法，而在北美洲，大多數(shù)分析使用了更新、更快捷的方法。用于彎曲菌屬的檢測方法顯現(xiàn)出的區(qū)域差異正如其他病原體檢測方法一樣。由于方法和方法的等價性并不總是完美的，所以不同的方法會產(chǎn)生不同的食品安全解決方案（圖4）。

第7篇：微生物采樣方案范文

關(guān)鍵詞：課堂教學(xué) 成績評定 綜合素質(zhì)

根據(jù)我校培養(yǎng)方案，食品微生物檢測技術(shù)是生物工程專業(yè)質(zhì)檢方向以及食品質(zhì)量與安全專業(yè)的選修課之一。計(jì)劃課時為37(約三分之一的實(shí)驗(yàn)課時)，總的教學(xué)目的是通過本課程的學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握食品微生物檢測的基本原理、國家標(biāo)準(zhǔn)方法及內(nèi)容體系，各種食品、飲料等的采樣原則及前處理方法等；了解國內(nèi)外微生物檢驗(yàn)技術(shù)的現(xiàn)狀及發(fā)展情況，理解各種快速檢測新技術(shù)的原理、使用范圍和方法等。作為食品質(zhì)量與安全專業(yè)以及生工專業(yè)質(zhì)檢方向的專業(yè)選修課，食品微生物檢測技術(shù)的教學(xué)內(nèi)容決定了它是一門操作性、實(shí)用性很強(qiáng)的課程，其教學(xué)的直接目的是教會學(xué)生掌握目前使用的國家標(biāo)準(zhǔn)方法、知識以及對這些知識和技能的綜合應(yīng)用，教會學(xué)生在實(shí)際工作中自己動手解決問題的方法，提高學(xué)生應(yīng)對實(shí)戰(zhàn)的能力。

考核成績評定是課堂教學(xué)的重要組成內(nèi)容之一，對教學(xué)的效果、課堂的效率、學(xué)生學(xué)習(xí)的主動性、積極性以及學(xué)風(fēng)都有著非常重要的影響。本課程以微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)理論知識、快速檢測技術(shù)和檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)三部分構(gòu)成課程結(jié)構(gòu)框架，分別在三部分中設(shè)置不同的考核方式如下表1，以其在課程學(xué)時數(shù)較少的有限時間內(nèi)為學(xué)生傳授完善的知識體系，確保理論知識和技能的有效掌握，并獲得較理想的教學(xué)效果，是筆者對教學(xué)進(jìn)行不斷改革的追求。

一、以“考勤和提問”方式督促學(xué)生形成認(rèn)真、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)習(xí)態(tài)度

學(xué)生的學(xué)習(xí)出勤和課堂提問的表現(xiàn)能夠間接地反映他們的學(xué)習(xí)態(tài)度。如有的學(xué)生上課經(jīng)常遲到或借故缺勤，甚至?xí)缯n；有的學(xué)生雖然每次出勤，但在上課時，不專心聽老師講課，而是看與本課程無關(guān)的書，或者做其他專業(yè)課的作業(yè)，可謂“出工不出力”。持這樣學(xué)習(xí)態(tài)度的學(xué)生，上課心不在焉，往往不能正確回答或回答不出老師的課堂提問，其學(xué)習(xí)效果可想而知。因此要從考勤和提問中端正學(xué)生的學(xué)習(xí)態(tài)度，出勤包括遲到、缺課（病假和事假）、曠課三種行為，遲到1次扣0.5分，曠課1次扣1分，缺課需要病假或事假證明，病假不扣分，事假扣0.5分?！疤釂枴币噪S機(jī)提名方式進(jìn)行，一個學(xué)期每個學(xué)生1～2次，答不出扣1分，答的不好酌情扣分，出勤和提問占課程總成績的10%。全勤、學(xué)習(xí)態(tài)度端正、認(rèn)真聽講學(xué)生得10分。

二、以“隨堂作業(yè)”形式考察基礎(chǔ)理論知識的掌握

占總評權(quán)重的10%，即10分。在教學(xué)進(jìn)行到某一章節(jié)或某一部分的結(jié)束時，適時對學(xué)生進(jìn)行相關(guān)內(nèi)容的定時隨堂測試，讓學(xué)生獨(dú)立完成。測試題目以知識測試為主，能力測試為輔，主要考查學(xué)生對于所學(xué)理論知識的掌握程度。知識測試題目事先擬好標(biāo)準(zhǔn)答案，而能力測試題目可是開放性的，可事先制定答題給分的檔次標(biāo)準(zhǔn)隨堂測試具有兩方面的功能，一是檢測學(xué)生的習(xí)效果，促進(jìn)學(xué)生平時的學(xué)習(xí)；二是對于教學(xué)效果的反饋?zhàn)饔?，教師可?jù)測試的情況及時掌握學(xué)生的學(xué)習(xí)情況，以便及時調(diào)整教學(xué)的節(jié)奏、方法和深度。一般以3～4次為宜,各次得分相加換算成10分，再計(jì)入總評成績。

三、以“PPT準(zhǔn)備與匯報”形式掌握學(xué)科前沿技術(shù)

占總評權(quán)重的20%，即20分。本課程的教材為自編教材，其中大部分內(nèi)容介紹了微生物快速檢測的新技術(shù)，學(xué)生分兩人一組準(zhǔn)備PPT匯報，學(xué)生介紹內(nèi)容涵蓋了“微量多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)鑒定系統(tǒng)”、“快速自動化微生物檢測儀器和設(shè)備”、“現(xiàn)代分子生物學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的采用(包括DNA探針、PCR、DNA芯片、ELESA、免疫熒光技術(shù)、放射免疫和全自動免疫診斷系統(tǒng))”、“生物傳感器”等。通過對不同新技術(shù)的精心準(zhǔn)備和交流，學(xué)生基本上掌握了這些新技術(shù)在微生物檢測中的應(yīng)用。以“PPT準(zhǔn)備與匯報”開展教學(xué)，不盡提高了學(xué)生的自主學(xué)習(xí)積極性，也大大鍛煉了學(xué)生的語言組織、表達(dá)以及交流（匯報結(jié)束，臺下老師、同學(xué)提問）應(yīng)變能力。

四、以“課程論文撰寫”形式培養(yǎng)科研思維

課程論文的撰寫需要學(xué)生融合貫通微生物檢測技術(shù)中理論知識和快速檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，通過指導(dǎo)學(xué)生如何查閱和有效利用資料，并將其轉(zhuǎn)化并形成自己的知識體系。要求學(xué)生在學(xué)習(xí)教材內(nèi)容以外，關(guān)注學(xué)科前沿技術(shù)，開創(chuàng)教學(xué)內(nèi)容新領(lǐng)域教學(xué)過程中，在保證現(xiàn)有國標(biāo)主要內(nèi)容和知識體系的前提下，使學(xué)生了解食品微生物學(xué)檢驗(yàn)學(xué)科領(lǐng)域(目前雖沒有放入GB中)的其他知識及技術(shù)和前沿知識及新技術(shù)，并了解獲得它們的途徑和方法。學(xué)生論文有以某種病原菌為例，介紹對此致病菌的各種檢測方法，也有以某種檢測方法為手段，介紹此方法在不同病原菌中的檢測及特點(diǎn)等各種方式展開的綜述，不但鍛煉了學(xué)生檢索文獻(xiàn)、利用文獻(xiàn)的能力，開闊了學(xué)生視眼，學(xué)習(xí)了科研論文的撰寫，培養(yǎng)了學(xué)生的科研思維能力。

五、注重實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作過程，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)和良好的研究思維能力

綜合考慮微生物檢驗(yàn)的教學(xué)特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)條件，以培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)研究的思維方法為目標(biāo)，引導(dǎo)學(xué)生對實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行選擇（如有些同學(xué)選擇放置不同天數(shù)的牛奶，也有選擇不同貨架期的各種食品等），對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、步驟等各個環(huán)節(jié)進(jìn)行設(shè)計(jì)，并自己計(jì)算所需要的耗材和玻璃器皿，樹立學(xué)生對自己的實(shí)驗(yàn)全權(quán)負(fù)責(zé)的信念。在實(shí)驗(yàn)條件允許的情況下，可以擴(kuò)展學(xué)生的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)形成研究論文，因條件不允許的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，鼓勵學(xué)生申請校開放實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目、學(xué)生科研計(jì)劃項(xiàng)目及大學(xué)生創(chuàng)新設(shè)計(jì)大賽等。建立培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)的長效機(jī)制，學(xué)生學(xué)完課程后仍然可以充分利用實(shí)驗(yàn)室的平臺，獨(dú)立從事科學(xué)研究，增強(qiáng)學(xué)生勇于攀登科學(xué)高峰的意識。

另外，要求學(xué)生嚴(yán)格遵守各項(xiàng)注意事項(xiàng)，儀器、設(shè)備、藥品、試劑的使用，甚至包括衣帽、操作姿勢、言行、手法、材料處理、善后清潔等都嚴(yán)格按要求進(jìn)行。通過嚴(yán)格的要求培養(yǎng)學(xué)生細(xì)膩、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。

第8篇：微生物采樣方案范文

關(guān)鍵詞 基層衛(wèi)生檢驗(yàn)；樣品采集；質(zhì)量

中圖分類號R1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼A 文章編號 1674-6708（2011）34-0087-01

衛(wèi)生檢驗(yàn)是一項(xiàng)對食品衛(wèi)生、勞動衛(wèi)生、職業(yè)衛(wèi)生、一次性衛(wèi)生用品及其他與人體健康有關(guān)的產(chǎn)品進(jìn)行的衛(wèi)生檢驗(yàn)。檢驗(yàn)報告一旦發(fā)出后，即具有法律效力。樣品采集的質(zhì)量是實(shí)驗(yàn)室工作開展的關(guān)鍵點(diǎn)，直接關(guān)系到檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的質(zhì)量，因此樣品的規(guī)范、正確的采集和送檢，對于產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量管理評價以及整個衛(wèi)生監(jiān)督工作都有重要意義。

1 樣品采集

1.1 采集原則

所采樣品應(yīng)具有代表性、真實(shí)性、準(zhǔn)確性、及時性。

1.2 采樣前的準(zhǔn)備

1）準(zhǔn)備包裝取樣人員的工具，無菌工具，取樣工具等，擁有正確的采取產(chǎn)品或加工過程的取樣器械工具是至關(guān)重要的。除非選用合適的工具，否則樣品的完整性會被懷疑，甚至樣品毫無意義；

2）采樣前必須審查待測定樣品的的詳細(xì)信息，如生產(chǎn)日期、批號、規(guī)格等，并制定合理可行的采樣方案。

1.3 樣品采集

樣品采集通常采用隨機(jī)抽樣的方法。

1.4 采樣的數(shù)量

采樣數(shù)量應(yīng)能反映該食品的衛(wèi)生質(zhì)量和滿足檢驗(yàn)項(xiàng)目對樣品的需要。由于用一般方法取得的樣品校多，顆粒過大且組織不均勻，因此，必須對采集的樣品加以適當(dāng)?shù)闹苽?，以保證能代表全部樣品的情況，并滿足分析對樣品的要求。

2 樣品的運(yùn)送和保存

1）抽樣結(jié)束后應(yīng)盡快將樣品送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。如不能及時運(yùn)送，冷凍樣品應(yīng)存放在-20℃冰箱內(nèi)；冷卻和易腐樣品存放在0℃~4℃冰箱或冷卻庫內(nèi)；其他樣品可放在常溫冷暗處；

2）運(yùn)送冷卻和易腐樣品應(yīng)在包裝容器內(nèi)加適量的冷卻劑或冷凍劑，保證途中樣品不升溫或不融化，必要時可于途中補(bǔ)加冷卻劑或冷凍劑；

3）3盛樣品的容器應(yīng)消毒處理，但不得用消毒劑處理容器，不能在樣品中加入任何防腐劑；

4）樣品采集后，最好由專人立即送檢，如不能由專人攜帶送樣時，也可托運(yùn)。托運(yùn)前必須將樣品放好，應(yīng)能防破損，防凍結(jié)，防易腐和冷凍樣品升溫或融化。在包裝上應(yīng)注明“防碎”、“冷藏”等字樣[2]。

3 采樣的注意事項(xiàng)

1）采樣工具應(yīng)該清潔，不應(yīng)將任何有害物質(zhì)帶入樣品中；

2）樣品在檢測前，不得受污染，發(fā)生變化；

3）微生物檢驗(yàn)的樣品應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作；

4）在感官性質(zhì)上差別很大的食品不允許混在一起，要分開包裝并注明其性質(zhì)；

5）盛樣容器可根據(jù)要求選用硬質(zhì)玻璃或聚乙烯制品，容器上要貼上標(biāo)簽，并做好標(biāo)注。

4 存在問題

4.1 故意采合格樣

此問題主要表現(xiàn)在采餐具時刻意采重新消毒的，采樣品則采特意準(zhǔn)備的合格樣品，以確保檢驗(yàn)的合格。

4.2 以送代抽

監(jiān)督員到廠家采樣時，常常坐在有關(guān)科室里，根據(jù)以往或詢問的情況，一邊填寫各式單據(jù)，一邊讓廠家有關(guān)人員去取樣，而不是親自下到車間或倉庫根據(jù)實(shí)際情況，按照不同的采樣要求有代表性采取。

4.3 采樣的隨意性

基層衛(wèi)生監(jiān)督員大部分非科班出身，業(yè)務(wù)素質(zhì)低，責(zé)任意識也存在一些問題，如無菌意識淡薄或操作不當(dāng)，遇上散裝樣品隨意用塑料袋裝，取二次供水時，不按要求放水或水龍頭口處酒精燈過火消毒[3]。

4.4 送檢樣品的時效性

無論微生物檢驗(yàn)還是理化檢驗(yàn)，很多樣品的送檢時限都有嚴(yán)格規(guī)定，除有固定包裝，標(biāo)有保質(zhì)期的樣品，如冷飲、餐具都要求及時送檢，事實(shí)并非如此。原因：其一是有時采樣回來，下班了，無人接樣，耽擱了送樣時間；其次是監(jiān)督員對時限的概念淡薄，認(rèn)為只要送到實(shí)驗(yàn)室就行，待手頭上別的事情辦完，然后再不緊不慢分頭收集樣品；三是先收費(fèi)或其它程序造成。

4.5 樣品量的問題

樣品的數(shù)量少，開具的檢測項(xiàng)目多，也是很難保證檢測質(zhì)量。

5 討論與對策

認(rèn)量論證后，衛(wèi)生檢驗(yàn)檢測工作的各個環(huán)節(jié)包括檢樣、送樣、檢驗(yàn)、報告發(fā)出等都有規(guī)范要求，檢驗(yàn)過程中的質(zhì)量控制，如加標(biāo)、盲樣、空白對照等均有標(biāo)準(zhǔn)可依，操作性強(qiáng)，但樣品采集的質(zhì)量卻沒有具體指標(biāo)，記錄等手段來體現(xiàn)和控制。

參考文獻(xiàn)

[1]高鶴娟.食品衛(wèi)生檢驗(yàn)（理化部分）注解.

第9篇：微生物采樣方案范文

摘要：發(fā)酵管內(nèi)裝有乳糖蛋白胨液體培養(yǎng)基，并倒置一德小套管。乳糖能起選擇作用，因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖，而大腸菌群能發(fā)酵乳糖產(chǎn)算產(chǎn)氣。為便于觀察細(xì)菌的產(chǎn)酸情況，培養(yǎng)基內(nèi)加有溴甲酚紫作為PH指示劑。

平板培養(yǎng)基一般使用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)瓊脂平板含有伊紅和美藍(lán)染料，在此亦作為指示劑，大腸菌群產(chǎn)生帶核心的、有金屬光澤的深紫色菌落。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌 渾河 革蘭氏染色平板分離

（一）、立論依據(jù)

1、 水的微生物檢驗(yàn)是衡量水質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，也是判定被檢水能否食用的科學(xué)依據(jù)之一。

2、通過水的微生物檢驗(yàn)，可以判斷水加工環(huán)境及食品衛(wèi)生環(huán)境，能夠?qū)κ称繁患?xì)菌污染的程度作出正確的評價，為各項(xiàng)衛(wèi)生管理工作提供科學(xué)依據(jù)，提供傳染病和人類、動物和食物中毒的防治措施。

（二）、研究方案

1、研究目標(biāo)：

渾河，是縱貫遼寧省東部和中部的著名河流，長368公里，又稱小遼河。以我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，檢測各不同采樣段的渾河水中的細(xì)菌及大腸菌群數(shù)，以此判斷渾河水的水質(zhì)。

2、解決的關(guān)鍵問題

（1）水樣的采集

（2）水中細(xì)菌總數(shù)和總大腸菌群的測定

3、研究方法

（1）細(xì)菌總數(shù)測定采用平板菌落計(jì)數(shù)法

（2）初發(fā)酵試驗(yàn)

發(fā)酵管內(nèi)裝有乳糖蛋白胨液體培養(yǎng)基，并倒置一德小套管。乳糖能起選擇作用，因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖，而大腸菌群能發(fā)酵乳糖產(chǎn)算產(chǎn)氣。為便于觀察細(xì)菌的產(chǎn)酸情況，培養(yǎng)基內(nèi)加有溴甲酚紫作為PH指示劑，細(xì)菌產(chǎn)酸后，培養(yǎng)基即由原來的紫色變?yōu)辄S色。溴甲酚紫還可以抑制其他細(xì)菌，如對芽孢菌的生長抑制。

（3）平板分離

平板培養(yǎng)基一般使用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)瓊脂平板含有伊紅和美藍(lán)染料，在此亦作為指示劑，大腸菌群產(chǎn)生帶核心的、有金屬光澤的深紫色菌落。初發(fā)酵管24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn) 氣和48h產(chǎn)酸產(chǎn)氣的均需在以上平板上劃線分離，培養(yǎng)后，將符合大腸菌群菌落特征的菌落進(jìn)行革蘭氏染色，只有染色為革蘭氏陰性、無芽孢桿菌的菌落，才是大腸菌群菌落。

（4）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將少量待測樣品的懸浮液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，放在顯微鏡下直接觀察。1ml細(xì)菌數(shù)=每小格細(xì)菌數(shù)*16*25。若細(xì)菌在邊緣，看右不看左，看下不看上。

4、實(shí)驗(yàn)方案：大腸桿菌的檢驗(yàn)

（1）培養(yǎng)基的制備

1牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏（3g）、蛋白胨（10g）、氯化鈉（5g）、瓊脂（15-20g）、水（1000ml）、PH（7.0-7.2） 2伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(100ml) 20%乳糖溶液（2ml）、2%伊紅水溶液（2ml）、0.5%美藍(lán)水溶液（1ml） 3乳糖蛋白胨培養(yǎng)基、 蛋白胨（10g）、牛肉膏（3g）乳糖（5g）、氯化鈉 （5g）、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液（1ml）、蒸餾水（1000ml）ph（7.2-7.4）

用水浴鍋煮沸攪拌，之后導(dǎo)入錐形瓶中，趁熱緩慢導(dǎo)入培養(yǎng)皿中。121攝氏度滅菌20分鐘。

（2）培養(yǎng)基的檢驗(yàn)

將培養(yǎng)基放到22 ℃和37 ℃分別培養(yǎng)2d，觀察是否有菌落，若沒有菌落形成繼續(xù)下面實(shí)驗(yàn)。

（3）樣品的獲取：

自來水（對照試驗(yàn)）、渾河水樣

1檢測渾河水

2檢測自來水

（4）樣品處理：多管發(fā)酵法測定水中總大腸桿菌菌群

1自來水樣的檢測

a）在2個含有50mL 3倍濃縮的乳糖蛋白胨發(fā)酵瓶中，加各入100ml水樣。在10支含有5ml的3倍濃度乳糖濃度蛋白胨發(fā)酵管中，各加入10ml水樣均勻混合后在37攝氏度培養(yǎng)24小時，24小時未產(chǎn)生氣體繼續(xù)培養(yǎng)至48小時。

b）平板分離：將24小時培養(yǎng)后產(chǎn)酸的氣體和48小時培養(yǎng)后產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別畫線接種于伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基平板上，在于37度下培養(yǎng)18-24小時，將符合以下特征的菌落：有金屬光澤；紫黑色，不帶或者略帶金屬光澤；淡紫紅色，中心顏色較深，其中的一小部分進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢

c）復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)：經(jīng)涂片、染色、鏡檢，如果是革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分，重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，每管可接種來自同一初發(fā)酵管的同類型菌落1-3個，37度培養(yǎng)24小時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果若產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實(shí)又大腸桿菌存在。

2渾河水的檢測

水樣采取后，檢測水樣的稀釋濃度和接種水樣的總量，取決于估計(jì)水清潔或污染的程度，一般是：清潔水不需稀釋，接種水樣300ml，其中2分100ml，10份10ml；水輕度污染，稀釋成0.1，接種水樣111.1ml其中100ml、10ml、1ml、0.1ml各一份；水中度污染，稀釋成0.1 和0.01，，接種水量11.11ml其中10ml、1ml、0.1ml、0.01ml各一份；水嚴(yán)重污染，稀釋成0.1、0.01、0.001，接種水樣總量1.111ml，其中1ml、0.1ml、0.01ml、0.001ml各一份。

a)將水樣稀釋0.1、0.01

b)分別吸取1mL 0.01、0.1的稀釋水樣和1ml原水樣，各級注入裝有10ml普通濃度乳糖蛋白胨發(fā)酵管中。另取10ml和100ml原水樣，分別注入裝有5ml和50ml 三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵液試管中?；靹蚝?，37攝氏度培養(yǎng)24小時，若沒有氣體產(chǎn)生繼續(xù)培養(yǎng)48小時。

（5）數(shù)量評估

每個水樣取一毫升，用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法估測里面的細(xì)菌數(shù)量。根據(jù)不同情況選擇不同的溶液稀釋倍數(shù)

（6）濃度梯度溶液的制作

根據(jù)選擇水樣的不同，每種水樣稀釋三種不同的濃度，每種濃度做三次試驗(yàn)，制作濃度梯度溶液。

（7）數(shù)量檢測：

用滅菌吸管取1ml稀釋X倍的水樣注入滅菌的培養(yǎng)皿中，傾注約15ml已融化并冷卻到45℃的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，并立即放在平整的桌面上，作平面旋轉(zhuǎn)，使水樣與培養(yǎng)基充分混合。

（8）數(shù)量觀察：

培養(yǎng)基凝固后倒置于37 ℃培養(yǎng)24h之后進(jìn)行菌落統(tǒng)計(jì)。統(tǒng)計(jì)時候一定注意稀釋的倍數(shù)。

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